一. 定性分析

    選擇合適的溶劑（非極性），使(shi)用(yong)有(you)足(zu)夠(gou)純(chun)度(du)單(dan)色(se)光(guang)的(de)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)，在(zai)相(xiang)同(tong)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)測(ce)定(ding)相(xiang)近(jin)濃(nong)度(du)的(de)待(dai)測(ce)試(shi)樣(yang)和(he)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)溶(rong)液(ye)的(de)吸(xi)收(shou)光(guang)譜(pu)，然(ran)後(hou)比(bi)較(jiao)二(er)者(zhe)吸(xi)收(shou)光(guang)譜(pu)特(te)征(zheng)：吸收峰數目及位置、吸收穀及肩峰所在的位置（ l ）等；分子結構相同的化合物應有完全相同的吸收光譜。

二. 定量分析

（一）單組分定量分析方法

1. 標準曲線法：配製一係列（5~10）個不同c的標準溶液 ，在適當l ―― 通常為 l_max下，以適當的空白溶液作參比，分別測定A，然後作 A-c 曲線同條件下測定試樣溶液吸光度 A_x ，查找對應的 c_x 。

2. 直接比較法：已知試樣溶液基本組成，配製相同基體、相近濃度的標準溶液，分別測定吸光度A_標、A_樣

   根據 L-A 定律： A_標 = K ・ b ・ c_標            A_樣 = K ・ b ・ c_樣

   則                                              (18)

（二）多組分定量分析

    混合組分的吸收光譜相互重疊的情況不同，測定方法也不相同，常見混合組分吸收光譜相幹擾情況有以下三種：

圖5  混合組分吸收光譜的三種相幹情況示意圖

1.第一種情況：各種吸光物質吸收曲線不相互重疊或很少重疊，則可分別在l₁ 及 l₂ 處測定 a  及 b 組分的 c
；

2. 第二種情況  部分重疊：先在 l₁ 處測得 c_a  ,再在 l₂ 處測得混合組分的吸光度 A_a+b ，根據吸收定律加和性：

即可求得c_b。[應先求得 e_{a(l2 )} ，與 e_{a(l2 )} ，並使用相同 b ]

3. 第三種情況:兩吸收曲線互相重疊，但服從 L-B 定律

(1) 解方程組法：

若試樣中需要測定兩種組分，則選定兩個波長l₁ 及 l₂ ，測得試液的吸光度為 A₁和 A₂，則可解方程組求得組分a、b 的濃度c_a、c_b ：

    如果混合物含有 n 個組分，可不經分離，在 n 個適當波長處進行 n 次測量
，獲得 n個吸光度值，然後解 n 個聯立方程以求得各組分的濃度。

（2）等吸光度雙波長（消去）法

吸收光譜重疊的 d、e 兩組分共存，現設法把一種組分(a)的吸光度消去。方法如下：

圖6  二組分混合物吸收光譜用作圖法選擇l₁
、l₂（雙波長分光光度法）

   選取兩個適當的波長l₁ 和 l₂ ，

使 e₁^d= e₂^d 
，而盡可能大，則用這兩個波長l₁ 和 l₂測得混合物溶液吸光度之差 ∆A 應隻與 c_e 成正比（而與c_d無關）
，直接測得c_e ：

   因為             所以    

   若用 1cm 吸收池

    若需測定另一組分 d 時
，也可用同樣方法，選擇另一個l₁’ 和 l₂’ ，先消去的 e 的幹擾，直接求c_d