液相檢測注意點多，基礎內容不能丟，看到最後再收藏
發布日期：2022-07-22
核心提示：液相色譜儀，於多數檢測人來說是很好上手的儀器，但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員也會習慣於一些錯誤的操作，導致挺貴的機器沒用幾次就壞了。
簡化分析過程固然重要，但是為了省時間而忽略了一些必不可少的步驟，損壞了儀器就得不償失了。
做分析試驗時哪些操作不能做？哪些懶不能偷！
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
流(liu)動(dong)相(xiang)不(bu)應(ying)含(han)有(you)任(ren)何(he)腐(fu)蝕(shi)性(xing)物(wu)質(zhi)，含(han)有(you)緩(huan)衝(chong)液(ye)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)不(bu)應(ying)保(bao)留(liu)在(zai)泵(beng)內(nei)，尤(you)其(qi)是(shi)在(zai)停(ting)泵(beng)過(guo)夜(ye)或(huo)更(geng)長(chang)時(shi)間(jian)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)。如(ru)果(guo)將(jiang)含(han)緩(huan)衝(chong)液(ye)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)留(liu)在(zai)泵(beng)內(nei)，由(you)於(yu)蒸(zheng)發(fa)或(huo)泄(xie)©，甚至隻是由於溶液的靜置，就可能析出鹽的微細晶體，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環和柱塞等。因此，必須泵入純水將泵充分清洗後，再換成適合於色譜柱保存和有利於泵維護的溶劑（對於反相鍵合矽膠固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生©液。
可能是泵內有大量氣體，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5ml/min）下運轉，將氣泡排盡，也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損，需更換。
原因可能是氣泡，需要排除；或(huo)者(zhe)是(shi)單(dan)向(xiang)閥(fa)內(nei)有(you)異(yi)物(wu)，可(ke)卸(xie)下(xia)單(dan)向(xiang)閥(fa)，浸(jin)入(ru)丙(bing)酮(tong)內(nei)超(chao)聲(sheng)清(qing)洗(xi)。有(you)時(shi)可(ke)能(neng)是(shi)砂(sha)濾(lv)棒(bang)內(nei)有(you)氣(qi)泡(pao)，或(huo)被(bei)鹽(yan)的(de)微(wei)細(xi)晶(jing)粒(li)或(huo)滋(zi)生(sheng)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)部(bu)分(fen)堵(du)塞(sai)，這(zhe)時(shi)，可(ke)卸(xie)下(xia)砂(sha)濾(lv)棒(bang)浸(jin)入(ru)流(liu)動(dong)相(xiang)內(nei)超(chao)聲(sheng)除(chu)氣(qi)泡(pao)，或(huo)將(jiang)砂(sha)濾(lv)棒(bang)浸(jin)入(ru)稀(xi)酸(suan)（如4mol/L硝酸）內迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。
可能是是管·被堵塞，需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管·有泄©。檢查堵塞或泄©時應逐段進行。在進行梯度洗脫時，由於多種溶劑混合，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題，必須充分重視：PS：（zaiyexiangsepuzhongduizufenfuzadeyangpincaiyongtiduxituodefangfa。zaitongyigefenxizhouqizhong，anyidingchengxubuduangaibianliudongxiangdenongdupeibi，chengweitiduxituo。congerkeyishiyigefuzayangpinzhongdexingzhichayijiaodadezufennengangezishiyiderongliangyinzik達到良好的分離目的。梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖β；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。）
要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內混溶，超出範Χ後就不互溶，使用時更要引起注意。當有機溶劑和緩衝液混合時，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
tiduxituosuoyongderongjichunduyaoqiugenggao，yibaozhenglianghaodezhongxianxing。jinxingyangpinfenxiqianbixujinxingkongbaitiduxituo，yibianrenrongjizazhifeng，yinweiruorongjizhongdezazhifujizaisepuzhutouhouhuibeiqiangrongjixituoxialai。yongyutiduxituoderongjixuchedituoqi，yifangzhihunheshichanshengqipao。混(hun)合(he)溶(rong)劑(ji)的(de)粘(zhan)度(du)常(chang)隨(sui)組(zu)成(cheng)而(er)變(bian)化(hua)，因(yin)而(er)在(zai)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)時(shi)常(chang)出(chu)現(xian)壓(ya)力(li)的(de)變(bian)化(hua)。例(li)如(ru)甲(jia)醇(chun)和(he)水(shui)粘(zhan)度(du)都(dou)較(jiao)小(xiao)，當(dang)二(er)者(zhe)以(yi)相(xiang)近(jin)比(bi)例(li)混(hun)合(he)時(shi)粘(zhan)度(du)增(zeng)大(da)很(hen)多(duo)，此(ci)時(shi)的(de)柱(zhu)壓(ya)大(da)約(yue)是(shi)甲(jia)醇(chun)或(huo)水(shui)為(wei)流(liu)動(dong)相(xiang)時(shi)的(de)兩(liang)倍(bei)。因(yin)此(ci)要(yao)注(zhu)意(yi)防(fang)止(zhi)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)壓(ya)力(li)超(chao)過(guo)輸(shu)液(ye)泵(beng)或(huo)色(se)譜(pu)柱(zhu)能(neng)承(cheng)受(shou)的(de)最(zui)大(da)壓(ya)力(li)。①樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間λ置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉到進樣λ時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩衝鹽和樣品殘留在進樣閥中，ÿ次分析結束後應衝洗進樣閥。通常可用水衝洗，或先用能溶解樣品的溶劑衝洗，再用水衝洗。
色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。
避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。一般說來色譜柱不能反衝，隻有生產者指明該柱可以反衝時，才可以反衝除去留在柱頭的雜質。否則反衝會迅速降低柱效。
選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以(yi)避(bi)免(mian)固(gu)定(ding)相(xiang)被(bei)破(po)壞(huai)。有(you)時(shi)可(ke)以(yi)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)前(qian)麵(mian)連(lian)接(jie)一(yi)預(yu)柱(zhu)，分(fen)析(xi)柱(zhu)是(shi)鍵(jian)合(he)矽(gui)膠(jiao)時(shi)，預(yu)柱(zhu)為(wei)矽(gui)膠(jiao)，可(ke)使(shi)流(liu)動(dong)相(xiang)在(zai)進(jin)入(ru)分(fen)析(xi)柱(zhu)之(zhi)前(qian)預(yu)先(xian)被(bei)矽(gui)膠(jiao)“飽和”，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。bimianjiangjizhifuzadeyangpinyouqishishengwuyangpinzhijiezhuruzhunei，xuyaoduiyangpinjinxingyuchulihuozhezaijinyangqihesepuzhuzhijianlianjieyibaohuzhu。baohuzhuyibanshitianyouxiangsigudingxiangdeduanzhu。baohuzhukeyierqieyinggaijingchanggenghuan。
duiyuyiqibenshenyibanbuhuiyouwenti，tebieshigangmaihuilaidexinyiqi。duiyuyiqibenshenzuizhongyaodejiushiyiqidexiaoyan，gangmaihuilaideyiqiyibandoushiyoumaijiaxianduiyiqizuoxitongdequerengongzuo（包括IQ、PQ、OQ），確認順利通過後，再請國家或省級儀器檢定局的來校驗，檢定合格後就可以放心使用了，除此之外，一些做得好的公司ÿ半年會對儀器進行一次的內部校驗，目的就是為了保證儀器的正常可運行狀態。
色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。 流動相就涉及到配製流動相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大於18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的幹擾。色譜柱會因不同的品種而有不同的要求，但ÿ根gen色se譜pu柱zhu都dou有you它ta的de清qing洗xi要yao求qiu，這zhe個ge在zai色se譜pu柱zhu說shuo明ming書shu上shang都dou可ke以yi找zhao到dao，一yi定ding要yao根gen據ju上shang麵mian的de要yao求qiu進jin行xing，否fou則ze會hui造zao成cheng色se譜pu柱zhu效xiao下xia降jiang和he色se譜pu柱zhu的de使shi用yong壽shou命ming縮suo短duan，檢jian測ce波bo長chang也ye會hui因yin品pin種zhong的de不bu同tong有you不bu同tong的de要yao求qiu，這zhe裏li需xu要yao指zhi出chu的de是shi要yao注zhu意yi觀guan察cha檢jian測ce器qi氘dao燈deng能neng量liang的de變bian化hua，比bi如ru基ji線xian波bo動dong大da，活huo性xing成cheng分fen的de響xiang應ying值zhi突tu然ran變bian小xiao等deng，都dou有you可ke能neng是shi氘dao燈deng的de能neng量liang不bu足zu所suo引yin起qi的de，氘dao燈deng一yi般ban建jian議yi使shi用yong800小時，但實際上使用時間不止，可根據實際情況更換。流速也因品種的不同而不同，一般為1.0ml/min，流速是不可隨意改動的，特別是作為QCrenyuan，danshizuoweiyanfarenyuan，youshiweilemosuotiaojianhuojinxingfangfanaiyongxingyanzheng，huiduiliusujinxinggaibianyipingjiafangfadeshiyongxing。duiyujinyangliangyinbutongdepinzhongyeyoubutongguiding，jinyangliangzhekuaixianzaidoushiyongzidongjinyang，suoyijinyangjingmidudouhenhao，buxuqiangtiaoshenô。
shouxian，zuoweiyexiangcaozuorenyuan，yidingyaorenzhenxuexiyexiangdeshuomingshu，zhangwoyexiangyingjianheruanjiandecaozuo，zhangworichangdeweihubaoyang，zhangwozuijichuguzhangdepaichuheweixiu。yibanyexiangdecaozuoguichengyeshiyoucaozuorenyuanqicaode，suoyizhiyaoyangeanzhaocaozuoyaoqiujinxingcaozuo，yibanbuhuichuxianwenti，dangran啫lixuyaotebiezhichudeshiduiyuyexiangderichangweihubaoyanghenzhongyao，biruliudongxiangdeguolv、脫氣、泵密封墊的清洗、係統管·的清洗、溶劑過濾頭的清洗等，倘若不堅持，很容易導致色譜柱堵塞、係統壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費時間。其次，操作人員在配製液相分析用樣品溶液時，最好由同一個人單獨完成，以免不必要的偶然誤差。液相色譜儀應盡量安裝於水平、遠離振動、電dian磁ci幹gan擾rao的de屋wu內nei的de台tai麵mian上shang，有you條tiao件jian的de話hua盡jin量liang將jiang液ye相xiang數shu據ju處chu理li係xi統tong分fen隔ge開kai，一yi個ge是shi防fang止zhi色se譜pu基ji線xian噪zao音yin偏pian大da，基ji線xian不bu穩wen等deng，一yi個ge是shi為wei減jian少shao對dui人ren體ti的deΣ害。 編輯：songjiajie2010
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