01
菌株保存的是第三代,-80℃保存, 再取出來活化的話屬於第幾代?
答:baocundeshidisandaifuhuochulaihou,ruguocaiyongpingbanhuoroutanghuohuaxiangdangyuzhuanjieleyidai,jiushidisidai,ruguohaizaicizhulidehuajiuhaishiyuanlaidedaishu。ruguoshibaocunzaixiemianshang,zheyizhixiemianyizhijiushidisandai,ruguozhuanjiedaolingyizhixiemianjiushidisidai。chuandaiyuanze,junzhuhuohuafusubulunyirenhexingshifanzhileyicijiusuanshichuanleyidai。danruguojinshiwuliweizhidezhuanyimeiyoufanzhijiubushichuandai。
02
菌株傳代保存到瓷珠裏一定要挑單菌落嗎?
答:不(bu)一(yi)定(ding)非(fei)挑(tiao)單(dan)菌(jun)落(luo),但(dan)是(shi)一(yi)定(ding)要(yao)挑(tiao)相(xiang)同(tong)特(te)征(zheng)的(de)菌(jun)落(luo),就(jiu)是(shi)說(shuo)從(cong)同(tong)一(yi)個(ge)菌(jun)落(luo)純(chun)化(hua)出(chu)來(lai)的(de),以(yi)保(bao)證(zheng)它(ta)們(men)的(de)特(te)性(xing)完(wan)全(quan)一(yi)致(zhi)。原(yuan)則(ze)是(shi)盡(jin)量(liang)多(duo)挑(tiao),寧(ning)多(duo)勿(wu)少(shao)。
03
菌株冷凍保存是-70℃還是-80℃有具體標準規定麼?
答:有標準。《SN/T 2632-2010 微生物菌株常規保藏技術規程》是關於菌株保藏的一個標準,大家可以學習一下,各個保存方式都有介紹,但是瓷珠是比較新興的保存方式暫時裏麵還沒有收錄。GB4789.28-2013建議長期冷凍儲存是在不高於-70℃條件下。
04
怎樣延長菌株的保存時間呢?
答:大量的實驗證明菌株在低溫、幹燥、缺氧、缺營養的條件下保存效果是最好的,越接近這種保存條件,菌株的保存時間越長。例如甘油凍存管,在-80℃保存時間大於在-20℃。凍幹菌粉在-20℃保存時間會比2~8℃長。
05
怎樣純化菌株?
答:純化就是從可疑菌落平板上挑取單菌落再劃線到合適的非選擇性平板(如TSA、NA等)上,分離出單菌落的過程。
06
我們隻保存第一代菌株是不是要重新傳代保存呢,認證老師會不會認為這是個錯誤?
答:一yi般ban情qing況kuang下xia認ren證zheng老lao師shi不bu會hui提ti出chu這zhe種zhong問wen題ti。最zui佳jia儲chu存cun方fang式shi應ying該gai是shi,製zhi備bei第di一yi代dai菌jun株zhu的de甘gan油you凍dong存cun管guan,置zhi於yu超chao低di溫wen冰bing箱xiang進jin行xing長chang期qi保bao存cun。第di二er代dai菌jun株zhu作zuo為wei工gong作zuo儲chu備bei菌jun株zhu,進jin行xing斜xie麵mian保bao存cun。使shi用yong第di二er代dai工gong作zuo儲chu備bei菌jun株zhu進jin行xing轉zhuan接jie後hou為wei第di三san代dai工gong作zuo菌jun株zhu。
為何要將第三代作為工作菌株?
答:junzhuzaiduocichuandaihou,junzhudebianyigailvhuidadazengjia,yincijunzhuchuandaixukongzhizaiwudaiyinei,erdiyidaijunzhutongchangxiangduibuwending,xuchuanzhidisandaishijunzhuwending。yincishijigongzuozhongtongchangxuanzedisandaijunzhuzuoweigongzuojunzhu。
質控菌株是不是傳代超過五代就必須銷毀處理?
答:不一定。傳代超過五代隻是存在菌種變異可能,但如果傳代到第六代、第七代……經過形態、生化特性、DNA特征等驗證,性狀保持穩定,那麼這些五代後的菌還是可以正常使用。
09
菌種編號意義?
答:以金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003為例,CMCC為中國醫學菌種保藏中心縮寫,其它常見菌種保藏中心還包括ATCC(美國標準菌種收藏所)、CICC(工業微生物菌種保藏中心)、FSCC(食品安全菌種保藏中心);B的意思是細菌,對應還有F(真菌);26003為CMCC的保藏編號。
10
同樣是金黃色葡萄球菌ATCC6538與ATCC25923有什麼不同?
答:ATCC6538與ATCC25923均為來自美國標準菌種收藏所(ATCC)的de菌jun株zhu,不bu同tong的de編bian號hao表biao明ming這zhe兩liang株zhu最zui初chu始shi的de分fen離li來lai源yuan不bu同tong。但dan不bu同tong的de編bian號hao的de生sheng化hua特te性xing是shi否fou一yi樣yang,需xu要yao進jin行xing具ju體ti分fen析xi。比bi如ru在zai實shi際ji生sheng物wu學xue檢jian驗yan中zhong發fa現xian金jin黃huang色se葡pu萄tao球qiu菌junATCC6538溶血能力較ATCC25923要強。
11
使用瓷珠保藏管保存菌株,加入菌液搖勻後為什麼要吸幹菌液?
答:瓷(ci)珠(zhu)保(bao)存(cun)的(de)原(yuan)理(li)為(wei)瓷(ci)珠(zhu)為(wei)多(duo)孔(kong)結(jie)構(gou),細(xi)菌(jun)吸(xi)附(fu)在(zai)瓷(ci)珠(zhu)上(shang),除(chu)去(qu)液(ye)體(ti),則(ze)避(bi)免(mian)反(fan)複(fu)凍(dong)融(rong)時(shi),液(ye)體(ti)冷(leng)凍(dong)過(guo)程(cheng)中(zhong)形(xing)成(cheng)的(de)冰(bing)晶(jing)損(sun)傷(shang)細(xi)菌(jun),從(cong)而(er)達(da)到(dao)保(bao)護(hu)細(xi)菌(jun)的(de)作(zuo)用(yong)。如(ru)果(guo)不(bu)吸(xi)幹(gan)菌(jun)液(ye)的(de)話(hua),那(na)麼(me)瓷(ci)珠(zhu)保(bao)存(cun)就(jiu)達(da)不(bu)到(dao)可(ke)以(yi)進(jin)行(xing)反(fan)複(fu)凍(dong)融(rong)的(de)效(xiao)果(guo)。
12
TSA斜麵一般多少度保存,可以放在冷藏裏嗎?
答:一般細菌的TSA斜麵,2-8℃保存,即冷藏,但弧菌、綠膿杆菌、嗜水氣單胞菌等對低溫較敏感菌株,短期置於室溫20-25℃保存,長期保存需使用甘油管或者瓷珠凍存。
複蘇凍幹菌株是否可以采用液體培養基?
答:keyi,danshiyongyetifusudehuazhinengguanchadaopeiyangjihunzhuo,wufaquedingshifouyouwuran。jianyishiyongpingbanpeiyangjifusudongganjunzhu,youzhuyujiandantongguorouyanguanchajunluoxingtaiyifenbianfusuchulaijunzhushifoucunzaiwuran,chubujiandingjunzhuchundu。
14
複蘇凍幹菌株是否可以采用顯色培養基?
答:bujianyicaiyongxiansepeiyangjifusudongganjunzhu。dongganjunzhuzaidongganguochengzhonghuishoudaoyidingdesunshang,fusuxuyaoyigezuishishengchanghuanjing,gufusupeiyangjibunengxuanyonghanyouyijunchengfenbuliyujunzhufusudezheleixuanzexingpeiyangji(顯色培養基屬於選擇性培養基)。
15
產氣莢膜梭菌做凍存時是否需要保持厭氧狀態?
答:buxuyao。chanqijiamosuojunsuishuyanyangxingxijun,danduiyanyangchengduyaoqiubingbutaiyange,anzhaoyibanjunzhudongcunfangfajinxingdongcunjike。ruguoshidongcunyangeyanyangjun,zexuteshudedongcunfangfa。
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