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色se譜pu柱zhu是shi高gao效xiao液ye相xiang色se譜pu儀yi最zui主zhu要yao的de部bu件jian，被bei測ce物wu質zhi能neng否fou被bei很hen好hao的de分fen離li和he測ce定ding，色se譜pu柱zhu的de性xing能neng起qi著zhe決jue定ding性xing的de作zuo用yong，因yin此ci，應ying特te別bie注zhu意yi色se譜pu柱zhu的活化環節，此外色譜柱的日常維護也很重要，有效地維護可以延長色譜柱的使用壽命。
液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以矽膠為柱，或是在矽膠表麵鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相矽膠柱；反相柱填料主要以矽膠為基質，在其表麵鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱，GPC柱，聚合物填料柱等。
色譜柱的活化
新(xin)的(de)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)都(dou)是(shi)保(bao)存(cun)在(zai)一(yi)定(ding)的(de)保(bao)存(cun)液(ye)中(zhong)的(de)，所(suo)謂(wei)的(de)活(huo)化(hua)就(jiu)是(shi)替(ti)換(huan)掉(diao)其(qi)中(zhong)的(de)保(bao)存(cun)液(ye)，衝(chong)洗(xi)掉(diao)柱(zhu)中(zhong)可(ke)能(neng)殘(can)留(liu)的(de)其(qi)他(ta)雜(za)質(zhi)，以(yi)免(mian)影(ying)響(xiang)後(hou)續(xu)分(fen)析(xi)工(gong)作(zuo)。液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)活(huo)化(hua)方(fang)法(fa)因(yin)柱(zhu)子(zi)而(er)異(yi)。
反相色譜柱：使用新的C18柱時，先用甲醇或乙-腈衝洗20-30個柱體積，然後用甲醇/乙-腈：水（50:50）衝洗10個柱體積，然後再用流動相平衡10-30柱體積。
正相色譜柱：新柱用流動相平衡20-30個柱體積。
離子色譜柱（SAX, SCX）：新柱先用100%甲醇或乙-腈衝洗20個柱體積，然後轉換到流動相平衡。
butongdesepuzhuhuohuadefangfabujinxiangtong，yaogenjuzhuzidezhongleilaixuanzehuohuafangfa。lingwai，yaotixingdeshi，zhuzihuohuashibuyaojiejianceqi，bimianbubiyaodewuran。
液相色譜柱的維護
色譜柱的維護有一定的程序：色譜柱的平衡、色譜柱的再生、最後才是色譜柱的維護。
1、色譜柱的平衡
反相色譜柱由工廠測試後是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈衝洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱，您就會在處理問題方麵獲得最大的"補償"，而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!
操作步驟：
a. 平衡開始時將流速緩慢地提高，用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線（緩衝鹽或離子對試劑流速如果較低，則需要較長的時間來平衡）
b. 如果使用的流動相中含有緩衝鹽，應注意用純水"過渡"即每天分析開始前必須先用純水衝洗30分鍾以上再用緩衝鹽流動相平衡; 分析結束後必須先用純水衝洗30分鍾以上除去緩衝鹽之後再用甲醇衝洗30分鍾保護柱子。
2、色譜柱的再生
長期使用的色譜柱，往往柱效會下降（柱子的理論塔板數減低）。可以對色譜柱進行再生，在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生。
選擇再生方法：
極性固定相（如Si，NH2* ，DIOL基色譜填料）的再生：正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水。
非極性固定相（如反相色譜填料RP-18，RP-8，CN等）的再生：水→乙腈→氯仿（或異丙醇）→乙腈→水。
注意：
a. 在對NH2改性的色譜柱進行再生時，由於NH2可能以銨根離子的形式存在，因此應該在水洗後用0.1M的氨水衝洗，然後再用水衝洗至堿溶液完全流出。
b. 0.05M稀硫酸可以用來清洗已汙染的色譜柱，如果簡單的用有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去矽膠表麵吸附的雜質，在水洗後加用0.05M稀硫酸衝洗非常有效。
3、色譜柱的維護
a.使用預柱保護分析柱（矽膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度）；
b.大多數反相色譜柱的pH穩定範圍是2-7.5，盡量不超過該色譜柱的pH範圍；
c.避免流動相組成及極性的劇烈變化；
d.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理；
e.如果使用極性或離子性的緩衝溶液作流動相，應在實驗完畢柱子衝洗幹淨，並保存於甲醇或乙腈中；
f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性，故使用時要注意，柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑，以避免腐蝕。
液相色譜柱的使用注意事項
液ye相xiang色se譜pu柱zhu的de儲chu存cun液ye無wu特te殊shu說shuo明ming，均jun為wei評ping價jia報bao告gao所suo示shi的de流liu動dong相xiang。在zai使shi用yong前qian，一yi定ding要yao注zhu意yi液ye相xiang色se譜pu柱zhu的de儲chu存cun液ye與yu要yao分fen析xi樣yang品pin的de流liu動dong相xiang是shi否fou互hu溶rong。在zai反fan相xiang色se譜pu中zhong，如ru用yong高gao濃nong度du的de鹽yan或huo緩huan衝chong液ye作zuo洗xi脫tuo劑ji，應ying先xian用yong10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩衝液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，堵塞色譜柱。
1、流動相
流動相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純，配流動相的水最好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動相再經過0.45μm 的濾膜過濾一次則更好，尤其是含鹽的流動相。另外，裝流動相的容器和色譜係統中的在線過濾器等裝置應該定期清洗或更換。
但如果您實驗室中同時有液質與液相的話，建議液質的流動相不要輕易過膜，容易出現交叉汙染，或者液質使用專門的過膜儀器。
液相與液質混用過膜裝置，導致三乙胺進入質譜，響應突然下降。
以常規矽膠為基質的鍵合相填料通常的pH值適用範圍是2.0-8.0。當必須要在pH值zhi適shi用yong範fan圍wei的de邊bian界jie條tiao件jian下xia使shi用yong色se譜pu柱zhu時shi，每mei次ci使shi用yong結jie束shu後hou立li即ji用yong適shi合he於yu色se譜pu柱zhu儲chu存cun並bing與yu所suo使shi用yong的de流liu動dong相xiang互hu溶rong的de溶rong劑ji清qing洗xi，並bing完wan全quan置zhi換huan掉diao原yuan來lai所suo使shi用yong的de流liu動dong相xiang。
不同填料的色譜柱，PH、柱溫的範圍是不一樣的。
2、樣品
樣品也要盡可能清潔，可選用樣品過濾器或樣品預處理柱（spe）對樣品進行預處理；若樣品不便處理，要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時，所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。
一般樣品高速離心就可以了，但需注意取上清時，不要取到下麵的沉澱物質以及色譜柱前最好加裝 預柱或在線過濾器。
3、反相液相色譜柱色譜柱每天實驗後的保養
使用緩衝液或含鹽的流動相，實驗完成後應用10%的甲醇/水衝洗30分鍾，洗掉色譜柱中的鹽，再用甲醇衝洗30分鍾。注意：不能用純水衝洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料衝塌陷。
4、長期保存色譜柱
rusepuzhuyaochangshijianbaocun，bixucunyuheshiderongjixia。duiyufanxiangzhukeyichucunyuchunjiachunhuoyijingzhong，zhengxiangzhukeyichucunyuyangetuoshuihoudechunzhengjiwanzhong，lizijiaohuanzhukeyichucunyushui（含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞）中，並將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。
文章（文字）來源：化學掌中寶。
