毛細管色譜柱最常用的是聚矽氧烷和聚乙二醇,另外還有一類是小的多孔粒子組成的聚合物或沸石(例如氧化鋁、分子篩等)。
1、聚矽氧烷
聚矽氧烷由於其用途廣泛、性能穩定性,是 最(zui)常(chang)用(yong)的(de)固(gu)定(ding)相(xiang)。標(biao)準(zhun)的(de)聚(ju)矽(gui)氧(yang)烷(wan)是(shi)由(you)許(xu)多(duo)單(dan)個(ge)的(de)矽(gui)氧(yang)烷(wan)鏈(lian)接(jie)而(er)成(cheng)。每(mei)個(ge)矽(gui)原(yuan)子(zi)與(yu)兩(liang)個(ge)功(gong)能(neng)集(ji)團(tuan)相(xiang)連(lian),最(zui)常(chang)見(jian)的(de)功(gong)能(neng)集(ji)團(tuan)為(wei)甲(jia)基(ji)和(he)苯(ben)基(ji),此(ci)外(wai)還(hai)有(you)氰(qing)丙(bing)基(ji)和(he)三(san)氟(fu)丙(bing)基(ji)。 些功能集團的類型和數量決定了色譜柱固定相的性質。最基本的聚矽氧烷是由100%甲基取代的,相應的柱子牌號有:HP-1、BP-1、DB-1、SE-30等。若有其他取代基取代甲基時,該取代基的數量一般由一個百分數來表示。例如:5%二苯基-95%二甲基聚矽氧烷表示其包含有5%的苯基集團和95%的甲基集團(“二”是表示每個矽原子包含有兩個特定集團)。相應的柱子牌號有:HP-5、BP-5、DB-5、SE-54等。如果甲基的百分數沒有表征,則表示它們的含量是100%(如50%苯基-甲基聚矽氧烷表示甲基的含量為50%)。相應的柱子牌號有:HP-50+、BPX-200、DB-17等。
2、聚乙二醇
聚乙二醇是另外一類廣泛應用的固定相。有些我們稱之為“WAX”或“FFAP”。聚乙二醇的穩定性、使用溫度範圍都比聚矽氧烷要差一些。聚乙二醇固定相色譜柱的壽命較短,而且容易受溫度和環境(有氧環境等)的影響。但由於它的極性比較強,對極性物質有特殊的分離效能,所以仍是我們常用的固定相之一。為了提高分離效能,還有用pH陽離子改性聚乙二醇固定相。FFAP柱就是一類用對苯二甲酸改性的聚乙二醇作為固定相的(DB-FFAP)。這種色譜柱常用於分析分離酸性化合物。另外,我們也用堿性化合物對聚乙二醇固定相改性用來分析分離堿性化合物(CAM)。相應的柱子牌號有:HP-Wax、DB-Wax、Carbowax-10,HP-INNOWax、DB-WAXetr、Carbowax-20M,HP-FFAP、DB FFAP、OV-351等。
3、氣-固固定相
氣-固固定相就是在管壁表麵粘合很薄一層的小顆粒物質,通常叫做多孔層開口管(PLOT)柱。樣品是通過在氣—固固定相上產生吸附/脫附作用來分離的。它們常用來分離各種氣體及低沸點溶劑。最為常用的PLOT柱固定相有苯乙烯衍生物、氧化鋁和分子篩等。相應的柱子牌號有:HP PLOT Al2O3“S”、HP PLOT Al2O3“KCl”、GS-Al2O3、CP-Al2O3/KCl、HP PLOT Q、HP PLOT U等。
4、鍵合和交聯固定相
為(wei)了(le)改(gai)善(shan)柱(zhu)子(zi)的(de)性(xing)能(neng),常(chang)采(cai)用(yong)鍵(jian)合(he)和(he)交(jiao)聯(lian)的(de)方(fang)式(shi)。交(jiao)聯(lian)是(shi)將(jiang)多(duo)個(ge)聚(ju)合(he)物(wu)鏈(lian)單(dan)體(ti)通(tong)過(guo)共(gong)價(jia)鍵(jian)進(jin)行(xing)連(lian)接(jie),鍵(jian)合(he)是(shi)將(jiang)其(qi)再(zai)通(tong)過(guo)共(gong)價(jia)鍵(jian)與(yu)管(guan)壁(bi)表(biao)麵(mian)相(xiang)連(lian)。這(zhe)樣(yang)處(chu)理(li)的(de)結(jie)果(guo)使(shi)得(de)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)熱(re)穩(wen)定(ding)性(xing)和(he)溶(rong)劑(ji)穩(wen)定(ding)性(xing)都(dou)有(you)較(jiao)大(da)的(de)提(ti)高(gao)。所(suo)以(yi),鍵(jian)合(he)交(jiao)聯(lian)固(gu)定(ding)相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)溶(rong)劑(ji)的(de)浸(jin)洗(xi),從(cong)而(er)去(qu)除(chu)柱(zhu)內(nei)的(de)汙(wu)染(ran)物(wu)。
常見色譜柱固定相的使用溫度
1、聚二甲基矽酮類固定相: OV-1 , SE-30 (彈性體,OV-101 , SF96 , DC2000流體),使用溫度上限為300C,但把溫度上限改為280℃,可使柱子壽命顯著延長。一般來說,彈性體類固定液比流體類 穩定些,SF96 , DC200因含有較高水平的殘留催化劑和不純物,不宜作GC/MS分析。
2、聚苯基乙基矽酮:SE-52(彈性體,5%苯基),SE-54(彈性體,5%苯基,1%乙烯基),DC10(液體,35%苯基),OV-17(液體,50%苯基)實際上限250℃。SE-52、SE-54在280時穩定性很好,常用於GC/MS分析,並能容納超負荷的大進樣量。苯基含量增加、穩定性要差點。
3、聚氰丙基矽酮是極性強的矽酮固定液:OV225(液體,25%氰丙基,25%苯基),Silav10c、SP2340(液體,75%氰丙基),實際溫度上限是250℃。
4、聚乙二醇型(Carbowax or PEG)固定液是乙烯氧化物聚合體的混合物,其名稱反映了他們分子量變化範圍的平均值。Carbowax 20000(臘狀固體),FFAP(兩終端都是對苯二甲酸的Carbowax 20000),實際溫度上限是220℃。
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