HPLC係(xi)統(tong)內(nei)部(bu)可(ke)能(neng)的(de)汙(wu)染(ran)物(wu)來(lai)自(zi)人(ren)的(de)觸(chu)摸(mo),暴(bao)露(lu)在(zai)實(shi)驗(yan)室(shi)化(hua)學(xue)環(huan)境(jing),與(yu)零(ling)部(bu)件(jian)製(zhi)造(zao)相(xiang)關(guan)的(de)殘(can)留(liu)物(wu),或(huo)來(lai)自(zi)先(xian)前(qian)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)和(he)樣(yang)品(pin)的(de)殘(can)餘(yu)物(wu)。雖(sui)然(ran)HPLC係統自身也會逐步地被流動相清洗,但某些釋放出的雜質會吸附在色譜柱上以及檢測器潤濕的表麵上,因而會降低總的性能。
•磷酸清洗:通常用於從係統中除去有機雜質。可能是由於洗滌作用,它似乎比強有機溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成。
•硝酸鈍化:實際上是作用於不鏽鋼表麵,在表麵上生成均勻的氧化層。這層氧化膜保護不鏽鋼免受腐蝕(鹵化物,螯合劑,等等)並且盡量減少浸出的金屬離子進入流動相。
以下應用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化,包括:
•所有的氨基酸分析係統;
•所有包含電化學檢測器的係統;
•所有要分析無機陽離子,包括過渡金屬的係統;
•所有利用柱後添加衍生試劑或絡合樣品組分的係統。
以下應用需要在使用前隻做磷酸清洗,包括:
•所有常規用途的、可能在低pH環境下在低紫外檢測波長下運行的HPLC係統;
•所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測係統。
一準備工作
首先,摘下色譜柱,用兩通或接頭取代色譜柱。在實行這一清洗步驟時,如果有可能選擇監測的紫外波長為:254nm。通過軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測器的自動回零功能。
二具體步驟
1、用甲醇徹底衝洗係統,以等比例方式通過泵的所有管路。
2、用水徹底衝洗係統,以等比例方式通過泵的所有管路。
3、以等比例方式通過泵的所有管路導入~30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個小時。在衝洗期間活動所有的閥,包括:參比閥、進樣閥及旁路閥等等。
4.用水徹底衝洗所有管路和係統。
必要時用6N硝酸(HN03)重複以上步驟。否則,跳到第7步。注意:硝酸是一個強紫外吸收溶液。除非絕對需要,不要做鈍化程序。
5.以等比例方式通過泵的所有管路導人6N硝酸水溶液(大約是40%)。以1mL/min流速洗大約一個小時。
6.用水徹底衝洗係統,仔細檢查是否有任何滲漏,在衝洗期間反複活動所有的閥,包括:參比閥、進樣閥及旁路閥等等。
注意:如果你要用低於270nm的紫外波長作檢測,則需要更大量水的清洗過程,不斷的換新鮮水並活動各個閥(衝洗進樣器,等)以yi便bian從cong係xi統tong中zhong除chu去qu所suo有you的de痕hen量liang硝xiao酸suan根gen離li子zi。硝xiao酸suan清qing洗xi後hou經jing常chang在zai幾ji天tian之zhi內nei都dou會hui觀guan察cha到dao在zai低di紫zi外wai波bo長chang下xia有you負fu的de基ji線xian漂piao移yi。勤qin換huan水shui和he有you耐nai心xin是shi盡jin快kuai消xiao除chu紫zi外wai本ben底di的de關guan鍵jian。
7.返回到甲醇洗,然後繼續用實驗所需的溶劑衝洗。
8.通過軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測器的自動回零功能恢複。
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