fenlipingbanhuaxianzuihaocaiyongfenquhuaxiandefangfa,mudeshijiangbutongjunfenlikai,bianyuhouxutiaoqudanjunluojianding。genjuzengjunyenongdujuedingbutongquzhijianshifouxuyaoshaohuanhuozhegenghuanjiezhonghuan,baozhengjunluobuhuiguomijihuozheguoyuxishu。
2、選擇性分離平板上有的不長菌,有的有典型菌落,如何判斷?
標(biao)準(zhun)中(zhong)為(wei)了(le)避(bi)免(mian)漏(lou)檢(jian),選(xuan)用(yong)了(le)兩(liang)種(zhong)或(huo)兩(liang)種(zhong)以(yi)上(shang)的(de)選(xuan)擇(ze)性(xing)分(fen)離(li)平(ping)板(ban)。由(you)於(yu)不(bu)同(tong)種(zhong)類(lei)的(de)沙(sha)門(men)在(zai)平(ping)板(ban)上(shang)生(sheng)長(chang)有(you)差(cha)異(yi),所(suo)以(yi)某(mou)些(xie)沙(sha)門(men)氏(shi)菌(jun)會(hui)出(chu)現(xian)在(zai)某(mou)一(yi)種(zhong)平(ping)板(ban)上(shang)生(sheng)長(chang),其(qi)他(ta)平(ping)板(ban)不(bu)生(sheng)長(chang)或(huo)者(zhe)生(sheng)長(chang)不(bu)典(dian)型(xing)的(de)情(qing)況(kuang)。根(gen)據(ju)標(biao)準(zhun),任(ren)何(he)一(yi)種(zhong)分(fen)離(li)平(ping)板(ban)上(shang)出(chu)現(xian)可(ke)疑(yi)菌(jun)落(luo)都(dou)需(xu)要(yao)進(jin)行(xing)後(hou)續(xu)的(de)鑒(jian)定(ding),不(bu)能(neng)直(zhi)接(jie)判(pan)定(ding)。根(gen)據(ju)後(hou)續(xu)生(sheng)化(hua)和(he)血(xue)清(qing)結(jie)果(guo)再(zai)報(bao)告(gao)檢(jian)出(chu)或(huo)者(zhe)未(wei)檢(jian)出(chu)。
3、培養基滅菌前後如何測定pH?
培養基pH值測定是完全溶解,滅菌後,冷卻至25℃進行測量。我司不推薦滅菌前測定,因為滅菌過程中,溫度和成分間的化學反應,會影響pH值。所以,推薦客戶滅菌冷卻後測量。如果是含瓊脂的培養基可以采用固體電極進行測量。
4、血清學鑒定時H血清鑒定使用的半固體瓊脂配置及挑菌問題
轉接半固體培養後,由於瓊脂含量低、平板軟,所以建議采用一次性接種環輕輕刮取擴散邊緣菌苔進行後續操作。金屬接種環質地堅硬容易戳破瓊脂。
5、血清學鑒定是否需要做分型?
按照標準要求報告結果隻需報告檢出或未檢出沙門氏菌,不需要報告具體血清型,所以隻需要做O多價和H多價就可以了。如果需要後續進行分型,需要購買群血清及單因子血清。
6、生化鑒定使用的菌懸液濁度要求?
生化鑒定套裝為微量鑒定係統,對於菌懸液濃度有要求。使用0.5M濁度進行接種。菌懸液濃度過大或者過小對實驗結果的準確度有影響。
7、鼠傷寒沙門氏菌接種三糖鐵瓊脂斜麵變黑的問題?
可能是由於接種量過大或者培養時間過長導致的,建議減少接菌量或縮短培養時間。
8、BPW在增菌時必需加熱到44℃嗎?室溫的溫度可以增菌嗎?
培養基預熱至44℃主要目的是保證乳粉的充分溶解,室溫條件下加入樣品可能會導致部分樣品聚集成團,不易溶解。
10、不同克羅諾杆菌的產黃色素能力不同,並且有文獻報道約10%的克羅諾菌屬的菌株不具有產黃色素的能力,所以僅根據產黃色素進行判定會有漏檢的情況,建議結合生化試驗進行判斷。在25℃時更易觀察黃色素的產生,溫度過高黃色素顏色會變淡(出自《伯傑氏細菌手冊》)。
根據我們生化幹製套裝中提供的0.5麥氏濁度比濁管作為參比,也可以選用濁度儀。
12、為什麼用同一株標準菌株 ATCC29544 做陽性添加後做阪崎幹製時西蒙氏檸檬酸有陰性也有陽性?
如果操作正確,保證菌株活性及純度的情況下,ATCC29544 這株模式菌株的西蒙氏檸檬酸鹽反應應該呈現陽性。
ESM015可以進行準確的篩選,相比較而言ESM016 培養基上生長的菌株特異性更強,結果更易觀察。
不同過程的溫度的作用是不一樣的。BPW進行36±1℃,主要是為了使得產品中的微生物進行複蘇;選擇性增菌44±0.5℃是為了提高選擇性;TSA 25℃利於黃色素的產生;生化試驗30℃是為了提供適宜的溫度更利於目標菌的生長並觀察生化反應。
目前我們實驗室的陰溝腸杆菌標準菌株在ESM015上為白色菌落,但是1%的陰溝腸杆菌是具有α-葡萄糖苷酶的活性,所以極少的陰溝腸杆菌也會呈現藍綠色菌落。
根據限量標準進行選擇,目前限量標準中要求一段奶粉進行定量檢測。
陰性對照試驗不用全過程添加,隻需在部分生化實驗時添加陰性對照菌株。
我公司成品萬古黴素已經過過濾除菌,可直接使用,如果自行配製建議進行過濾除菌。
由於微生物的數量和分布不均勻導致,微生物不能複檢。
21、自立袋的封口不會造成無氧環境,阪崎腸杆菌能夠正常生長。
培養基高壓前進行煮沸即可避免黑色沉澱的產生。
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