純種分離

conghunzaweishengwuquntizhonghuodezhihanyoumouyizhonghuomouyizhuweishengwudeguochengchengweiweishengwufenliyuchunhua。zaifenzishengwuxuedeyanjiujiyingyongzhong
，bujinxuyaotongguofenlichunhuajishuconghunzadetianranweishengwuqunzhongfenlichutedingdeweishengwu
，erqiehaibixusuishizhuyibaochiweishengwuchunpeiyangwude“純潔”
，防止其他微生物的混入。

純種分離的目的是將目的菌從混雜的微生物中分離出來，獲得純培養。

如果樣品沒有經增殖培養而直接進行分離
，那麼要得到具有某一特性的純種，就更該細致、謹慎的操作。

純種分離的常用方法有4種：

傾注平板分離法、塗布平板分離法、平板劃線分離法和組織分離法。

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、傾注平板分離法：培養後
，在培養基內部及表麵形成單菌落。

傾注平板法:將無自生理鹽水稀釋後的樣品加入無茵培養基混合均勻。待凝固後倒置培養
，內部及表麵形成單自落。

 

2、塗布平板分離法：培養後
，在培養基表麵形成單菌落。

因(yin)為(wei)將(jiang)微(wei)生(sheng)物(wu)懸(xuan)液(ye)先(xian)加(jia)到(dao)較(jiao)燙(tang)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)再(zai)倒(dao)平(ping)板(ban)易(yi)造(zao)成(cheng)某(mou)些(xie)熱(re)敏(min)感(gan)菌(jun)的(de)死(si)亡(wang)
，且(qie)采(cai)用(yong)稀(xi)釋(shi)倒(dao)平(ping)板(ban)法(fa)也(ye)會(hui)使(shi)一(yi)些(xie)嚴(yan)格(ge)好(hao)氧(yang)菌(jun)因(yin)被(bei)固(gu)定(ding)在(zai)瓊(qiong)脂(zhi)中(zhong)間(jian)缺(que)乏(fa)氧(yang)氣(qi)而(er)影(ying)響(xiang)其(qi)生(sheng)長(chang)，因(yin)此(ci)在(zai)微(wei)生(sheng)物(wu)學(xue)研(yan)究(jiu)中(zhong)常(chang)用(yong)的(de)純(chun)種(zhong)分(fen)離(li)方(fang)法(fa)是(shi)塗(tu)布(bu)平(ping)板(ban)法(fa)。

用途：一般多用於菌種的純化
；

優點：可以觀察菌落特征
，對混合菌進行分離
；

缺點：不能計數；

3、平板劃線分離法：能達到純種分離的目的。

經培養後會得到呈分散狀態的單菌落純培養。

最簡單的分離微生物的方法是平板劃線法，其原理是將微生物樣品在固體培養基表麵多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的的。劃線的方法很多，常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法
、四格法等。

用途：一般多用於篩選菌株；用於平板培養基的回收率計數。 

優點：可以計數，可以觀察菌落特征。 

缺點：吸收量較少，較麻煩，平板不幹燥效果不好，容易蔓延。如果菌液密度大的話
，長不出單菌落。

4、組織分離法：適用於從子實體或罹病的植株上分離高等真菌或植物致病菌。

分離時，切取小塊受病組織

，用10%漂白粉水或0.1%升汞液進行表麵消毒
，並用無菌水洗滌數次後，移置於培養皿中的瓊脂培養基表麵上，在適宜的溫度條件（25℃~26℃）培養。

受病組織內潛伏的微生物開始生長，經3~5天後
，就可以看到從受病組織周圍長出菌絲，並向外擴展。

經菌落特征的觀察和鏡檢，確認是所需分離的菌種時，即用火焰滅菌的接種針從邊緣挑取少量菌體
，移到斜麵培養基中培養。

與增殖培養一樣，在純種分離時同樣也要根據實際情況對培養基的營養成分和培養條件進行適當的控製

，以獲得良好的分離效果。