一般菌種臨時存放及活化

無菌培養
平板劃線分離法


一般操作過程
1、在無菌操作下,用無菌微量吸管,從已溶解的管中吸取50μL(或1-2滴)的菌液,滴入固態指定培養基(培養基編號及溫度示於菌株訂購單)某一邊緣附近,以劃線法接種於培養基。
2、將接種好的培養基置於指定溫度的培養箱中培養。
3、在無菌環境下,以沾有75%酒jiu精jing的de棉mian花hua擦ca拭shi外wai管guan,在zai火huo焰yan上shang加jia熱re外wai管guan之zhi尖jian端duan。滴di數shu滴di無wu菌jun水shui於yu加jia熱re處chu,使shi外wai管guan破po裂lie,再zai以yi硬ying棒bang敲qiao破po尖jian端duan。取qu出chu隔ge熱re纖xian維wei紙zhi和he內nei管guan,以yi滅mie菌jun過guo的de鑷nie子zi取qu出chu內nei管guan之zhi棉mian塞sai。
4、(a)適用於細菌用無菌吸管,吸取0.3-0.5mL指定之液體培養基,滴入內管內,並輕微震蕩(可用該吸管協助),直到均勻懸浮。
(b)適用於黴菌、酵母菌用無菌吸管,吸取0.3-0.5mL無菌水,滴入內管內,待幹燥粉末溶解後,以無菌吸管吸取並滴入約含有5ml無菌水之試管內,輕微震蕩使其均勻後,靜置30至60分鍾。
5、取0.1-0.2mL之菌體懸浮液於指定的平板培養基上,做劃線分離培養或做成一係列之稀釋,用無菌L型玻棒均勻塗抹,以檢驗菌種之純度及活化情形,而剩餘的菌體則全部移入指定的液體培養基內,並依指定的溫度培養之。
6、某些菌種經過冷凍幹燥保存後,遲滯期(lagperiod)較長,必須等培養二倍時間後才能長出,且再經過一、二次繼代培養(Subculture)後才能正常生長。經過以上的努力後仍培養失敗,才視為不能活化。
7、未開封之冷凍幹燥管,請冷藏於4℃冰箱,切勿冷凍保存。
手機版










