細菌的接種方法有很多種,如劃線法、塗布法、傾注法、斜麵接種法、液體培養基接種法、螺旋接種法等,其方法和應用各有不同,下麵就這幾種方法進行解釋以幫助實驗人員選擇操作。
劃線法
此法主要用於菌種分純,獲得單菌落.
由接種環沾取少許待分離的材料,在無菌平板表麵進行平行劃線、扇shan形xing劃hua線xian或huo其qi他ta形xing式shi的de連lian續xu劃hua線xian,微wei生sheng物wu細xi胞bao數shu量liang將jiang隨sui著zhe劃hua線xian次ci數shu的de增zeng加jia而er減jian少shao,並bing逐zhu步bu分fen散san開kai來lai,如ru果guo劃hua線xian適shi宜yi的de話hua,微wei生sheng物wu能neng一yi一yi分fen散san,經jing培pei養yang後hou,可ke在zai平ping板ban表biao麵mian得de到dao單dan菌jun落luo。
優點:可以觀察菌落特征,對混合菌進行分離。
缺點:不能用於菌落計數。
塗布法
此法主要用於菌落總數計數.
先將培養基熔化後趁熱倒入無菌平板中,然後用無菌吸管吸取0.1ml 菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無菌L 型玻璃棒將菌液在平板上塗抹均勻,將塗抹好的平板平放於桌上20~30min,使菌液滲透入培養基內,然後將平板倒轉,保溫培養,至長出菌落後即可計數。
優點:可以計數,可以觀察菌落特征。
缺點:接種前需梯度稀釋,吸收量較少,較麻煩,平板不幹燥效果不好,容易蔓延。
傾注法
此法主要用於菌落總數的計數.
吸取1ml 菌液加入平板中,倒入已融化並冷卻至45~50℃的細菌培養基,輕輕轉動平板,使菌液與培養基混合均勻,冷疑後倒置,適溫培養。至長出菌落後即可計數。
優點:可以計數,較方便。
缺點:接種前需梯度稀釋,不能觀察菌落特征,不適用於嚴格好氧菌和熱敏感菌。
斜麵接種法
此法主要用於保存菌種,或觀察細菌的某些生化特性和動力.
用yong接jie種zhong環huan或huo接jie種zhong針zhen伸shen入ru菌jun種zhong管guan內nei,挑tiao取qu用yong來lai移yi種zhong的de菌jun落luo。伸shen入ru斜xie麵mian培pei養yang管guan內nei,先xian從cong斜xie麵mian底di部bu到dao頂ding端duan拖tuo一yi條tiao接jie種zhong線xian,再zai自zi下xia而er上shang蜿wan蜒yan劃hua線xian,或huo直zhi接jie自zi下xia而er上shang地di蜿wan蜒yan劃hua線xian。接jie種zhong完wan成cheng之zhi後hou,用yong火huo焰yan滅mie菌jun培pei養yang管guan口kou,並bing塞sai上shang棉mian塞sai,置zhi於yu37℃培養。
液體培養基接種法
此法主要用於菌液比濁實驗
用滅菌接種環挑取菌落或標本,在試管內壁與液麵交界處輕輕研磨,使細菌均勻得散落在液體培養基中。
螺旋接種法
此法主要用於菌落總數計數
可ke以yi在zai無wu任ren何he全quan部bu或huo中zhong間jian稀xi釋shi的de情qing況kuang下xia快kuai速su細xi菌jun接jie種zhong。對dui數shu減jian少shao的de樣yang品pin容rong量liang以yi阿e基ji米mi德de螺luo旋xuan線xian的de形xing式shi被bei自zi動dong分fen注zhu在zai旋xuan轉zhuan式shi培pei養yang基ji表biao麵mian。培pei養yang基ji上shang每mei一yi點dian的de容rong量liang可ke以yi被bei知zhi曉xiao和he校xiao準zhun。菌jun液ye的de濃nong度du可ke以yi通tong過guo培pei養yang皿min上shang一yi定ding區qu域yu的de菌jun落luo數shu量liang除chu以yi同tong區qu域yu樣yang品pin分fen注zhu量liang來lai計ji算suan。
優點:螺旋接種法菌液無需稀釋(其他接種方法均需經過梯度稀釋才能計菌落數),自動化接種,效率高,可節省3/4 的耗材和時間。
缺點:產品成本高,適用於樣品量比較大的實驗。
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