問:用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移
，有時發生快速變化，原因何在？如何解決？
答:關於漂移問題：

1． 溫度控製不好
，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定

2． 流動相發生變化
，解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等

3． 柱子未平衡好
，需對柱子進行更長時間的平衡

關於快速變化問題

1． 流速發生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩定

2． 泵中有氣泡
，可通過排氣等操作將氣泡趕出。

3． 流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控製室內進行適當混合

問: 色質聯用中毛細柱的選擇應注意什麼問題
？

答: 1． 柱效要高

2． 熱穩定性好

3． 化學惰性強

具體選擇應注意

1． 柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析

2． 柱子內徑。內徑大小決定柱容量

3． 液膜厚度。分析樣品溫度不一樣
，對膜厚有不同要求，溫度高液膜要厚，溫度低液膜要薄

4． 柱長度。柱越長
，柱效越高，分離效果越好
，但也存在吸附問題，柱子過長，分析時間長，因此要根據樣品考慮柱子長度

5． 外塗層（柱體）的選擇。

6． 另外還有儀器型號
、分析對象等因素

問:液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什麼？

答: 1． 篩板堵塞或柱失效
，解決辦法是反向衝洗柱子，替換篩板或更換柱子。

2． 存在幹擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子

問：從那些方麵可以簡單判別毛細管柱子的熱穩定性好壞
？

答： 1． 分配容量（或容量因子）K，好的柱子在高溫運行後，分配容量K不應有明顯的下降，否則，說明柱子的熱穩定性不好

2． 理論塔板數n，熱穩定性好的柱子經受高溫後，理論塔板數應基本保持恒定

3． 柱子的極性。熱穩定性好的柱子，高溫前後極性變化不大，具體表現為保留指數I值沒有大的變化。

4． 噪聲。熱穩定性好的柱子在高溫下使用後，噪聲不能增加。

5． 柱(zhu)子(zi)的(de)去(qu)活(huo)層(ceng)，毛(mao)細(xi)管(guan)柱(zhu)子(zi)塗(tu)固(gu)定(ding)液(ye)前(qian)內(nei)部(bu)一(yi)般(ban)要(yao)用(yong)去(qu)活(huo)性(xing)試(shi)劑(ji)去(qu)活(huo)以(yi)增(zeng)加(jia)惰(duo)性(xing)。質(zhi)量(liang)好(hao)的(de)毛(mao)細(xi)管(guan)柱(zhu)子(zi)高(gao)溫(wen)後(hou)


，去(qu)活(huo)層(ceng)不(bu)應(ying)該(gai)變(bian)化(hua)，表(biao)現(xian)在(zai)對(dui)強(qiang)極(ji)性(xing)樣(yang)品(pin)或(huo)酸(suan)堿(jian)性(xing)樣(yang)品(pin)的(de)吸(xi)附(fu)性(xing)不(bu)能(neng)增(zeng)加(jia)。

問：為什麼進樣器內的玻璃襯套會對色譜行為造成影響
？

答：進樣器內的玻璃襯套主要有下列作用：

1． 提供一個溫度均勻的汽化室，防止局部過熱。

2． 玻璃的惰性不不鏽鋼好，減少了在汽化期間樣品分解的可能性。

3． 易(yi)於(yu)拆(chai)換(huan)清(qing)洗(xi)，以(yi)保(bao)持(chi)清(qing)潔(jie)的(de)汽(qi)化(hua)室(shi)表(biao)麵(mian)
，一(yi)些(xie)痕(hen)量(liang)非(fei)揮(hui)發(fa)性(xing)組(zu)分(fen)會(hui)逐(zhu)漸(jian)積(ji)累(lei)殘(can)存(cun)於(yu)汽(qi)化(hua)室(shi)，高(gao)溫(wen)下(xia)會(hui)慢(man)慢(man)分(fen)解(jie)
，使(shi)基(ji)流(liu)增(zeng)加(jia)，噪(zao)聲(sheng)增(zeng)大(da)，通(tong)過(guo)清(qing)洗(xi)玻(bo)璃(li)襯(chen)套(tao)可(ke)以(yi)消(xiao)除(chu)這(zhe)種(zhong)影(ying)響(xiang)。

4． 可根據需要選擇管壁厚度及內徑適宜的玻璃襯套，以改變汽化室的體積
，而不用更換整個進樣加熱塊。
從以上幾個方麵可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。

問：毛細管色譜分流進樣時
，非線性分流的主要原因是什麼？name="6">
答:1． 進樣器溫度太低，樣品汽化不完全，發生分級分流。

2． 進樣器溫度太高，某些組分可能發生熱分解，也有的樣品可能發生催化分解，或樣品部分地被吸附在進樣器內表麵上。

3． 在分流點以前樣品沒有混合均勻或混合不充分。

4． 係統的進樣墊
、柱接頭等地方漏氣。

問：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法

答: 1． 樣品量不足
，解決辦法為增加樣品量

2． 樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子

3． 樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器

4． 檢測器衰減太多。調整衰減即可。

5． 檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間參數

6． 檢測器池窗汙染。解決辦法為清洗池窗。

7． 檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

8． 記錄儀測壓範圍不當。調整電壓範圍即可。

9． 流動相流量不合適。調整流速即可。

10． 檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器
，重作校正曲線。

問：做HPLC分析時，柱壓不穩定
，原因何在
？如何解決
？

答：原因可能有：

1． 泵內有空氣，解決的辦法是清除泵內空氣，對溶劑進行脫氣處理；

2． 比例閥失效，更換比例閥即可
；

3． 泵密封墊損壞，更換密封墊即可


；

4． 溶劑中的氣泡
，解決的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法；

5． 係統檢漏，找出漏點，密封即可
；

6． 梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。

問：做PGS/MS分析時，如何防止焦油狀汙染物進入毛細柱

？

答：聚ju合he物wu，尤you其qi是shi一yi些xie含han氮dan，硫liu及ji鹵lu素su的de高gao分fen子zi裂lie解jie時shi
，常chang有you焦jiao油you狀zhuang物wu質zhi產chan生sheng。為wei防fang止zhi這zhe種zhong焦jiao油you狀zhuang物wu質zhi進jin入ru毛mao細xi柱zhu造zao成cheng汙wu染ran而er使shi柱zhu性xing能neng下xia降jiang，可ke采cai用yong保bao護hu預yu柱zhu，即ji在zai裂lie解jie器qi與yu毛mao細xi柱zhu之zhi間jian接jie一yi填tian充chong預yu柱zhu，通tong過guo控kong製zhi預yu柱zhu溫wen度du而er使shi焦jiao油you狀zhuang物wu質zhi滯zhi留liu在zai預yu柱zhu內nei
，預yu柱zhu可ke置zhi於yuGC氣化室內
，這樣既容易控製溫度
，又減少係統的死體積
，當然，預柱填料需經常更換。

問：我最近更換了另一種牌號的ODS柱
，雖然分離情況仍可以，但保留時間不能重現，為什麼

？

答：這是因為被分析物可能具有形成氫鍵的能力。盡管過去幾年來，填料的製造技術有了極大的提高
，但不同的廠商的ODS填料表麵矽醇基的濃度不同。正是這些矽醇基可能與樣品發生相互作用。因此，同一被分析物中的各組分在不同牌號的ODS柱上的相對保留時間就可能不同。在流動相中加入少量競爭物，如三乙基胺（TEA），將會使矽醇基的成鍵能力飽和，從而能保證不同牌號柱子上的相對保留時間具有較好的重現性。

問：我購買的HPLC柱驗收測試時柱壓過高，請問為什麼？

答：柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方麵，而且常常並不是柱子本身的問題，您可按下麵步驟檢查問題的起因。

1． 拆去保護預柱
，看柱壓是否還高
，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查
；

2． 把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降
，否則是管路堵塞，需清洗
，若壓力下降，再檢查；

3． 將柱子的進出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動相衝洗柱子，（此時不要連接檢測器，以防固體顆粒進入流動池）。這時，如果柱壓仍不下降，再檢查；

4． genghuanzhuzirukoushaiban，ruozhuyaxiajiang
，shuomingninderongjihuoyangpinhanyoukelizazhi，zhengshizhexiezazhijiangshaibandusaiyinqiyalishangsheng。ruozhuyahaigao

，qingyuchangshanglianxi。
一般情況下，在進樣器與保護柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題，SGE提供的Rheodyne
7315型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。

問：高溫毛細柱的使用壽命一般為多長？

答：毛細柱壽命鋤決定於柱子本身的性能外，在很大程度上取決於使用情況，如使用溫度、樣品狀態，進樣量等，如果在其使用溫度範圍內，樣品幹淨，色譜柱不被汙染的情況下，柱子壽命一般在2-3年之間。

問：如毛細管柱被汙染，柱效和分辨率降低，有何方法使它恢複？是否可通過老化來解決？

答：根(gen)據(ju)柱(zhu)汙(wu)染(ran)程(cheng)度(du)可(ke)采(cai)取(qu)不(bu)同(tong)的(de)方(fang)法(fa)來(lai)解(jie)決(jue)
，如(ru)果(guo)汙(wu)染(ran)不(bu)嚴(yan)重(zhong)

，汙(wu)染(ran)物(wu)沸(fei)點(dian)不(bu)是(shi)太(tai)高(gao)，可(ke)通(tong)過(guo)老(lao)化(hua)來(lai)解(jie)決(jue)，但(dan)老(lao)化(hua)溫(wen)度(du)不(bu)可(ke)超(chao)過(guo)柱(zhu)子(zi)的(de)最(zui)高(gao)使(shi)用(yong)溫(wen)度(du)，且(qie)一(yi)般(ban)要(yao)較(jiao)長(chang)時(shi)間(jian)（8-30）小時，如果汙染較嚴重
，或通過老化仍不能使柱性能恢複
，那就必須采用溶劑清洗，通常是用5倍柱容積的溶劑（如正戊烷
，二氯甲烷等）通過色譜柱。當然，清洗熔劑用的越多
，對柱性能的損壞越大，清洗完後
，在通載氣老化一定時間，如果柱性能恢複
，便可繼續使用。
必須指出：隻有交聯柱才能清洗，對於非交聯柱，清洗柱子會徹底失效
，因為固定液被洗掉了，至於清洗用熔劑的選擇，可參考說明書。

問：BPX70毛細柱是否可用於GC/MS分析？

答：完全可以。BPX70為極性柱，使用溫度範圍寬（25-260C）
，程序升溫可達290C，流失低，適合於分析脂肪酸甲酯的的各種位置和幾何異構體
，藥物異構體，碳水化合物等。因BPX70為交聯柱

，故用於GC/MS很穩定，汙染後可清洗再生。