一、染色注意事項
1.染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配製方法,不同的染色液染色後的處理是不一樣的。
2.染色過程中所用的時間要根據染色時的室內溫度、染液的新鮮程度及實驗室的實際情況等靈活掌握。在室溫高、切片、染色液又是新配製的,染色時間就要短,反之時間就長。
3.伊紅有水溶的和醇溶的,如果用的是水溶的,應該在脫水前進行染色,如果是醇溶的,應使用與溶解伊紅等濃度的酒精開始脫水。
4.在二甲苯脫蠟之前可以先在60℃烤箱內0.5~1小時,這樣可以使切片粘附更牢固不易脫片,也有利於脫蠟。
5.二甲苯在HE染色中有脫蠟、透(tou)明(ming)的(de)作(zuo)用(yong)。二(er)甲(jia)苯(ben)脫(tuo)蠟(la)的(de)好(hao)壞(huai)主(zhu)要(yao)取(qu)決(jue)於(yu)切(qie)片(pian)在(zai)二(er)甲(jia)苯(ben)內(nei)放(fang)置(zhi)的(de)時(shi)間(jian)和(he)脫(tuo)蠟(la)時(shi)的(de)溫(wen)度(du)以(yi)及(ji)二(er)甲(jia)苯(ben)的(de)使(shi)用(yong)次(ci)數(shu)。染(ran)好(hao)的(de)切(qie)片(pian)必(bi)須(xu)經(jing)過(guo)透(tou)明(ming),有(you)利(li)於(yu)顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀(guan)察(cha),同(tong)時(shi)並(bing)為(wei)封(feng)片(pian)起(qi)到(dao)了(le)橋(qiao)梁(liang)作(zuo)用(yong)。
6.用梯度酒精脫水時,在低濃度酒精中時間不宜過長,到高濃度時逐步延長脫水時間。以免脫水不徹底,影響二甲苯透明的效果。
7.在(zai)酸(suan)性(xing)分(fen)化(hua)液(ye)內(nei)停(ting)留(liu)的(de)時(shi)間(jian)不(bu)要(yao)過(guo)長(chang),分(fen)化(hua)不(bu)可(ke)過(guo)度(du),避(bi)免(mian)使(shi)細(xi)胞(bao)核(he)內(nei)該(gai)染(ran)上(shang)色(se)的(de)結(jie)構(gou)脫(tuo)色(se)。不(bu)需(xu)分(fen)化(hua)處(chu)理(li)的(de)蘇(su)木(mu)精(jing)染(ran)色(se)時(shi)要(yao)注(zhu)意(yi)掌(zhang)握(wo)染(ran)色(se)時(shi)間(jian),以(yi)防(fang)止(zhi)組(zu)織(zhi)切(qie)片(pian)染(ran)色(se)背(bei)景(jing)過(guo)深(shen)或(huo)細(xi)胞(bao)核(he)、胞質染色不足。
二、取材注意事項
1)取材動作要迅速,不宜作太久的拖延以免組織細胞的成分、結構等發生變化。
2)切片材料應根據需要觀察的部位進行選擇,盡可能不要損傷所需要的部分。
三、固定注意事項
(1)一般固定液,都以新配為好,配好後應貯存在陰涼處,不宜放在日光下,以免引起化學變化,失去固定作用。
(2)有些混合固定液的成份之間會發生氧化還原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定時就沒有作用了。
(3)固定材料時,固定液必須充足,一般為材料塊的20~30倍,有些水分多的材料,中間應更換1-2次新液。
(4)cailiaogudingwanbihou,baocunyuyanmijinsaihuojiagaiderongqili,tongshizairongqiwaishangbiaoqian,bingsuitongcailiaozairongyezhongtouruxiangyingdebiaoqian,yimianxianghuhunxiao。biaoqianshangzhuminggudingye、材料來源、日期等。標簽上的文字,應用黑色鉛筆或繪圖黑墨水書寫。
四、 脫水注意事項
(1)脫水必須在有蓋的玻璃品中進行,防止吸收空氣中的水分和酒精揮發。
(2)zaigenghuangaoyijidetuoshuijishi,zuihaobuyaoyidongcailiaoyimiansunhuai,keyongxiguanxichuqiminzhongdetuoshuiji,zaiyongxishuiqixijinminneishengyuye,ranhouyuminzhongjiarugaoyijituoshuiji。
(3)在低濃度酒精中,每級停留不宜太長,否則易使組織變軟,助長材料的解體。
(4)在高濃度或純酒精中,每級停留的時間也不宜太長,否則會使組織變脆,影響切片。
(5)如需過夜,應停留在75%酒精中。
(6)脫水必須徹底,否則不易透明,甚至使透明劑內出現白色混濁現象。
五、透明注意事項
(1)使用透明劑時,要隨時蓋緊蓋子,以免空氣中的水分進入和透明劑的揮發。
(2)更換每級透明劑,動作要迅速,一方麵為了不使材料塊幹涸,另一方麵能避免吸收濕氣。
(3)在透明過程中,如果材料周圍出現白色霧狀,說明材料中的水未被脫淨,應退回純酒精中重新脫水,然後再透明。
六、透蠟注意事項
(1)盡量保持在較低溫度中進行,以石蠟不凝固為度。
(2)透蠟溫度要恒定,不可忽高忽低。
(3)操作要迅速,力求在最短的時間內完成石蠟透入過程,以免引起組織變硬、變脆、收縮等。
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