1.配製溶液

向容器內加入所需水量的一部分，按照培養基的配方，稱取各種原料，依次加入使其溶解
，最後補足所需水分，對蛋白腖、肉膏等物質，需加熱溶解，加熱過程所蒸發的水分
，應在全部原料溶解後加水補足。

配製固體培養基時，先將上述已配好的液體培養基煮沸，再將稱好的瓊脂加入，繼續加熱至完全融化
，.並不斷攪拌，以免瓊脂糊底燒焦。

2.調節pH值

用pH試紙(或pH電位計
、氫離子濃度比色計)測試培養基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH進行調節，直到調節到配方要求的pH值為止。

3.過濾

用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培養基過濾。用紗布過濾時，最好折疊成六層
，用濾紙過濾時，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏鬥上過濾。

4.分裝

已過濾的培養基應進行分裝。如果要製作斜麵培養基，須將培養基分裝於試管中。如果要製作平板培養基或液體
、半ban固gu體ti培pei養yang基ji

，則ze須xu將jiang培pei養yang基ji分fen裝zhuang於yu錐zhui形xing瓶ping內nei。分fen裝zhuang時shi
，一yi手shou捏nie鬆song彈dan簧huang夾jia，使shi培pei養yang基ji流liu出chu，另ling一yi隻zhi手shou握wo住zhu幾ji支zhi試shi管guan或huo錐zhui形xing瓶ping，依yi次ci接jie取qu培pei養yang基ji。分fen裝zhuang時shi，注zhu意yi不bu要yao使shi培pei養yang基ji粘zhan附fu管guan口kou或huo瓶ping口kou

，以yi免mian浸jin濕shi棉mian塞sai引yin起qi雜za菌jun汙wu染ran。裝zhuang入ru試shi管guan的de培pei養yang基ji量liang，視shi試shi管guan和he錐zhui形xing瓶ping的de大da小xiao及ji需xu要yao而er定ding。一yi般ban製zhi作zuo斜xie麵mian培pei養yang基ji時shi
，每mei隻zhi15×150毫米的試管

，約裝3-4毫升(1/4-1/3試管高度)
，如製作深層培養基，每隻20×220毫米的試管約裝12-15毫升。每隻錐形瓶裝入的培養基，一般以其容積的一半為宜。

5.加棉塞

分裝完畢後，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免汙染。棉塞應采用普通新鮮、幹(gan)燥(zao)的(de)棉(mian)花(hua)製(zhi)作(zuo)，不(bu)要(yao)用(yong)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)，以(yi)免(mian)因(yin)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)吸(xi)水(shui)使(shi)棉(mian)塞(sai)無(wu)法(fa)使(shi)用(yong)。製(zhi)作(zuo)棉(mian)塞(sai)時(shi)，要(yao)根(gen)據(ju)棉(mian)塞(sai)大(da)小(xiao)將(jiang)棉(mian)花(hua)鋪(pu)展(zhan)成(cheng)適(shi)當(dang)厚(hou)度(du)
，揪(jiu)取(qu)手(shou)掌(zhang)心(xin)大(da)小(xiao)一(yi)塊(kuai)，鋪(pu)在(zai)左(zuo)手(shou)拇(mu)指(zhi)與(yu)食(shi)指(zhi)圈(quan)成(cheng)的(de)圓(yuan)孔(kong)中(zhong)，用(yong)右(you)手(shou)食(shi)指(zhi)插(cha)入(ru)棉(mian)花(hua)中(zhong)部(bu)
，同(tong)時(shi)左(zuo)手(shou)食(shi)指(zhi)與(yu)姆(mu)指(zhi)稍(shao)稍(shao)緊(jin)握(wo)，就(jiu)會(hui)形(xing)成(cheng)1gechangbangxingdemiansai。miansaizuochenghou
，yingxunsusairuguankouhuopingkouzhong
，miansaiyingjintieneibibuliufengxi
，yifangkongqizhongweishengwuyanzhouzheqinru。miansaibuyaoguojinguosong，saihaohou,，以手提棉塞、管
、瓶不下落為合適。棉塞的2/3應在管內或瓶內，上端露出少許棉花便於拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應蓋上厚紙用繩捆劄，準備滅菌。

6.製作斜麵培養基和平板培養基

培養基滅菌後
，如製作斜麵培養基和平板培養基，須趁培養基未凝固時進行。

(1)製作斜麵培養基。在實驗台上放1支長0.5-1米左右的木條,厚度為1厘米左右
，將試管頭部枕在木條上，使管內培養基自然傾斜
，凝固後即成斜麵培養基。

(2)zhizuopingbanpeiyangji。jiangganggangmieguojundeshengyoupeiyangjidezhuixingpinghepeiyangminfangzaishiyantaishang，dianranjiujingdeng，youshoutuoqizhuixingpingpingdi，zuoshoubaxiamiansai，jiangpingkouzaijiujingdengshangshaojiazhuoshao
，zuoshoudakaipeiyangmingai
，youshouxunsujiangpeiyangjidaorupeiyangminzhong，meiminyuedaoru10毫升
，以鋪滿皿底為度。鋪放培養基後放置15分鍾左右，待培養基凝固後

，再5個培養皿一疊，倒置過來，平放在恒溫箱裏，24小時後檢查，如培養基末長雜菌，即可用來培養微生物。