應廣大粉絲的需求,小編將陸續推出《微生物檢驗問答集錦》係xi列lie。本ben係xi列lie所suo列lie出chu的de問wen題ti均jun是shi微wei生sheng物wu檢jian驗yan過guo程cheng中zhong提ti問wen頻pin次ci較jiao高gao的de問wen題ti,我wo們men谘zi詢xun專zhuan家jia老lao師shi後hou彙hui編bian,希xi望wang可ke以yi幫bang助zhu微wei生sheng物wu檢jian驗yan從cong業ye人ren員yuan對dui檢jian驗yan過guo程cheng中zhong遇yu到dao的de問wen題ti有you新xin的de理li解jie。大da家jia對dui感gan興xing趣qu的de、比較關注的問題,也可以後台留言,我們一起交流探討!
答:GB 4789.1裏規定要定期進行,沒有明確說什麼時候進行。自己實驗室需要製定sop進(jin)行(xing)規(gui)定(ding),比(bi)如(ru)我(wo)們(men)實(shi)驗(yan)室(shi)總(zong)是(shi)檢(jian)出(chu)某(mou)個(ge)致(zhi)病(bing)菌(jun)的(de)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo),就(jiu)規(gui)定(ding)一(yi)個(ge)月(yue)的(de)時(shi)間(jian)來(lai)進(jin)行(xing)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。保(bao)證(zheng)實(shi)驗(yan)室(shi)人(ren)員(yuan)具(ju)有(you)可(ke)以(yi)持(chi)續(xu)進(jin)行(xing)陽(yang)性(xing)檢(jian)出(chu)的(de)能(neng)力(li)的(de)。最(zui)新(xin)的(de)RB/T 038-2020 食品微生物檢測結果質量監控指南文件裏規定:對於日常質量監控,應執行檢測方法的規定,否則建議每批或每組樣品每20個樣品1次的頻次進行;質控不一定需要人工汙染樣品來做,可以用標準菌株來做陽性和陰性對照。
答:目前的標準需要做,配套添加劑不需要單獨驗收。
GB4789.28是一個最低的標準,一定要達到。比如EC肉湯隻寫了大腸埃希氏菌和糞腸球菌這兩的菌株,必須要達到,如果企業自己的驗收標準(裏包含了國家標準裏的菌株)高於國家標準,那就更好。
答:主要是瓊脂分布不均導致的。建議瓊脂類培養基滅菌前加熱溶解均勻(如果是大體積配製進行分裝滅菌的培養基,建議煮沸溶解,攪拌分裝);滅菌後,使用前,關注培養基的透光性是否均一,如果不均一,輕輕搖晃使其均勻,再傾注平皿使用。
平皿幹裂縮水,與瓊脂的保水性、傾注培養基的量、平皿的透氣性、培養箱條件等因素均有關係。
a.瓊脂:不同的瓊脂在保水性方麵略有差異,保水性差的瓊脂可能會出現嚴重縮水或者幹裂。
b.培養基的量:傾注的培養基越少,平板越薄越容易幹裂。按照GB4789要求,傾注融化的培養基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少為3 mm(直徑90 mm的平皿,通常要加入18 mL~20 mL瓊脂培養基)。如果平板需儲存,或者培養時間超過48 h或培養溫度高於40 ℃,則需要傾注更多的培養基。
c.平皿的透氣性:pingbandemifengxingyuehao,baocunhepeiyangguochengzhongpeiyangjishishuiyueshao。suiranzengjiapingbandemifengxingkeyijianshaoshuifenliushi,danbingfeimifengxingyuegaoyuehao,yixiexuyangxingweishengwu(如銅綠假單胞菌、枯草芽孢杆菌等),在密閉環境中生長較差,需要良好的透氣性才能較好的生長。
d. 培養條件:培pei養yang箱xiang是shi影ying響xiang平ping皿min幹gan裂lie問wen題ti的de關guan鍵jian因yin素su之zhi一yi。大da型xing的de培pei養yang箱xiang為wei了le保bao證zheng內nei部bu溫wen度du均jun一yi,通tong常chang帶dai有you較jiao強qiang的de鼓gu風feng係xi統tong,內nei部bu有you較jiao強qiang的de空kong氣qi流liu動dong。而er氣qi流liu越yue強qiang,則ze越yue容rong易yi導dao致zhi平ping皿min失shi水shui。而er對dui於yu一yi些xie沒mei有you鼓gu風feng係xi統tong的de小xiao型xing培pei養yang箱xiang,則ze很hen少shao會hui出chu現xian平ping皿min幹gan裂lie現xian象xiang。在zai培pei養yang箱xiang內nei擺bai放fang平ping皿min時shi,應ying盡jin量liang避bi開kai風feng口kou氣qi流liu大da的de位wei置zhi,同tong時shi遠yuan離li培pei養yang箱xiang內nei部bu發fa熱re板ban。
綜上所述,在遇到平板幹裂縮水問題時,可通過增加平板培養基厚度、培養箱內增加擋板降低氣流或避開風口、選擇合適透氣性的平皿、選擇適宜瓊脂的的培養基等進行綜合的考慮分析,製定對應的方案和措施。
答:《GB4789.28 -2013培養基的試劑和質量要求》標準中指出,含有活性化學物質或不穩定性成分的固體培養基也應即配即用,不可二次融化;因此對於一些已添加抗生素、卵黃、血清等不穩定成分的培養基,不可以再次融化使用。而對於一般的培養基(未開封啟用),可使用沸水浴或采用有相同效果的方法使培養基融化,再次融化後未用完的培養基則不能重新凝固留待下次使用。
答:標準菌株存活性就(jiu)是(shi)其(qi)的(de)複(fu)活(huo)過(guo)程(cheng),我(wo)們(men)購(gou)買(mai)的(de)標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)一(yi)般(ban)是(shi)凍(dong)幹(gan)粉(fen)或(huo)者(zhe)凍(dong)幹(gan)管(guan),然(ran)後(hou)我(wo)們(men)要(yao)對(dui)其(qi)進(jin)行(xing)複(fu)活(huo)培(pei)養(yang),這(zhe)個(ge)過(guo)程(cheng)是(shi)必(bi)須(xu)的(de),否(fou)則(ze)我(wo)們(men)沒(mei)有(you)辦(ban)法(fa)使(shi)用(yong)。針(zhen)對(dui)其(qi)存(cun)活(huo)性(xing)的(de)驗(yan)證(zheng),所(suo)有(you)的(de)標(biao)準(zhun)法(fa)規(gui)中(zhong)都(dou)是(shi)其(qi)存(cun)活(huo)性(xing)的(de)判(pan)斷(duan),一(yi)個(ge)定(ding)性(xing)的(de)判(pan)斷(duan)。複(fu)活(huo)的(de)過(guo)程(cheng)對(dui)其(qi)進(jin)行(xing)打(da)管(guan),按(an)照(zhao)標(biao)準(zhun)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang),如(ru)果(guo)接(jie)種(zhong)到(dao)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang),有(you)肉(rou)眼(yan)可(ke)見(jian)的(de)渾(hun)濁(zhuo)或(huo)者(zhe)進(jin)一(yi)步(bu)鏡(jing)檢(jian)時(shi)有(you)目(mu)標(biao)微(wei)生(sheng)物(wu)生(sheng)長(chang);如果接種到固體培養上,有肉眼可見的菌落,這些都叫存活性合格。
實驗室多久做一次沉降菌檢測,哪個標準有規定?
答:每兩周要做一次沉降菌檢測包括操作台和房間的,方法可以參照GB/T 16294-2010,GB/T 27405-2008《實驗室質量控製規範食品微生物檢測 食品微生物檢測》附錄中有規定。
實驗室紫外燈怎麼清潔?使用多久需要換新的紫外燈?還是說隻要能用就不需要更換?
答:紫外線殺菌燈可以用紗布沾上75%酒精擦拭表麵。紫外燈都有使用壽命,對於潔淨室、生物安全櫃等最好能夠記錄紫外燈的使用時間,到時間後必須更換。再就是根據定期的沉降菌監測情況更換紫外燈。
滅菌後的瓊脂培養基,是否可以在恒溫箱或者恒溫水浴鍋過夜或更長時間存放?對培養基性能會有影響嗎?
答:《GB4789.28 -2013培養基的試劑和質量要求》標準中指出,融化後的培養基放入47~50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫(可根據實際培養基凝固溫度適當提高水浴鍋溫度),直至使用,培養基達到47℃~50℃的時間與培養基的品種、體積、數量有關。融化後的培養基應盡快使用,放置時間一般不應超過4 h。
長chang時shi間jian的de保bao溫wen可ke能neng會hui造zao成cheng培pei養yang基ji的de營ying養yang成cheng分fen流liu失shi,靈ling敏min度du下xia降jiang,培pei養yang效xiao果guo變bian差cha,瓊qiong脂zhi的de凝ning膠jiao強qiang度du降jiang低di等deng情qing況kuang,保bao溫wen過guo夜ye或huo更geng長chang時shi間jian這zhe種zhong操cao作zuo方fang法fa不bu是shi很hen規gui範fan。一yi般ban建jian議yi在zai滿man足zu試shi驗yan安an排pai的de情qing況kuang下xia,恒heng溫wen存cun放fang的de時shi間jian越yue短duan越yue好hao。
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