如果色譜圖上出現的是雙峰：

（1）首先就會推測樣品可能含有兩個或以上的化合物。

（2）如果確保進樣的是化學純的單一物質，應當考慮是否是光學純的問題
，即可能存在手性異構體
，這就需采用手性色譜柱進行分析；此ci外wai，還hai需xu考kao慮lv是shi不bu是shi樣yang品pin不bu穩wen定ding的de原yuan因yin

，在zai該gai分fen析xi條tiao件jian下xia迅xun速su降jiang解jie成cheng兩liang個ge或huo以yi上shang的de化hua合he物wu。前qian麵mian兩liang種zhong情qing況kuang很hen好hao解jie決jue，畢bi竟jing是shi兩liang個ge不bu同tong的de化hua合he物wu，更geng換huan色se譜pu柱zhu、調整分析條件就能將其分開。

（3）ruguoquebaojinyangdeshiguangxuechundedanyiwuzhi，qiegaijiegouzaiciseputiaojianzhongwending，rengranchuxianleshuangfeng，tongchangbeichengweisepushuangfeng，yejiushidanyiwuzhizaiseputuzhongchuxianshuangfengdexianxiang。zhezhongqingkuangfeichangrongyiwudaofenxizhedepanduan
，namesepushuangfenggairuhepanbiequfen？shishenmeyuanyinchansheng
，yougairuhejiejuene
？keyicongyixiajifangmiansikaosepushuangfengdechanshengdeyuanyin。

色譜柱或保護柱汙染或塌陷
01

這是遇到色譜雙峰首先考慮的方麵，如果你分析樣品時發現每個色譜峰都出現雙峰（出峰越快，出現雙峰的可能性越少），尤其采用單一純物質時，可以判定色譜柱出問題（柱頭受損或柱頭固定相變髒或流失）。ruguojinyangliangshao，yuanlaisepuzhuzhengchang
，sepufengdexingzhuangduoweiyidafengdaiyixiaofeng，buyidingtuowei

，zheyibanyingshizhutouduandusai
，jiangsepuzhufanjiechongxiweihu

，yibanqingkuangxiakeyijiejue。ruguofengtuowei
，shuangfengqiangruoxiangchabuda
，zhutoutianliaoshouwuranhuojianhexiangliushikenengxinggengda，zheshikeyiduisepuzhuweixiuchulihuozheshiyongxindesepuzhu，weixiujianyijiaoyouchangjiachuli。

解決方案：將保護柱拿掉，檢測色譜雙峰是否有改善。如果沒有使用保護柱

，那就是色譜柱汙染或者堵塞（可以通過壓力判斷）
，最好的方法是將色譜柱反過來接，用流動相或其它溶劑衝洗、suanxi，jiangduzaizhutoudecanliuwuchongdiao，yibanqingkuangxiakeyijiejuesepushuangfengwenti。ruguoyijiubuxing，najiushiqiangxifuwuzhiwuranlesepuzhu，zeyoubiyaocaiqusepuzhuzaishengdefangfa。

溶劑效應
02

這(zhe)是(shi)雙(shuang)峰(feng)產(chan)生(sheng)的(de)一(yi)個(ge)很(hen)重(zhong)要(yao)的(de)原(yuan)因(yin)，即(ji)樣(yang)品(pin)溶(rong)劑(ji)與(yu)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)相(xiang)容(rong)性(xing)不(bu)好(hao)，導(dao)致(zhi)單(dan)一(yi)物(wu)質(zhi)出(chu)現(xian)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)。例(li)如(ru)當(dang)以(yi)中(zhong)等(deng)極(ji)性(xing)的(de)溶(rong)劑(ji)作(zuo)為(wei)進(jin)樣(yang)溶(rong)劑(ji)，如(ru)純(chun)甲(jia)醇(chun)、chunyijing，chunyichun
，erliudongxiangtixizhongyiqiangjixingshuiweizhu，yangpinjinyangtijijiaodashi，henkenengchuxiansepushuangfengxianxiang。zhuyaoshiyouyuyangpinrongjiyuliudongxiangjixingxiangchataida，liudongxianglaibujijiangjinyangrongjixishi，congeryinqisepuzhuneidehuanjingturanfashengjiaodadebianhua（即極性不均勻），造zao成cheng組zu分fen洗xi脫tuo不bu均jun勻yun，導dao致zhi色se譜pu峰feng裂lie分fen或huo分fen叉cha。對dui極ji性xing比bi較jiao敏min感gan的de化hua合he物wu容rong易yi產chan生sheng此ci種zhong情qing況kuang，通tong常chang表biao現xian在zai出chu峰feng時shi間jian較jiao早zao的de色se譜pu峰feng裂lie分fen
，對dui較jiao晚wan的de色se譜pu峰feng影ying響xiang較jiao小xiao
，且qie第di二er峰feng比bi第di一yi峰feng小xiao，常chang伴ban有you拖tuo尾wei。

解決方案：調整樣品的進樣溶劑，盡可能與流動相溶劑保持一致；此外
，減小樣品的進樣體積
，亦可以減少色譜雙峰的發生。

進樣量過載
03

tongchangbiaoxianweishuangfengjinkaozaiyiqi，jibenshangqigaobutuowei。zhuyaoshiyouyuyangpinjinyangnongduhengaohuojinyangtijihenda，sepuzhuguozai

，congerchuxiansepushuangfeng。ruguojiangdijinyangliangjiangyangpinxishihouzaijinyang，sepushuangfengjibenjiukeyigaishan。

解決方案：將樣品稀釋，同時減少進樣體積。

流動相的酸堿度
04

這種情況主要針對弱酸堿性化合物而言。流動相中酸堿pH值(zhi)不(bu)僅(jin)與(yu)峰(feng)拖(tuo)尾(wei)相(xiang)關(guan)，同(tong)時(shi)也(ye)可(ke)能(neng)出(chu)現(xian)色(se)譜(pu)雙(shuang)峰(feng)。通(tong)常(chang)是(shi)第(di)二(er)峰(feng)比(bi)第(di)一(yi)峰(feng)小(xiao)，當(dang)出(chu)峰(feng)時(shi)間(jian)較(jiao)早(zao)時(shi)，兩(liang)峰(feng)高(gao)差(cha)距(ju)較(jiao)大(da)
，第(di)二(er)峰(feng)較(jiao)小(xiao)，甚(shen)至(zhi)消(xiao)失(shi)；當dang出chu峰feng時shi間jian較jiao長chang時shi，峰feng高gao趨qu於yu相xiang等deng。主zhu要yao可ke能neng是shi樣yang品pin在zai流liu動dong相xiang中zhong存cun在zai酸suan堿jian解jie離li平ping衡heng，化hua合he物wu同tong時shi存cun在zai已yi解jie離li和he未wei解jie離li兩liang種zhong分fen子zi狀zhuang態tai。我wo們men曾zeng采cai用yongHPLC製備分離過一類膽汁酸類成分，流動相中加入0.01%甲酸，雖色譜峰不拖尾
，但幾乎每個膽汁酸類色譜峰裂分成雙峰。當提高流動相中甲酸的濃度至0.05%和0.1%，可以明顯看到膽汁酸色譜峰的裂分距離縮小，明顯的由色譜雙峰向單峰融合。

解決方案：改變流動相中酸堿的pH值，提高酸堿的濃度
，在更強的酸堿性條件進行分析。

樣品的互變異構
05

如果某一物質出現雙峰
，兩峰緊靠且不拖尾，條件稍加變化，如pH、溫度改變，雙峰消失或減小，例如紅黴素等。有的樣品采用LC/MSfenxishi，ziwaiseputusuibuyiguanchadaoshuangfeng，danzhipuzongliziliutuchuxianjiaoweimingxiandesepushuangfeng。zhekenengyutedingdewuzhiyouguan，youyuqihuaxuejiegoudetedian，cunzaihubianyigouxianxiang，zhezhonghubianyigoutiwufafenkai，ershiyiyigedongtaipinghengcunzai
，rutongshihexichunshihubian。

解決方案：了解樣品性質
，調整色譜方法
，如改變流動相或進樣溶劑中pH值、緩衝鹽，降低或升高柱溫箱的溫度等，以減少互變異構的發生
，促使樣品在分析條件中主要以單一構型為主。

儀器參數設置不合理
06

參比波長設置錯誤，例如設置分析波長254nm，參比波長400nm，這個對於大多數化合物可能沒影響。但是如果被測化合物
，在400nm處也有強的紫外吸收，比254nm更強。這樣其出峰時，由於背景的抵扣作用
，本來一個峰會變成對稱的二個峰，而且如果將二峰之間的峰穀反轉180度，恰好是一個完整的峰。這時要將參比波長設置更大，或者取消。