首先我們應該了解我們的無菌室應該處於什麼狀態,有什麼要求。一般情況下,我們的無菌室達到空間潔淨度10000級就可以了,但操作區域例如超淨工作台、生物安全櫃裏需要達到潔淨度100級,也就是我們常說的“整體萬級,局部百級”。萬級潔淨度對空間落菌的要求是:靜態檢測,自然沉降菌≤3CFU/皿,百級潔淨度對空間落菌的要求是:靜態檢測,自然沉降菌≤1CFU/皿。也就是說平時我們做的空間驗證,隻要不超過這個標準,就是符合要求的,因此也不必太過擔憂。
那麼,怎樣能夠保證我們的無菌室符合要求?當我們的無菌室出現異常應該如何處理?
我們得先從無菌室的滅菌方式開始講。一般無菌室的滅菌方式分為:紫外線照射、臭氧滅菌、化學熏蒸這幾種。這(zhe)幾(ji)種(zhong)滅(mie)菌(jun)方(fang)式(shi)各(ge)自(zi)有(you)各(ge)自(zi)的(de)特(te)點(dian),大(da)家(jia)可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)的(de)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)來(lai)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)式(shi),遇(yu)到(dao)異(yi)常(chang)難(nan)以(yi)解(jie)決(jue)時(shi),也(ye)可(ke)以(yi)考(kao)慮(lv)增(zeng)加(jia)一(yi)種(zhong)滅(mie)菌(jun)方(fang)式(shi)來(lai)解(jie)決(jue)。
紫外線照射:紫外線滅菌是利用適當波長的紫外線破壞微生物機體細胞中的DNA或RNA結(jie)構(gou),造(zao)成(cheng)生(sheng)長(chang)性(xing)細(xi)胞(bao)死(si)亡(wang)來(lai)達(da)到(dao)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo),屬(shu)於(yu)一(yi)種(zhong)物(wu)理(li)方(fang)式(shi)的(de)滅(mie)菌(jun),也(ye)是(shi)我(wo)們(men)微(wei)生(sheng)物(wu)檢(jian)測(ce)無(wu)菌(jun)室(shi)最(zui)常(chang)用(yong)的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)式(shi)。該(gai)方(fang)法(fa)操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan),使(shi)用(yong)方(fang)便(bian),也(ye)比(bi)較(jiao)經(jing)濟(ji),可(ke)以(yi)殺(sha)滅(mie)各種微生物,包括細菌、病毒、真菌、立克次體以及支原體等,因此在實驗室裏,是最常見的滅菌方式。
但dan紫zi外wai線xian滅mie菌jun也ye有you一yi定ding的de缺que點dian,紫zi外wai線xian隻zhi能neng對dui直zhi接jie照zhao射she到dao的de微wei生sheng物wu起qi到dao殺sha滅mie作zuo用yong,因yin此ci隻zhi能neng對dui空kong間jian中zhong照zhao射she到dao的de地di方fang起qi作zuo用yong,一yi些xie照zhao射she不bu到dao的de死si角jiao或huo者zhe物wu品pin的de內nei部bu是shi無wu法fa達da到dao效xiao果guo的de,因yin此ci使shi用yong紫zi外wai線xian滅mie菌jun的de無wu菌jun室shi,也ye會hui輔fu助zhu以yi一yi些xie化hua學xue試shi劑ji,例li如ru潔爾滅、酒精等消毒劑對死角進行清理。使用紫外線滅菌,應當定期檢測紫外線的強度,若是無法達到要求的強度,就應該考慮更換紫外燈。根據2002年國家衛生部發布的《消毒技術規範》,紫外燈的要求是紫外線強度不得低於70μW/cm2(紫外燈1m處),而空間內的紫外燈的布局也是有要求的,要求平均每m3不少於 1.5W。也就是說,假如你無菌室是5m2,實驗室高度是3米,那麼你的空間體積就是15m3,你空間中使用的紫外燈的功率就不得低於22.5w。按照這個方式就可以算一下你的無菌室需要多少紫外燈了。當紫外線的強度達不到要求時,就需要更換紫外燈了。
臭氧滅菌:臭氧是一種強氧化劑,滅菌過程屬生物化學氧化反應。
O3滅菌原理一般有以下三種:
1.臭氧通過氧化分解細菌內部葡萄糖所需的酶,使細菌滅活死亡。
2.直接與細菌、病毒作用,破壞它們的細胞器和DNA、RNA,使細菌的新陳代謝受到破壞,導致細菌死亡。
3.透過細胞膜組織,侵入細胞內,作用於膜內的脂蛋白和內部的脂多糖,改變細胞的通透性,導致細胞溶解死亡。
使用臭氧滅菌,殺菌徹底,無殘留,殺菌廣譜,可殺滅細菌繁殖體和芽孢、病毒、真菌等,並可破壞肉毒杆菌毒素。另外,O3對黴菌也有極強的殺滅作用。O3為(wei)氣(qi)體(ti),能(neng)迅(xun)速(su)彌(mi)漫(man)到(dao)整(zheng)個(ge)滅(mie)菌(jun)空(kong)間(jian),滅(mie)菌(jun)無(wu)死(si)角(jiao)。所(suo)以(yi),臭(chou)氧(yang)滅(mie)菌(jun)也(ye)是(shi)目(mu)前(qian)被(bei)廣(guang)泛(fan)使(shi)用(yong)的(de)滅(mie)菌(jun)方(fang)式(shi)。用(yong)臭(chou)氧(yang)消(xiao)毒(du)空(kong)氣(qi),必(bi)須(xu)是(shi)在(zai)封(feng)閉(bi)空(kong)間(jian),且(qie)室(shi)內(nei)無(wu)人(ren)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing),消(xiao)毒(du)後(hou)至(zhi)少(shao)過(guo) 30min 才cai能neng進jin入ru。另ling外wai臭chou氧yang的de密mi度du比bi空kong氣qi大da,在zai空kong氣qi中zhong會hui迅xun速su下xia降jiang到dao空kong間jian的de底di層ceng,因yin此ci臭chou氧yang發fa生sheng器qi也ye應ying當dang安an裝zhuang在zai無wu菌jun室shi的de頂ding部bu。一yi般ban滅mie菌jun時shi間jian選xuan擇ze30min即可,要求空間中臭氧濃度不低於20mg/m3。
化學熏蒸:化學熏蒸是一種十分傳統的空間滅菌方式,一般是采用易揮發氣化的化學物質的蒸汽對空間微生物進行殺滅的目的,一般常用甲醛、戊二醛、過氧化氫、過氧乙酸等。
這裏以常用的甲醛熏蒸為例。一般甲醛熏蒸又稱甲醛高錳酸鉀熏蒸,將40%的de甲jia醛quan溶rong液ye加jia入ru到dao高gao錳meng酸suan鉀jia溶rong液ye中zhong,二er者zhe發fa生sheng反fan應ying,放fang出chu大da量liang的de熱re使shi甲jia醛quan蒸zheng發fa到dao空kong間jian中zhong,從cong而er對dui無wu菌jun室shi進jin行xing滅mie菌jun。一yi般ban甲jia醛quan熏xun蒸zheng的de滅mie菌jun效xiao果guo比bi較jiao理li想xiang,對dui黴mei菌jun等deng較jiao難nan清qing除chu的de汙wu染ran菌jun也ye有you較jiao好hao的de殺sha滅mie效xiao果guo,因yin此ci在zai無wu菌jun室shi被bei黴mei菌jun汙wu染ran時shi,通tong常chang都dou是shi使shi用yong甲jia醛quan進jin行xing熏xun蒸zheng來lai徹che底di消xiao滅mie汙wu染ran源yuan。
danshijiaquanxunzhengdequedianyeshihenmingxiande,yinweijiaquanshiyizhongqiangzhiaixingdehuaxuepin,duirentideshanghaijiaoda,zaishiyongguochengzhongxuyaotebiezhuyi,bingqiecanliuliangyeyaojinxingyangedekongzhi。meicixunzhenghou,zhishaoxuyaotongfeng24h才可以使用。
目前對熏蒸後甲醛的殘留量並沒有明確要求,還是要通過經驗來判斷,目前國家對居民住房要求甲醛含量不大於0.1mg/m3,suoyiwomenyekeshiyongjiaquanhanliangcedingyilaiduixunzhenghoudekongjianjinxingjiance。muqianjiaquanxunzhengmiejundefangfashipinjiancewujunshidemiejunzhongyijingjiaoshaoshiyong,zhuyaoyeshiyinweicaozuobijiaofansuo,miejunshijianjiaochang,jinxingyicijiaquanxunzhengzhihou,huiyoujitianwufashiyongwujunshijinxingjiance,suoyizhiyouzaiqitamiejunfangfawufadadaolixiangdemiejunxiaoguoshi,caihuikaolvjinxingjiaquanxunzheng。
而er其qi實shi這zhe種zhong滅mie菌jun方fang式shi目mu前qian在zai很hen多duo藥yao企qi的de無wu菌jun室shi滅mie菌jun,還hai是shi會hui經jing常chang用yong到dao的de,另ling外wai,有you些xie生sheng產chan區qu域yu如ru果guo長chang期qi被bei黴mei菌jun汙wu染ran,也ye會hui考kao慮lv用yong甲jia醛quan熏xun蒸zheng的de方fang法fa來lai解jie決jue。
了le解jie了le這zhe幾ji種zhong常chang用yong的de無wu菌jun室shi滅mie菌jun方fang式shi,在zai我wo們men日ri常chang的de工gong作zuo中zhong也ye可ke以yi根gen據ju自zi己ji實shi驗yan室shi情qing況kuang進jin行xing選xuan擇ze,尤you其qi是shi長chang期qi使shi用yong一yi種zhong滅mie菌jun方fang式shi若ruo是shi滅mie菌jun效xiao果guo達da不bu到dao理li想xiang的de效xiao果guo時shi,可ke以yi根gen據ju實shi際ji情qing況kuang更geng換huan滅mie菌jun方fang式shi,或huo者zhe引yin進jin一yi種zhong新xin的de滅mie菌jun方fang式shi兩liang者zhe結jie合he,以yi期qi達da到dao預yu想xiang的de效xiao果guo。
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