要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍幹燥法、80℃冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。
對於不同的保存方式活化的方式也不同:
1.定期移植法的菌種複蘇較簡單,直接轉接即可;
2.液體石蠟法保存的菌種在複蘇時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上,生長繁殖後,再重新轉接一次;
3.沙(sha)土(tu)管(guan)法(fa)保(bao)存(cun)菌(jun)種(zhong)在(zai)複(fu)蘇(su)時(shi),在(zai)無(wu)菌(jun)條(tiao)件(jian)下(xia)打(da)開(kai)沙(sha)土(tu)管(guan),取(qu)部(bu)分(fen)沙(sha)土(tu)粒(li)於(yu)適(shi)宜(yi)的(de)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang),長(chang)出(chu)菌(jun)落(luo)後(hou)再(zai)轉(zhuan)接(jie)一(yi)次(ci)。或(huo)取(qu)沙(sha)土(tu)粒(li)於(yu)適(shi)宜(yi)的(de)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),增(zeng)殖(zhi)培(pei)養(yang)後(hou)再(zai)轉(zhuan)接(jie)斜(xie)麵(mian);
4.真空冷凍幹燥法保存菌種在複蘇時先用70%jiujingmianhuacashianbushangbu,jianganbuguandingbushaore,yongwujunmianqianzhanlengshui,zaidingbucayiquan,dingbuchuxianliewen,yongcuodaohuoniezijingbuqingkouyixia,qiaoxiayikailiedeanbuguandedingduan,yongwujunshuihuopeiyangyerongjiejunkuai,shiyongwujunxiguanyiruxinxianpeiyangjishang,jinxingshiwenpeiyang;
5.-80℃冰箱凍結法保存菌種複蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置38℃-40℃水浴中快速複蘇並適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養
6.液氮超低溫凍結法保存菌種複蘇與-80℃冰箱凍結法保存菌種複蘇相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速複蘇並適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養。
總結一下菌種活化需要以下幾個步驟:
第一、配置菌種適宜生長的培養基。
第二、將菌種從保藏狀態恢複到室溫狀態,比如將冷凍的菌種解凍。
第三、將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養,此步驟稱為菌種複壯。
第四、挑選培養基茁壯的菌落,挑選其中部分菌落接種到新的培養基中培養,重複此步驟2-3次,從而得到生長良好的菌落。
經過這四個步驟就到達將菌種從保藏狀態活化的目的。
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