答：GB 4789.2要求每個樣品選擇2-3geshiyidexishidujinxingjiance。jishiyigeyangpinyijingjibenkeyiquedinglejunluoshule，yejianyiduojianceyigexishidu，duoyigexishiduyehuiduijiancejieguojinxingyanzheng，zhiceyigexishiduhuicunzaifengxian。lingwairuguoyangeanzhaoguobiaoyaoqiu，zheyangdejianceyeshibufuheyaoqiude，mouxieyaoqiuyangedewaishenbumenkenenghuiduicikaijubufuhexiang。yincizaijiancezhonghaishiyinggaiyangeanzhaoguojiabiaozhunzhixing。

2.如何保證檢測結果的有效性？

答：檢驗過程中需要做空白對照，用來判斷培養基
、稀釋液、平皿或吸管是否存在汙染。同時需要定期檢測空氣潔淨度，判斷實驗室環境是否符合標準要求，如潔淨工作台就要求百級（沉降菌<1CFU/皿）。

3.菌落總數計數同一個稀釋度一個在計數範圍，一個不在計數範圍，怎麼計
？

答：tongyixishidudelianggepingban，yigezaijishufanweinei，yigebuzaijishufanweinei，zeyizaijishufanweineidepingbandejunluoshuchengyixishibeishuzuoweibaogaojieguo。julishuoming
，mouyangpinjiancejieguo：10-1兩平板菌落數分別為320
、288，10-2稀釋度兩平板菌落數為27、23

，則樣品的檢測結果應選取288進行報告，報告結果為2.9*10³CFU/g。

4.菌落總數檢測中，所有稀釋度菌落都多不可計，記錄結果怎麼寫？

答：GB4789.2-2016中要求：若所有稀釋度平板上菌落數均大於300CFU，則ze對dui稀xi釋shi度du最zui高gao的de平ping板ban進jin行xing計ji數shu，其qi他ta平ping板ban可ke記ji錄lu為wei多duo不bu可ke計ji，結jie果guo按an平ping均jun菌jun落luo數shu乘cheng以yi最zui高gao稀xi釋shi倍bei數shu計ji算suan。但dan是shi遇yu到dao這zhe種zhong問wen題ti也ye分fen兩liang種zhong情qing況kuang，若ruo是shi平ping板ban上shang的de菌jun落luo數shu可ke計ji但dan超chao過guo300CFU，可以按照國標要求進行
；若平板上的菌落數過多

，導致無法準確計數，建議對樣品進行複測，複測時可增加1-2個稀釋度。 

5.平行對照板結果相差較大或者低稀釋度平板菌落數少於高稀釋度平板菌落數的原因？

答：平行板結果相差較大可能是由於樣液未完全混勻，導致菌落分布不均勻
，實驗過程中應使用拍打式均質器拍打1min~2min或者使用均質杯8000r / min~10000r/min均質 1min~2min
，使樣液混合均勻。

6.而低稀釋度平板菌落數少於高稀釋度平板菌落數的原因是？ 

答：產品中加入防腐劑或者抑菌物質，做第一個稀釋度的時候
，由於濃度大
，防腐劑的含量也大，會抑製細菌的生長，第二、第三個稀釋度的時候由於濃度小，防腐劑的含量也相對少了，抑菌作用也小，所以出現這種情況；

B.產品本身呈酸性，需要添加石炭酸溶液調節pH至中性，否則會出現低稀釋度比高稀釋度平板菌落數少。

7.做菌落總數檢測時，沒有菌落是怎麼回事？

答：shouxian，yaoquerenxiashibushiyangpindewenti，mouxiejianceyangpinjingguogaowenshajunzhihou，benshenjiumeiyoutaiduojun，suoyimeiyoujunluoyeshizhengchangde。qici，guochengcaozuoyoumeiyouwenti，biruyongyujiancedexishiyeshiyongshishibushiwendutaigao，huozhedaopeiyangjishipeiyangjiwenduguogao，yihuozhepeiyangjizhiliangwenti、peiyangxiangwendupiandideng。zuihou，jianceshixuanzedexishiduguogao，yekenengdaozhimeiyoujunluoshengchang。zongzhichuxianzhezhongqingkuangxuyaoconggegefangmianjinxingfenxi。qishishouxianjiuyinggaiquerenyangpinbenshen
，henduojianceyangpinjiancepingbanbuchangjunluoyeshizhengchangde。

8.菌落總數的單位CFU與個有什麼區別？

答：菌落形成單位叫做CFU。CFU的含義是形成菌落的菌落個數
，不等於細菌個數。(比如兩個相同的細菌靠得很近或貼在一起，那麼經過培養這兩個細菌將會形成一個菌落，此時就是2個細菌，1CFU。)junluozongshuwangwangcaiyongdeshipingbanjishufa
，jingguopeiyanghouwomenjishuchupingbanshangsuoshengchangchudejunluogeshu，congerjisuanchumeihaoshenghuomeikedaijianyangpinzhongkeyipeiyangchuduoshaogejunluo，yushiyiCFU/ml或CFU/g報告。

9.菌落蔓延的原因及解決辦法？

答：菌落蔓延主要有兩個原因，一是操作不當；二是樣品中含有變形杆菌等運動性強的細菌。 操作中需要注意3個關鍵點： 

A. 傾注培養基時搖晃平皿使其混合均勻，減少菌塊
；

B. 樣品稀釋後，盡快傾注平板。從稀釋到傾注結束時間控製在30 分鍾之內，避免樣液幹涸造成菌落成團；

C.平板凝固後馬上倒置若樣品中含有變形杆菌，則可以覆蓋一層培養基。但是用此法時
，最好做一對照
，因為有一種觀點認為：此法會使菌落數減少。

A：如果平板上食品顆粒與菌落形態較為接近，為了避免和細菌菌落發生混淆
，可多傾注一塊平板置於4℃冰箱中放置，在計數時用於對照。另外也可以在已融化而保溫在46℃水浴的PCA中加入0.5%TTC溶液，培養後食品顆粒不變色，細菌為紅色。注意TTC的濃度不要過高，會有抑製細菌生長作用（食品檢測一般不建議使用TTC，會有一定的抑菌效果）。

11.為什麼平板計數瓊脂需要調節pH？

答：培(pei)養(yang)基(ji)的(de)酸(suan)堿(jian)度(du)應(ying)符(fu)合(he)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)要(yao)求(qiu)。平(ping)板(ban)計(ji)數(shu)瓊(qiong)脂(zhi)是(shi)用(yong)來(lai)檢(jian)測(ce)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)菌(jun)落(luo)總(zong)數(shu)的(de)
，而(er)大(da)部(bu)分(fen)細(xi)菌(jun)都(dou)是(shi)嗜(shi)中(zhong)性(xing)的(de)，所(suo)以(yi)需(xu)要(yao)調(tiao)節(jie)培(pei)養(yang)基(ji)pH至7.0±0.2
，保證細菌生長環境的適宜，從而確保檢測結果的準確性。

12.為什麼平板計數瓊脂需要高壓蒸汽滅菌，而結晶紫中性紅膽鹽瓊脂隻需煮沸滅菌？

答：培(pei)養(yang)基(ji)滅(mie)菌(jun)是(shi)為(wei)了(le)避(bi)免(mian)外(wai)部(bu)帶(dai)入(ru)的(de)菌(jun)對(dui)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)造(zao)成(cheng)影(ying)響(xiang)。平(ping)板(ban)計(ji)數(shu)瓊(qiong)脂(zhi)為(wei)非(fei)選(xuan)擇(ze)性(xing)計(ji)數(shu)培(pei)養(yang)基(ji)

，需(xu)要(yao)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)殺(sha)死(si)所(suo)有(you)外(wai)源(yuan)的(de)孢(bao)子(zi)和(he)芽(ya)孢(bao)，才(cai)能(neng)準(zhun)確(que)計(ji)數(shu)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)菌(jun)落(luo)總(zong)數(shu)。結(jie)晶(jing)紫(zi)中(zhong)性(xing)紅(hong)膽(dan)鹽(yan)瓊(qiong)脂(zhi)是(shi)檢(jian)測(ce)大(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)的(de)，大(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)沒(mei)有(you)孢(bao)子(zi)和(he)芽(ya)孢(bao)，所(suo)以(yi)煮(zhu)沸(fei)滅(mie)菌(jun)即(ji)可(ke)。

13.為什麼菌落總數培養條件為36±1℃培養48±2h


，而水產品要求30±1℃培養72±3h？

A：對於沒有經過任何加工的水產品
，其菌落總數培養條件為30±1℃培養72±3h。因為水中本身溫度較低，未加工的水產品中微生物主要來源於水體，30℃、72h是水中微生物最適培養溫度和時間。而加工水產品和其他產品培養條件都是36±1℃培養48±2h
，其實就是產品本身的菌和加工過程中帶入的菌的最適培養溫度和時間不同的問題。