一、流動相溶劑瓶的保養 

溶劑瓶是流動相的起點，通常是盛放水相溶液或是有機相溶液。

1、水相溶液，對於水相溶液來說
，首要的問題是防止汙染。對於溶劑瓶我們要做的非常重要的工作就是勤換流動相
，常換常新。

2、有(you)機(ji)相(xiang)溶(rong)液(ye)
，對(dui)於(yu)有(you)機(ji)相(xiang)溶(rong)液(ye)，可(ke)以(yi)不(bu)用(yong)擔(dan)心(xin)細(xi)菌(jun)繁(fan)殖(zhi)的(de)問(wen)題(ti)。但(dan)是(shi)有(you)機(ji)相(xiang)容(rong)易(yi)發(fa)生(sheng)聚(ju)合(he)，特(te)別(bie)是(shi)乙(yi)腈(jing)在(zai)適(shi)宜(yi)的(de)光(guang)照(zhao)條(tiao)件(jian)下(xia)極(ji)易(yi)發(fa)生(sheng)聚(ju)合(he)，瓶(ping)子(zi)裏(li)就(jiu)會(hui)出(chu)現(xian)一(yi)些(xie)絮(xu)狀(zhuang)的(de)聚(ju)合(he)沉(chen)澱(dian)物(wu)。為(wei)了(le)防(fang)止(zhi)聚(ju)合(he)過(guo)程(cheng)的(de)發(fa)生(sheng)，裝(zhuang)乙(yi)腈(jing)時(shi)要(yao)用(yong)棕(zong)色(se)的(de)溶(rong)劑(ji)瓶(ping)，避(bi)免(mian)陽(yang)光(guang)直(zhi)射(she)
，更(geng)換(huan)乙(yi)腈(jing)時(shi)應(ying)當(dang)棄(qi)去(qu)瓶(ping)底(di)剩(sheng)餘(yu)的(de)溶(rong)液(ye)。

3

、清(qing)洗(xi)過(guo)濾(lv)
，溶(rong)劑(ji)瓶(ping)裏(li)的(de)過(guo)濾(lv)頭(tou)，其(qi)作(zuo)用(yong)是(shi)為(wei)了(le)防(fang)止(zhi)溶(rong)液(ye)瓶(ping)中(zhong)的(de)顆(ke)粒(li)雜(za)質(zhi)進(jin)入(ru)到(dao)儀(yi)器(qi)的(de)流(liu)路(lu)係(xi)統(tong)中(zhong)
，它(ta)的(de)材(cai)質(zhi)通(tong)常(chang)分(fen)為(wei)玻(bo)璃(li)燒(shao)結(jie)石(shi)英(ying)和(he)不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)
，如(ru)果(guo)不(bu)慎(shen)堵(du)塞(sai)會(hui)造(zao)成(cheng)流(liu)動(dong)相(xiang)吸(xi)液(ye)不(bu)暢(chang)，因(yin)此(ci)必(bi)須(xu)進(jin)行(xing)清(qing)洗(xi)，玻(bo)璃(li)材(cai)質(zhi)的(de)通(tong)常(chang)是(shi)用(yong)稀(xi)硝(xiao)酸(suan)泡(pao)
，而(er)不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)材(cai)質(zhi)的(de)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)進(jin)行(xing)超(chao)聲(sheng)清(qing)洗(xi)。

二、高壓泵的保養 

泵beng是shi液ye相xiang色se譜pu的de核he心xin，泵beng將jiang流liu動dong相xiang從cong溶rong劑ji瓶ping輸shu送song到dao液ye相xiang流liu路lu係xi統tong中zhong，並bing要yao在zai高gao壓ya下xia保bao持chi流liu量liang和he壓ya力li的de穩wen定ding。狀zhuang態tai正zheng常chang的de高gao壓ya泵beng是shi液ye相xiang色se譜pu準zhun確que分fen析xi的de基ji礎chu，所suo以yi平ping日ri一yi定ding要yao重zhong視shi對dui泵beng的de維wei護hu。

1、泵beng壓ya力li波bo動dong
，很hen多duo情qing況kuang下xia
，泵beng的de問wen題ti反fan映ying在zai壓ya力li上shang
，壓ya力li波bo動dong又you是shi常chang見jian的de一yi類lei問wen題ti。通tong常chang我wo們men可ke以yi通tong過guo重zhong新xin清qing洗xi流liu路lu和he再zai次ci脫tuo氣qi流liu動dong相xiang加jia以yi解jie決jue。

2
、過濾白頭保養

，在泵的維護裏還有一項常做的工作就是更換清洗閥上的過濾白頭，通常判斷的標準是純水以5mL/min流速清洗的時候，如果壓力超過1MPa則考慮更換。

三
、進樣器的保養 

進樣器分手動和自動兩大類，雖然兩者工作模式不同，但使用的要點是基本一致的。

1、防fang止zhi交jiao叉cha汙wu染ran，自zi動dong進jin樣yang器qi常chang見jian的de問wen題ti是shi交jiao叉cha汙wu染ran
，交jiao叉cha汙wu染ran產chan生sheng的de原yuan因yin很hen直zhi接jie，樣yang品pin殘can留liu在zai進jin樣yang針zhen內nei外wai表biao麵mian，並bing隨sui下xia一yi次ci進jin樣yang進jin入ru色se譜pu係xi統tong。要yao解jie決jue交jiao叉cha汙wu染ran，主zhu要yao靠kao清qing洗xi。

2、精細操作
，手動進樣器的操作要點大致相同，應使用液相色譜LC專用進樣針，進樣時插針應插到底，不使用時將針頭留在進樣器內，使用前後都要及時清洗。

四


、色譜柱的保養 

色譜柱是化合物分離的關鍵。保養良好的色譜柱具有很高的塔板數，且儀器基線平穩。

1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況
；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。

2、應逐漸改變溶劑的組成
，特別是反相色譜中
，不應直接從有機溶劑改變為全部是水


，反之亦然。

3、色譜柱反衝
，納譜分析小分子分離液相色譜柱ChromCore係列和EcoPak係列色譜柱可以反衝；納譜分析手性色譜柱UniChiral係列色譜柱可以反衝，反衝可以除去留在柱頭的雜質。但是納譜分析生物大分子液相色譜柱BioCore係列色譜柱不要反衝，否則反衝會迅速降低柱效。

4、選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以(yi)避(bi)免(mian)固(gu)定(ding)相(xiang)被(bei)破(po)壞(huai)。有(you)時(shi)可(ke)以(yi)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)前(qian)麵(mian)連(lian)接(jie)一(yi)預(yu)柱(zhu)
，分(fen)析(xi)柱(zhu)是(shi)鍵(jian)合(he)矽(gui)膠(jiao)時(shi)，預(yu)柱(zhu)為(wei)矽(gui)膠(jiao)，可(ke)使(shi)流(liu)動(dong)相(xiang)在(zai)進(jin)入(ru)分(fen)析(xi)柱(zhu)之(zhi)前(qian)預(yu)先(xian)被(bei)矽(gui)膠(jiao)“飽和”，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。

5、避(bi)免(mian)將(jiang)基(ji)質(zhi)複(fu)雜(za)的(de)樣(yang)品(pin)尤(you)其(qi)是(shi)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)直(zhi)接(jie)注(zhu)入(ru)柱(zhu)內(nei)，需(xu)要(yao)對(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)行(xing)預(yu)處(chu)理(li)或(huo)者(zhe)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)和(he)色(se)譜(pu)柱(zhu)之(zhi)間(jian)連(lian)接(jie)一(yi)保(bao)護(hu)柱(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)一(yi)般(ban)是(shi)填(tian)有(you)相(xiang)似(si)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)短(duan)柱(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)可(ke)以(yi)而(er)且(qie)應(ying)該(gai)經(jing)常(chang)更(geng)換(huan)。

6、經(jing)常(chang)用(yong)強(qiang)溶(rong)劑(ji)衝(chong)洗(xi)色(se)譜(pu)柱(zhu)
，清(qing)除(chu)保(bao)留(liu)在(zai)柱(zhu)內(nei)的(de)雜(za)質(zhi)。在(zai)進(jin)行(xing)清(qing)洗(xi)時(shi)
，對(dui)流(liu)路(lu)係(xi)統(tong)中(zhong)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)置(zhi)換(huan)應(ying)以(yi)相(xiang)混(hun)溶(rong)的(de)溶(rong)劑(ji)逐(zhu)漸(jian)過(guo)渡(du)，每(mei)種(zhong)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)體(ti)積(ji)應(ying)是(shi)柱(zhu)體(ti)積(ji)的(de)20倍左右，即常規分析需要50~75ml。

下麵列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序

，作為參考：

矽膠柱以正已烷（或庚烷）
、erlvjiawanhejiachunyicichongxi，ranhouzaiyixiangfanshunxuyicichongxi，suoyourongjidoubixuyangetuoshui。jiachunnengxiqucanliudeqiangjixingzazhi，yiwanshiguijiaobiaomianzhongxinhuohua。

反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次衝洗
，再以相反順序依次衝洗。

如果下一步分析用的流動相不含緩衝液，那麼可以省略最後用水衝洗這一步。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質，在甲醇（乙腈）衝洗時重複注射100~200µl四氫呋喃數次有助於除去強疏水性雜質。四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時也注射二甲亞碸數次。此外，用乙腈
、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脫能除去蛋白質汙染。

陽離子交換柱可用稀酸緩衝液衝洗


，陰離子交換柱可用稀堿緩衝液衝洗，除去交換性能強的鹽，然後用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表麵的有機物）、甲醇、水依次衝洗。

7、保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發幹燥。禁止將緩衝溶液留在柱內靜置過晚上或更長時間。

8
、色譜柱使用過程中

，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被汙染；如果柱效降低或色譜峰變形
，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。

在後兩種情況發生時，小心擰開柱接頭，用潔淨小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被汙染填料取淨）再把柱內填料整平。然後用適當溶劑濕潤的固定相（與柱內相同）填滿色譜柱，壓平
，再擰緊柱接頭。這樣處理後柱效能得到改善
，但是很難恢複到新柱的水平。

柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱（5~30mm）

，可以起到保護、延長柱壽命的作用。采用保護柱會損失一定的柱效，這是值得的。

通常以矽膠為基質的色譜柱，隻能在pH2~9範fan圍wei內nei使shi用yong。柱zhu子zi使shi用yong一yi段duan時shi間jian後hou，可ke能neng有you一yi些xie吸xi附fu作zuo用yong強qiang的de物wu質zhi保bao留liu於yu柱zhu頂ding
，特te別bie是shi一yi些xie有you色se物wu質zhi更geng易yi看kan清qing被bei吸xi著zhe在zai柱zhu頂ding的de填tian料liao上shang。新xin的de色se譜pu柱zhu在zai使shi用yong一yi段duan時shi間jian後hou柱zhu頂ding填tian料liao可ke能neng塌ta陷xian

，使shi柱zhu效xiao下xia降jiang

，這zhe時shi也ye可ke補bu加jia填tian料liao使shi柱zhu效xiao恢hui複fu。

每次工作完後
，用洗脫能力強的洗脫液衝洗
，例如ODS柱宜用甲醇衝洗至基線平衡。當采用鹽緩衝溶液作流動相時，使用完後應用無鹽流動相衝洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用，應每隔4~5天開機衝洗15分鍾。

五、檢測器的保養 

1、光源部分

檢jian測ce器qi中zhong非fei常chang重zhong要yao的de部bu件jian是shi光guang源yuan，光guang源yuan對dui發fa射she能neng量liang有you要yao求qiu，一yi旦dan能neng量liang衰shuai減jian到dao一yi定ding程cheng度du，就jiu會hui出chu現xian基ji線xian噪zao聲sheng變bian大da，靈ling敏min度du降jiang低di等deng一yi係xi列lie影ying響xiang使shi用yong的de問wen題ti，因yin此ci光guang源yuan是shi一yi個ge消xiao耗hao品pin。通tong常chang紫zi外wai燈deng的de壽shou命ming是shi2000h，當到達這個時限的時候，我們就要特別關注燈的能量狀況
，可以通過儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”功能來判斷，測試的結果會分別評估低、中、高三個波長段的能量

，一旦某個波長段的測試結果顯示失敗，就表示需要更換燈。

2、檢測池

檢(jian)測(ce)器(qi)中(zhong)另(ling)一(yi)個(ge)重(zhong)要(yao)部(bu)件(jian)是(shi)檢(jian)測(ce)池(chi)，也(ye)叫(jiao)流(liu)通(tong)池(chi)。通(tong)常(chang)大(da)家(jia)關(guan)心(xin)的(de)一(yi)個(ge)問(wen)題(ti)是(shi)檢(jian)測(ce)池(chi)被(bei)堵(du)掉(diao)
，因(yin)為(wei)檢(jian)測(ce)池(chi)通(tong)常(chang)不(bu)是(shi)很(hen)耐(nai)壓(ya)
，所(suo)以(yi)一(yi)旦(dan)被(bei)堵(du)就(jiu)很(hen)可(ke)能(neng)造(zao)成(cheng)損(sun)壞(huai)。事(shi)實(shi)上(shang)檢(jian)測(ce)池(chi)通(tong)常(chang)不(bu)太(tai)容(rong)易(yi)被(bei)堵(du)，原(yuan)因(yin)是(shi)幾(ji)乎(hu)所(suo)有(you)的(de)顆(ke)粒(li)雜(za)質(zhi)都(dou)會(hui)被(bei)色(se)譜(pu)柱(zhu)攔(lan)下(xia)了(le)，所(suo)以(yi)堵(du)塞(sai)檢(jian)測(ce)器(qi)的(de)東(dong)西(xi)基(ji)本(ben)都(dou)不(bu)是(shi)來(lai)自(zi)樣(yang)品(pin)的(de)
，很(hen)可(ke)能(neng)是(shi)後(hou)來(lai)“產生”的，比如含鹽流動相殘留在檢測池中導致鹽析出。

六、廢液的處置