在(zai)人(ren)工(gong)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),使(shi)離(li)體(ti)組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)成(cheng)為(wei)完(wan)整(zheng)植(zhi)株(zhu)的(de)繁(fan)殖(zhi)方(fang)法(fa)。果(guo)樹(shu)的(de)組(zu)織(zhi)培(pei)養(yang)材(cai)料(liao)是(shi)植(zhi)株(zhu)離(li)體(ti)材(cai)料(liao),稱(cheng)外(wai)植(zhi)體(ti)。用(yong)頂(ding)端(duan)分(fen)生(sheng)組(zu)織(zhi)及(ji)其(qi)下(xia)的(de)第(di)1-2個葉原基切離培養的,稱莖尖培養;以小段成熟枝條進行培養的稱莖段培養;以葉片或葉鞘組織進行培養的,稱葉片培養。
利li用yong組zu織zhi培pei養yang方fang法fa繁fan殖zhi果guo樹shu植zhi株zhu具ju有you占zhan地di麵mian積ji小xiao,繁fan殖zhi周zhou期qi短duan,全quan年nian都dou能neng進jin行xing繁fan殖zhi,繁fan殖zhi係xi數shu高gao等deng特te點dian。還hai可ke以yi消xiao除chu果guo樹shu的de某mou些xie病bing毒du病bing,適shi應ying果guo樹shu向xiang品pin種zhong更geng新xin快kuai、矮化密植以及無病毒栽培方向發展的需要。
果樹組織培養繁殖的研究,始於20世紀40年代。中國起步較晚,但發展較快。已在蘋果、葡萄、柑橘、草莓、獼猴桃、菠蘿、枇杷等樹種上開展了組培脫毒和苗木繁殖工作,建立了蘋果、葡萄、草莓、獼猴桃等果樹的組培苗木果園。
培養基是外植體賴以生長和發育的基質。常用的培養基有含鹽種類較少,鹽量較低的White、Nitsch、Knop培養基;也有含鹽種類較多,鹽量較高的B5、B6、H Ls及M等培養基。MS培養基的主要成分包括N、P、K、Ca、Mg等大量元素和Mn、Zn、Cu、Co、B、I、Mo、Fe等微量元素、蔗糖及氨基酸、B族維生素、煙酸、肌醇等有機成分。培養基中加用6-8%的瓊脂做凝固劑。還須加入一些附加成分,如水解酪蛋白、植物激素。常用的植物激素有細胞分裂素,如激動素(KT)、六苄基腺嘌呤(BA)、玉米素(Zi)等;以及生長素,如吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)及2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)等;
常用的接種材料有莖尖、莖段、葉片等,一年四季都可取摘、接種,各季節的材料都能分化、出苗。材料的大小,因培養目的而不同,為脫除繁殖材料的病毒,就原子能0.1-0.2mm的莖尖;對dui一yi般ban繁fan殖zhi材cai料liao,可ke取qu大da莖jing尖jian或huo莖jing段duan培pei養yang,以yi提ti高gao分fen化hua率lv和he分fen化hua速su度du。一yi般ban要yao經jing過guo以yi下xia兩liang個ge滅mie菌jun過guo程cheng,先xian用yong濕shi潤run劑ji處chu理li使shi殺sha菌jun劑ji能neng很hen好hao滲shen入ru培pei養yang材cai料liao,濕shi潤run劑ji有you70-75%酒精等,酒精兼有殺菌能力;再選擇滅菌快而徹底,容易從材料上去除,並對接種材料毒害作用小的藥劑。
接種後的繁殖材料要求置於25-30℃恒溫和1500-3000勒克斯(lx)光照強度,每日光照16小時的條件下培養,苗的分化速度較快,分化苗的生長正常而迅速。
生根培養:采用1/2Ms、1/2B5、White、Knopdenghanyanliangdidepeiyangji。jiangpeiyangjisuoyongdeyanleiheshengchangsupeichengyingyangye,bagoubiaozhundelvmiaojibujinyuyingyangyezhongpeiyangshenggen。shenggenpeiyangdewenduyukuodafanzhiqijianjibenxiangtong。erguangzhaoqiangduyibanyaoqiuzai2000勒克斯(lx)以上。
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