好了,廢話說到這,進入正題:
首先,TTC有毒,不僅毒細菌也毒人,所以使用的時候要小心(其實用別的化學試劑也要小心,不好意思,又說廢話了)。接著我個人是配置的0.5%的TTC溶液,你們可以根據個人的需要配置不同濃度。
配置方法:實驗室用水(我們用的桶裝純淨水)200mL,TTC粉末1.00 g,水不用滅菌,我個人是稍微加熱(大概40℃水溫這樣就完全溶解了),也可以攪拌至完全溶解,然後倒入棕色瓶子,放無菌室靜置大概72小時(我個人是放置72小時,不確定24小時或者48小時行不行),此時配置出來的溶液加入空白培養基是養不成菌落的(我覺得這也說明了這東西有毒)。沒必要先把水滅菌,也沒必要加入PDA培養基裏一起121℃滅菌。
使用劑量:我一般是500mL PDA培養基 配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶(rong)液(ye),在(zai)無(wu)菌(jun)室(shi)裏(li)操(cao)作(zuo),在(zai)倒(dao)平(ping)板(ban)之(zhi)前(qian)加(jia),搖(yao)晃(huang)均(jun)勻(yun)就(jiu)可(ke)以(yi),本(ben)人(ren)親(qin)測(ce),對(dui)解(jie)決(jue)菌(jun)落(luo)蔓(man)延(yan)問(wen)題(ti)非(fei)常(chang)有(you)效(xiao),而(er)且(qie)也(ye)不(bu)會(hui)有(you)明(ming)顯(xian)的(de)抑(yi)製(zhi)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)導(dao)致(zhi)實(shi)驗(yan)不(bu)準(zhun)確(que)的(de)情(qing)況(kuang)。
溫馨提醒:放置條件:避光低溫保存(我是室溫保存的,化驗室經常開空調,大概在20-25℃左右,(下班了就25-30℃左右),目前放置了一個多月,沒有出現粉紅色。我查找資料的時候,說是溶液呈粉紅色就要從新配置了。
目的 : 為便於區別樣品顆粒與菌落,可在每 100mL 瓊脂培養基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液,如有細菌存在,培養後菌落呈紅色。
配製 : TTC 0.5g,蒸餾水 100mL,溶解。定性濾紙過濾,濾液置於棕色瓶中,4°C冰箱冷藏 。
滅菌 : 配好的0.5% TTC, 過濾除菌後置於棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按預計使用量分裝入小管,115℃高壓滅菌 20min 、121度高溫滅菌15min,過後4°C冰箱冷藏。
使用 : 臨澆平板前,再按前述比例將TTC與培養基混合搖勻。
隻是分享經驗,數據結論僅代表我自己親身試驗得出的較合理結論,不具備權威性哦!
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