一. 原理
液-固色譜法” 是利用各組分在固定相上吸附能力的不同而將它們分離的方法。
dangzufensuizheliudongxiangtongguosepuzhuzhongdexifujishi,zufenfenzijiliudongxiangfenziduixifujibiaomiandehuoxingzhongxinfashengxifujingzheng。zufenfenziduihuoxingzhongxindejingzhengnenglidedaxiaojuedingletamenbaoliuzhidedaxiao。beihuoxingzhongxinxifuyueqiangdezufenfenziyueburongyibeiliudongxiangxituo,k值
就大;反之k值就小。組分之間的k值相差越大,分離越容易。
吸附劑吸附能力的強弱與吸附劑的比表麵積、物理化學性質、組分分子的結構和組成以及流動相的性質等因素有關。
二. 固定相
液-固吸附色譜所使用的固定相,多數是有吸附活性的吸附劑,常用的有表麵多孔型和全多孔微粒型矽膠、氧化鋁、分子篩等。
1. 表麵多孔型:又稱薄殼型,是高效液相色譜使用的第一種填料。表麵多孔填料的機械強度好,易填充均勻、緊密,滲透性好,表麵孔隙淺,傳質快,柱效高,分離速度快。其主要缺點是由於比表麵積小,柱容量低,允許進樣量小。
2. 全多孔微粒型:目前廣泛使用的有球形和無定形兩種,顆粒直徑3~10um,它具有粒度小,比表麵積大(100~600m2/g),孔穴淺,柱效高和柱容量大的優點。
三. 流動相
實現最佳分離與流動相的選擇有關。溶劑的極性是重要的依據。溶劑的極性強弱可用溶劑強度參數 e0 來衡量。 e0 越大,表示洗脫劑的極性越強。
xifusepuliudongxiangdexuanzeyuanzeshijixingdadeshiyangxuyongjixingqiangdexituoji,jixingruodeshiyangyiyongjixingjiaoruodexituoji。shijigongzuozhongchangyongliangzhonghuoliangzhongyishangrongjianbutongbilihunhezuoxituoji,yitigongheshiderongjiqiangduhe k 值,提高分離的選擇性。在分離複雜試樣時,可進行梯度洗脫,能提高分離效率,改善峰形,加快分析速度。(高效液相色譜法中,流動相選擇雖然有一般的指導原則,但主要靠實踐經驗。)
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