可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗(zhe)糖(tang)，是(shi)植(zhi)物(wu)品(pin)質(zhi)的(de)重(zhong)要(yao)構(gou)成(cheng)性(xing)狀(zhuang)之(zhi)一(yi)
，尤(you)其(qi)是(shi)以(yi)果(guo)實(shi)為(wei)目(mu)的(de)產(chan)品(pin)的(de)果(guo)樹(shu)作(zuo)物(wu)

，可(ke)溶(rong)性(xing)糖(tang)與(yu)酸(suan)的(de)含(han)量(liang)及(ji)其(qi)配(pei)比(bi)是(shi)影(ying)響(xiang)果(guo)實(shi)風(feng)味(wei)品(pin)質(zhi)的(de)重(zhong)要(yao)因(yin)素(su)。對(dui)於(yu)鮮(xian)食(shi)品(pin)種(zhong)，一(yi)般(ban)來(lai)講(jiang)，高(gao)糖(tang)中(zhong)酸(suan)，風(feng)味(wei)濃(nong)，品(pin)質(zhi)優(you)；低糖中酸，風味淡
，品質差。因此

，可溶性糖的定量研究對果樹的品質育種具有重要意義。
一
、試材及用具
1．試材 新鮮或冷凍的植物材料
2．儀器 及試劑 高速組織搗碎機、電熱恒溫水浴鍋
、1000W調溫電爐以及200mL
、250mL容量瓶
、250mL錐形瓶及50mL堿式滴定管等玻璃儀器 ；試劑 主要包括費林試劑 及亞甲基藍溶液等。
二、原理
本實驗的主要原理：在(zai)加(jia)熱(re)條(tiao)件(jian)下(xia)
，用(yong)還(hai)原(yuan)糖(tang)溶(rong)液(ye)滴(di)定(ding)一(yi)定(ding)量(liang)的(de)費(fei)林(lin)試(shi)劑(ji)時(shi)，將(jiang)費(fei)林(lin)試(shi)劑(ji)中(zhong)的(de)二(er)價(jia)銅(tong)還(hai)原(yuan)為(wei)一(yi)價(jia)銅(tong)，以(yi)亞(ya)甲(jia)基(ji)藍(lan)為(wei)指(zhi)示(shi)劑(ji)
，稍(shao)過(guo)量(liang)的(de)還(hai)原(yuan)糖(tang)立(li)即(ji)使(shi)藍(lan)色(se)的(de)氧(yang)化(hua)型(xing)亞(ya)甲(jia)基(ji)藍(lan)還(hai)原(yuan)為(wei)無(wu)色(se)的(de)還(hai)原(yuan)型(xing)亞(ya)甲(jia)基(ji)藍(lan)。通(tong)過(guo)實(shi)驗(yan)
，學(xue)習(xi)並(bing)掌(zhang)握(wo)用(yong)費(fei)林(lin)試(shi)劑(ji)滴(di)定(ding)法(fa)測(ce)定(ding)可(ke)溶(rong)性(xing)糖(tang)的(de)原(yuan)理(li)和(he)方(fang)法(fa)。
三、方法步驟
（一）試劑配製
1．費林試劑甲：稱取硫酸銅（CuSO4 •5H2 O，分析純）34.6g溶於水中
，稀釋至500mL
，過濾，貯於棕色瓶內。
2．費林試劑乙：稱取氫氧化鈉50g和酒石酸鉀鈉（KNaC4 O6 H4 •4H2 O，分析純）138g溶於水中
，稀釋至500mL，用石棉墊漏鬥抽濾。
3．轉化糖標準溶液：稱取9.5g蔗糖（分析純）用水溶解後轉入1000mL容量瓶中
，加入6mol/L HCl（分析純）10mL

，加水至100mL。在20～25℃下放置三天或在25℃保溫24h

，然後用水定容（此為酸化的1%轉化糖液，可保存3～4個月）。測定時，取1%轉化糖液25.00mL放入250mL容量瓶中，加入甲基紅指示劑一滴，用1mol/L NaOH溶液中和後用水定容
，即為1mg/mL轉化糖標準溶液。
4．亞甲基藍溶液：稱取0.5g亞甲基藍（分析純）溶於10mL水中。
5．乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅[Zn(OAC)2 •2H2 O，分析純]溶於水中
，加冰乙酸3mL稀釋至100mL。
6．亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀[K4 Fe(CN)6 •3H2 O，分析純]溶於水，稀釋至100mL。
（二）樣品提取液製備
取待測樣品適量，洗淨，用不鏽鋼刀將可食部分切成適當小塊充分混勻後，按四分法取樣。稱取100g鮮樣加入等重量的水，放入組織搗碎機中搗成1:1勻漿，有些材料勻漿比例可適當調整，多汁果蔬類可直接搗漿。稱取勻漿25.0g或50.0g（相當於樣品12.5g或25.0g）放入150mL燒杯中，含有機酸較多的材料加0.5～2.0g粉狀CaCO3調至中性（廣泛試紙檢試）。用水將樣液全部轉入250mL容量瓶中，並調整體積約為200mL。置80±2℃水浴 保溫30 min
，期間搖動數次，取出加入乙酸鋅溶液及亞鐵氰化鉀溶液各2～5mL，冷卻至室溫後
，用水定容，過濾備用。
取已經製備的待測液100mL於200mL容量瓶中，加6 mol/L HCl 10mL。在80±2℃水浴 加熱10min，放入冷水槽中冷卻後，加甲基紅指示劑二滴用6 mol/L及1mol/L NaOH溶液中和，用水定容。
（三）可溶性總糖測定
1．費林試劑的標定：取費林試劑甲、乙各5.00mL或在測定前先等體積混合後取10.00mL混合液於250mL錐形瓶中
，放入玻璃珠4～5粒
，先加入比預測(預測見2)僅少0.5mL的1mg/mL轉化糖標準液。將此混合液置1000W電爐上加熱，使其在2min左右沸騰，準確煮沸2 min，此時不離開電爐，立即加入0.5%亞甲基藍指示劑2～3滴，並繼續以每4～5 S的滴速滴加標準糖液，直至二價銅離子完全被還原生成磚紅色氧化亞銅沉澱，溶液藍色褪盡為終點。用準確滴定標準糖液的毫升數V1 
，乘以標準糖液濃度[mg/mL]

，即得10mL費林試劑所相當的糖的毫克數。
2．預測：取費林試劑甲、乙各5.00mL或10.00mL混合液於250mL錐形瓶中，由滴定管 加入待測糖液約15mL，在電爐上加熱至沸騰，約沸騰15 S後迅速滴加待測糖液，至呈現極輕微的藍色為止，此時加入0.5%亞甲基藍指示劑2～3滴
，繼續滴加待測糖液，直至溶液藍色褪盡為止，記下待測糖液的用量V2 （毫升數）。
3．準確測定：取費林試劑甲
、乙各5.00mL或10.00mL混合液加入錐形瓶中，由滴定管 加入比預測僅少0.5mL的待測糖液，並補加V1 -V2 毫升水（標準費林試劑所消耗的標準糖液毫升數V1 減去預測消耗的待測糖液毫升數V2 ，即為應補加水的毫升數）
，使其與標定費林試劑時的反應體積一致。以下按費林試劑標定同樣操作，繼續滴至終點。前後沸騰時間須在3 min分鍾左右。待測糖液消耗量應控製在15～50mL範圍內，不能大於標定費林試劑所用標準糖液體積V1 ，否則應增減稱樣量重新製備待測液。同法平行操作3次，取平均值。
（四）結果計算
可溶性總糖（%，以轉化糖計）＝(G/V)×（A/W）×(250/1000)×100
式中： W——樣品稱重（g）
G——10mL費林試劑相當的轉化糖（mg）
V——準確滴定時所用待測液的體積（mL）
A——稀釋倍數
250——定容體積（mL）
1000——由毫克換算為克