紫外可見分光光度分析的定量依據是光吸收定律，但具體操作方法卻有多種

4.2.1 標準曲線法
即工作曲線法，適用於大量重複的樣品分析，是工廠控製分析中應用最多的方法。
根據光吸收定律，對於一種有色化合物，ε是一個定值
，若把光程L也固定，那麼吸光度A就和溶液的濃度c成正比，也就是說吸光度A和濃度c呈線性關係。
配製一係列適當濃度的標準溶液，顯色後分別測定其吸光度
，把吸光度A對濃度c作圖，即得工作曲線。

4.2.2 直接比較法

直接比較法其實質也是工作曲線法，是一種簡化的工作曲線法。
配一個已知被測組分濃度為cs的標樣

，測其吸光度為As
，在同樣條件下再測未知樣品的吸光度為Ax，通過計算可求出未知樣品的濃度cx。
As=εcsL
Ax=εcxL
由於溶液性質相同
，比色皿厚度一樣，所以As/Ax=cs/cx
式中：
cs-已知被測組分的濃度，mol/L；
cx-未知樣品的濃度，mol/L；
As-已知被測組分的吸光度
；
Ax-未知樣品的吸光度。
直接比較法簡化了繪製工作曲線的步驟
，適用於個別樣品的測定。
操作時應注意配製標樣的濃度要接近被測樣品的濃度，這樣能減少測量誤差。

4.2.3 標準加入法

標準加入法是工作曲線的一種特殊應用。
選擇適當的顯色條件
，先測定濃度為cx的未知樣品吸光度為Ax，再向未知樣品中加入一定量的標樣
，配置成濃度為cx+Δc1

、cx+Δc2……一係列樣品
，分別顯色後再測定吸光度為A1、A2……最後在坐標紙上繪圖，以吸光度A為縱坐標，以濃度c為橫坐標
，分別畫出Δc1、Δc2所對應的A1、A2等各點，連成直線後延長，與橫軸的交點cx也就是未知樣品的濃度cs。
應用標準加入法時要注意，加入的標樣濃度要適當，使畫出的曲線保持適當角度，濃度過大或過小都會帶來測量誤差。
這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)操(cao)作(zuo)比(bi)較(jiao)麻(ma)煩(fan)，不(bu)適(shi)於(yu)作(zuo)係(xi)列(lie)樣(yang)品(pin)分(fen)析(xi)，但(dan)它(ta)適(shi)用(yong)於(yu)組(zu)成(cheng)比(bi)較(jiao)複(fu)雜(za)
，幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su)較(jiao)多(duo)而(er)又(you)不(bu)太(tai)清(qing)楚(chu)的(de)樣(yang)品(pin)，因(yin)為(wei)它(ta)能(neng)消(xiao)除(chu)背(bei)景(jing)的(de)影(ying)響(xiang)。