抑菌圈
抑菌圈(Zone of inhibition)是福萊明發現青黴素的過程中,提出的一個詞彙。他發現,接種了青黴的培養皿中,青黴的周圍不生長細菌,而在遠離青黴的地方有細菌生長。不生長細菌的地方,是一個以青黴菌落為圓心的一個規則的圓,這個圓圈被福萊明稱為抑菌圈。
後hou來lai,福fu萊lai明ming發fa現xian,這zhe個ge抑yi菌jun圈quan的de出chu現xian與yu青qing黴mei分fen泌mi的de青qing黴mei素su有you關guan,青qing黴mei素su有you殺sha菌jun的de作zuo用yong,將jiang青qing黴mei周zhou圍wei一yi定ding範fan圍wei內nei的de細xi菌jun全quan部bu殺sha死si,所suo以yi形xing成cheng了le一yi個ge以yi青qing黴mei為wei圓yuan心xin的de沒mei有you細xi菌jun生sheng長chang的de抑yi菌jun圈quan。
抑菌圈直徑大小以 mm 作為計量單位。
抑菌圈法
常chang用yong於yu抗kang生sheng素su產chan生sheng菌jun的de分fen離li篩shai選xuan。工gong具ju菌jun采cai用yong抗kang生sheng素su的de敏min感gan菌jun。若ruo被bei檢jian菌jun能neng分fen泌mi某mou些xie抑yi製zhi工gong具ju菌jun生sheng長chang的de物wu質zhi,如ru抗kang生sheng素su等deng,便bian會hui在zai該gai菌jun落luo周zhou圍wei形xing成cheng工gong具ju菌jun不bu能neng生sheng長chang的de抑yi菌jun圈quan,很hen容rong易yi被bei鑒jian別bie出chu來lai。
抑菌圈實驗說明
抑菌圈法是衡量殺菌防黴劑效果的一種方式,主要用於測定殺菌防黴劑對細菌、黴菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通過殺菌防黴劑在瓊脂平板上的擴散能力來初步篩選更有效的殺菌防黴劑品種。
用具和材料
黴菌培養皿,無菌吸管(或針筒),圓片濾紙(直徑50px),帶玻璃珠的無菌水,帶過濾漏鬥的三角牌,鑷子,接種針(環),熔化狀態的瓊脂培養基(最好保溫於45℃左右水浴中),一定濃度的藥劑,供試驗用的菌種。
試驗過程
1.用接種環挑取各試管斜麵的菌種於帶玻璃珠的無菌水中,用手振蕩數分鍾使孢子分散,過濾後製成混合孢子懸液。
2.用無菌吸管(或針筒)向各培養皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。
3.向各培養皿內注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養基(約45℃),將菌液與培養基混合均勻,待其冷卻。
4.用鑷子將圓片濾紙在不同濃度的防黴劑中浸漬片刻,取出置於帶菌培養基平板的中央,蓋上蓋子
5.置適宜溫度下,培養2~3d,觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。
注意事項
1.所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理,操作必須在無菌室(或無菌箱)內於火焰旁進行。
2.黴菌、細菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液,即這裏指的混合菌液是黴菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液,並非黴菌、細菌和酵母菌的混合液。
3.混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL.
4.倒入培養皿的瓊脂培養基溫度不能太高(一般為45℃左右),否則會引起微生物死亡。也不能太低,因為瓊脂會很快凝結,以致攪拌不均勻,影響試驗結果。
5.各種微生物的最適生長溫度不同(例如黴菌一般為25~30℃,細菌一般為32~37℃等),恒溫培養時宜分開放置。
結果評判
由於濾紙圓片所吸附的藥液慢慢向四周擴散,因此在濾紙片的周圍就出現清晰的抑菌圈(加入該防黴劑對供試菌有抑製效果)。抑yi菌jun圈quan的de大da小xiao代dai表biao藥yao劑ji抗kang菌jun力li的de高gao低di。在zai一yi定ding的de藥yao劑ji濃nong度du範fan圍wei內nei,藥yao劑ji的de濃nong度du越yue高gao則ze抑yi菌jun圈quan的de直zhi徑jing越yue大da。此ci法fa同tong樣yang適shi合he於yu測ce定ding單dan個ge菌jun的de抗kang菌jun效xiao果guo。
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