用yong懸xuan滴di法fa，通tong過guo鏡jing檢jian觀guan察cha細xi菌jun細xi胞bao是shi否fou具ju有you運yun動dong性xing，可ke以yi通tong過guo普pu通tong顯xian微wei鏡jing或huo相xiang差cha顯xian微wei鏡jing檢jian查zha。用yong普pu通tong顯xian微wei鏡jing時shi光guang線xian不bu宜yi太tai強qiang，要yao適shi當dang減jian弱ruo。具ju體ti操cao作zuo步bu驟zhou方fang法fa如ru下xia。

待測菌株先在肉湯中培養18h~24h,也可以從生長了18h-24 h的營養瓊脂斜麵上挑取少量菌落用1滴肉湯或生理鹽水乳化，注意菌株的濃度不要太大。通過以下方法可以將1滴菌懸液懸浮在凹槽載玻片的蓋玻片上。

1.具體操作步驟

(1)取一潔淨的蓋玻片，在蓋玻片四周點上凡士林(見圖5-16)。

(2)用接種環挑取一小環菌株置於操作好的幹淨蓋玻片上，不要讓液滴散開(見圖5-17)。

(3)將凹槽載玻片蓋在蓋玻片上
，保持菌滴在槽中間
，緩慢用力壓下載玻片，借助凡士林的黏性使載玻片和蓋玻片結合在一起(見圖5-18),快速平穩地將玻片反轉過來，菌滴應處於懸滴狀態(見圖5-19)。盡快觀察。

(4)觀察懸滴玻片時，將鏡下聚光鏡從其正常λ置略微下調，並使光圈幾乎處於全關閉狀態。這是因為δ染色的菌體在太亮的環境下難於被觀察到，而且，光造成的熱效應會使菌體喪失運動性。

(5)首(shou)先(xian)用(yong)低(di)倍(bei)物(wu)鏡(jing)聚(ju)焦(jiao)懸(xuan)液(ye)的(de)邊(bian)緣(yuan)
，移(yi)動(dong)載(zai)玻(bo)片(pian)，讓(rang)懸(xuan)液(ye)在(zai)視(shi)野(ye)的(de)中(zhong)央(yang)。通(tong)過(guo)觀(guan)察(cha)液(ye)滴(di)邊(bian)緣(yuan)線(xian)外(wai)出(chu)現(xian)的(de)小(xiao)冷(leng)凝(ning)水(shui)滴(di)能(neng)夠(gou)很(hen)容(rong)易(yi)識(shi)別(bie)出(chu)懸(xuan)滴(di)的(de)λ置。換成高倍物鏡(40倍)對(dui)液(ye)滴(di)邊(bian)緣(yuan)重(zhong)新(xin)聚(ju)焦(jiao)。必(bi)要(yao)時(shi)，略(lve)微(wei)打(da)開(kai)光(guang)圈(quan)。這(zhe)時(shi)細(xi)菌(jun)應(ying)很(hen)容(rong)易(yi)觀(guan)察(cha)到(dao)，尤(you)其(qi)在(zai)液(ye)滴(di)的(de)邊(bian)緣(yuan)，深(shen)度(du)較(jiao)淺(qian)
，細(xi)菌(jun)停(ting)留(liu)在(zai)有(you)限(xian)的(de)空(kong)間(jian)領(ling)域(yu)。用(yong)油(you)鏡(jing)觀(guan)察(cha)玻(bo)片(pian)時(shi)，因(yin)為(wei)聚(ju)焦(jiao)時(shi)鏡(jing)頭(tou)的(de)移(yi)動(dong)可(ke)能(neng)造(zao)成(cheng)蓋(gai)玻(bo)片(pian)移(yi)動(dong)，從(cong)而(er)造(zao)成(cheng)液(ye)滴(di)流(liu)動(dong)。這(zhe)會(hui)嚴(yan)重(zhong)影(ying)響(xiang)觀(guan)察(cha)效(xiao)果(guo)，û有經驗的人員甚至還會誤認為是菌體在運動。

注意：必須正確區分布朗運動(一種液體中懸浮的微小粒子的連續運動
，是由於液體周Χ的分子不對稱的撞擊造成的)
、玻片輕微傾斜造成的一個方向上的漂移和真正的菌體運動。

有you時shi可ke以yi根gen據ju運yun動dong方fang式shi的de不bu同tong來lai鑒jian定ding菌jun種zhong
，如ru李li斯si特te氏shi菌jun是shi翻fan跟gen頭tou式shi的de運yun動dong，噬shi胞bao菌jun為wei滑hua行xing運yun動dong。要yao想xiang通tong過guo運yun動dong方fang式shi來lai鑒jian定ding菌jun種zhong

，就jiu必bi須xu熟shu悉xi不bu同tong菌jun種zhong的de運yun動dong方fang式shi，觀guan察cha比bi較jiao已yi知zhi菌jun株zhu的de運yun動dong情qing況kuang可ke以yi不bu斷duan積ji累lei經jing驗yan。

2.注意事項

檢驗時應注意以下幾點：

(1)細菌細胞間有明顯λ移者，才能判定為運動性。由於細菌細胞太小
，在懸液中有布朗運動
，即ÿ個細胞均在原地顫動，彼此的λ置關係卻û改gai變bian，切qie不bu可ke將jiang這zhe種zhong現xian象xiang誤wu判pan為wei具ju運yun動dong性xing。由you於yu載zai玻bo片pian與yu蓋gai玻bo片pian之zhi間jian懸xuan液ye過guo多duo，在zai使shi用yong油you浸jin物wu鏡jing調tiao焦jiao時shi
，懸xuan液ye在zai蓋gai玻bo片pian下xia流liu動dong。這zhe時shi可ke看kan到dao大da批pi細xi菌jun細xi胞bao都dou以yi同tong一yi速su度du向xiang同tong一yi方fang向xiang運yun動dong，這zhe也ye不bu是shi真zhen正zheng的de運yun動dong性xing。真zhen正zheng的de運yun動dong性xing應ying是shi細xi菌jun細xi胞bao彼bi此ci的deλ置關係明顯的改變。細菌的運動性因種或菌株而異。有的運動迅速，有的運動緩慢。能運動的菌株也不一定ÿ個細胞都同時運動，常常是大多數細胞不運動
，少數細胞明顯運動。

(2)有些細胞不以鞭ë運動，而是滑動。鏡檢時應注意與遊動區分開。一般遊動速度高，滑動則遲緩。遊動隻能在懸液中運動
，滑動則須附在固體表麵進行。

(3)rushiwentaidi
，yizhizaiwutaiwendutaidi。youdexijunhuiyinwendutaidierbunengyundong
，yinggaishefatigaozaiwutaihuozaibopiandewendu，dadaoshiyanjunnengyundongdewendu(如在室溫較高的試驗室鏡檢，或將載玻片放置保溫箱中一會兒再觀察)。

(4)鏡jing檢jian好hao氧yang菌jun時shi
，則ze可ke能neng因yin蓋gai玻bo片pian下xia供gong氧yang不bu足zu而er使shi試shi驗yan菌jun不bu能neng表biao現xian出chu運yun動dong性xing
，遇yu到dao這zhe種zhong情qing況kuang則ze應ying使shi蓋gai玻bo片pian下xia殘can留liu一yi兩liang個ge小xiao氣qi泡pao，鏡jing檢jian氣qi泡pao四si周zhou或huo蓋gai玻bo片pian邊bian緣yuan的de細xi菌jun運yun動dong性xing。

(5)用油鏡觀察時，蓋玻片的厚度以不超過0.17mm為宜。用過厚的蓋玻片，調焦有困難。用相差油鏡觀察時載玻片的厚度以約為1.2mm為宜。

根據有鞭ëdexijunkeyizaibangutipeiyangjizhongyoudongqueyoubunengrenyiyouzoudexianxiang，guanchaxijunshengchangqingkuang，pandingshiyanjunshifouyouyundongxing，keshiyongshiyanjunnenglianghaoshengchangdepeiyangji，zaiqizhongjiaru0.3%~0.6%的瓊脂(所用瓊脂的量可因品牌不同而異),一yi般ban半ban固gu體ti培pei養yang基ji應ying是shi放fang倒dao試shi管guan不bu流liu動dong，而er在zai手shou上shang輕qing輕qing敲qiao打da時shi瓊qiong脂zhi即ji破po裂lie為wei宜yi。對dui一yi般ban常chang見jian細xi菌jun可ke結jie合he葡pu萄tao糖tang氧yang化hua發fa酵jiao試shi驗yan觀guan察cha運yun動dong性xing。

用直針穿刺接種試驗菌於半固體培養基內(見圖5-20),適溫培養。細菌的運動性可用透射光目測。如生長物隻生長在穿刺線上，邊緣十分清晰，則表示試驗菌無運動性；如生長物由穿刺線向四周呈雲霧狀擴散，其邊緣呈雲霧狀
，則表明試驗菌株有運動性。對生長快的細菌培養1d後觀察。如第一天不能判定可在第2d-3d再觀察。如2d-3d時仍不能判定是否有運動性
，可延遲5d-6d再觀察一次。因為遊動力弱的細菌
，在半固體培養基中第1d-2d中zhong尚shang不bu能neng從cong穿chuan刺ci線xian遊you開kai
，故gu需xu多duo培pei養yang幾ji天tian再zai觀guan察cha。如ru試shi驗yan菌jun在zai半ban固gu體ti培pei養yang基ji中zhong產chan氣qi泡pao會hui影ying響xiang穿chuan刺ci線xian上shang的de生sheng長chang物wu的de擴kuo散san情qing況kuang，不bu可ke誤wu將jiang不bu運yun動dong的de細xi菌jun判pan為wei有you運yun動dong性xing。如ru試shi驗yan菌jun是shi好hao氧yang細xi菌jun，穿chuan刺ci線xian上shang生sheng長chang物wu很hen少shao
，可ke檢jian查zha從cong培pei養yang基ji表biao麵mian向xiang下xia滲shen入ru的de生sheng長chang物wu的de情qing況kuang。