1.在開始工作以前
，要清除生物安全櫃內表麵的汙染。

2.將所有必需的物品置於安全櫃內，以盡可能減少雙臂進出前麵開口的次數。物品放置要注意以下幾點：

①II級生物安全櫃台麵前麵和後麵的進氣格柵不能被物品阻擋。

②所有物品應盡可能地放在工作台後部靠近工作台邊緣的位置
，並使其在操作中不會阻擋後部格柵。

③可產生氣溶膠的設備(如：混勻器、離心機等)應靠近安全櫃的後部放置。有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子等體積較大的物品，應該放在安全櫃內的某一側。

④潔淨的物品應放置在距離產生氣溶膠器皿至少15 cm外，降低交叉汙染的可能性。

⑤容易受紫外線損傷的實驗樣本可以在紫外線殺菌後的實驗之前放入。

⑥不要在工作區內排放過多的物品。

3.關閉操作前窗，打開生物安全櫃的紫外燈
，對生物安全櫃工作台麵，側壁表麵以及後壁內側進行殺菌處理。

4.稍微打開操作前窗

，讓生物安全櫃工作區排氣幾分鍾之後再開始工作。

(二)操作注意事項

1.zaishiyongshengwuanquanguishiyingchuanzhegetifanghufubingdaishoutaofangzhibeiwuran。zaijinxingyijiheerjishengwuanquanshuipingdecaozuoshi
，kechuanzheputongshiyanfu。shoutaoyingtaozaishiyanfuxiukouwaimian。youxiecaozuokenenghaixuyaodaikouzhaohehumujing。

2.在zai生sheng物wu安an全quan櫃gui內nei，避bi免mian使shi用yong酒jiu精jing燈deng等deng明ming火huo滅mie菌jun器qi。使shi用yong明ming火huo會hui對dui氣qi流liu產chan生sheng影ying響xiang，並bing且qie在zai處chu理li揮hui發fa性xing物wu品pin和he易yi燃ran物wu品pin時shi

，也ye易yi造zao成cheng危wei險xian。在zai對dui接jie種zhong環huan進jin行xing滅mie菌jun時shi，可ke以yi使shi用yong紅hong外wai線xian電dian加jia熱re器qi(見圖1),或者幹脆使用一次性塑料接種環。

3.手和雙臂伸入到生物安全櫃中等待大約1min,以便安全櫃調整完畢並且讓裏麵的空氣“掃過”手和雙臂的表麵以後，才可以開始對物品進行處理。

4.gongzuoshi，jinliangjianshaoshoubideyidong，yidongshiyaohuanman，fangzhiganraoguineiqiliu。zaiyidongshuangbijinchuanquanguishi，xuyaoxiaoxinweichiqianmiankaikouchuqiliudewanzhengxing

，shuangbiyinggaiyugongzuoqukaikouchuizhidihuanmanjinchuqianmiandekaikou。

5.在工作台麵上的實驗操作應該按照從清潔區到汙染區的方向進行
，所有操作在工作台麵的中後部進行。

6.工gong作zuo時shi，耐nai高gao壓ya滅mie菌jun的de生sheng物wu危wei害hai性xing廢fei棄qi物wu袋dai以yi及ji吸xi管guan盛sheng放fang盤pan放fang在zai安an全quan櫃gui內nei不bu能neng拿na出chu安an全quan櫃gui，否fou則ze在zai使shi用yong這zhe些xie物wu品pin時shi雙shuang臂bi就jiu必bi須xu頻pin繁fan進jin出chu安an全quan櫃gui，這zhe樣yang會hui幹gan擾rao安an全quan櫃gui空kong氣qi屏ping障zhang的de完wan整zheng性xing，從cong而er影ying響xiang對dui人ren員yuan和he物wu品pin的de防fang護hu。

7.一旦實驗過程中產生溢灑物，用消毒紙巾置於其表麵吸附清理。

8.jinliangshianquanguichuyuchixugongzuozhuangtai
，bingduisuoyouwupinjinxingbiaomianxiaoduchuli，tigongzuidachengduderenyuanbaohu。conganquanguineibunaqukenengchanshengwurandewupinshi，yidingyaojinxingbiaomianxiaoduchuli。

(三)使用完畢後的處理

1.係緊用過的生物廢物袋。

2.對安全櫃內壁、後壁
、工作台麵和前窗內側進行清潔和消毒處理。

3.由於剩餘的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設備在內的所有物品都應清除表麵汙染，並移出安全櫃。

4.從安全櫃內移出手臂之前
，一定要進行表麵消毒處理
，然後垂直於工作區開口緩慢地移出。

6.在(zai)每(mei)次(ci)使(shi)用(yong)後(hou)，要(yao)清(qing)除(chu)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)內(nei)表(biao)麵(mian)的(de)汙(wu)染(ran)。工(gong)作(zuo)台(tai)麵(mian)和(he)內(nei)壁(bi)要(yao)用(yong)消(xiao)毒(du)劑(ji)進(jin)行(xing)擦(ca)拭(shi)
，所(suo)用(yong)的(de)消(xiao)毒(du)劑(ji)要(yao)能(neng)夠(gou)殺(sha)死(si)安(an)全(quan)櫃(gui)裏(li)的(de)任(ren)何(he)微(wei)生(sheng)物(wu)。在(zai)每(mei)天(tian)實(shi)驗(yan)結(jie)束(shu)時(shi)，應(ying)擦(ca)拭(shi)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)的(de)工(gong)作(zuo)台(tai)麵(mian)、四周以及玻璃的內外側等部位來清除表麵的汙染。在對目標生物體有效時，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑後，還必須用無菌水再次進行擦拭。

7.關閉前操作窗口並開啟紫外燈。

(四)生物安全櫃內溢灑的處理

處(chu)理(li)溢(yi)灑(sa)物(wu)時(shi)不(bu)要(yao)將(jiang)頭(tou)伸(shen)入(ru)安(an)全(quan)櫃(gui)內(nei)，也(ye)不(bu)要(yao)將(jiang)臉(lian)直(zhi)接(jie)麵(mian)對(dui)前(qian)操(cao)作(zuo)口(kou)，而(er)應(ying)處(chu)於(yu)前(qian)視(shi)麵(mian)板(ban)的(de)後(hou)方(fang)。選(xuan)擇(ze)消(xiao)毒(du)滅(mie)菌(jun)劑(ji)時(shi)需(xu)要(yao)考(kao)慮(lv)其(qi)對(dui)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)的(de)腐(fu)蝕(shi)性(xing)。

如果溢灑的量不足1 ml時，可直接用消毒滅菌劑浸濕的紙巾(或其他材料)擦拭。

如果溢灑量大或容器破損，建議按如下操作：使生物安全櫃保持開啟狀態
；在zai溢yi灑sa物wu上shang覆fu蓋gai浸jin有you消xiao毒du滅mie菌jun劑ji的de吸xi收shou材cai料liao
，作zuo用yong一yi定ding時shi間jian以yi發fa揮hui消xiao毒du滅mie菌jun作zuo用yong，必bi要yao時shi
，用yong消xiao毒du滅mie菌jun劑ji浸jin泡pao工gong作zuo表biao麵mian以yi及ji排pai水shui溝gou和he接jie液ye槽cao；在安全櫃內對所戴手套消毒滅菌後
，脫下手套
；如果防護服已被汙染
，脫掉所汙染的防護服後
，用適當的消毒滅菌劑清洗暴露部位；穿好適當的個體防護裝備
，如雙層手套
、防護服、護目鏡和呼吸保護裝置等；小心將吸收了溢灑物的紙巾(或其他吸收材料)連同溢灑物收集到專用的收集袋或容器中，並反複用新的紙巾(或其他吸收材料)將剩餘物質吸淨；破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理；用消毒滅菌劑擦拭或噴灑安全櫃內壁

、工作表麵以及前視窗的內側；作用一定時間後，用潔淨水擦幹淨消毒滅菌劑；如果需要浸泡接液槽，在清理接液槽前要先報告主管人員；可能需要用其他方式消毒滅菌後再進行清理。如果溢灑物流入生物安全櫃內部，需要評估後采取適用的措施。

(五)定期維護

1.每三個月更換一次預過濾器。

2.每年更換一次紫外燈。

3.有下列情況之一時
，應對生物安全櫃進行現場檢測：生物安全實驗室竣工後，投入使用前，生物安全櫃已安裝完畢；生物安全櫃被移動位置後；對生物安全櫃進行檢修後；生物安全櫃更換高效過濾器後；生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)一(yi)年(nian)一(yi)度(du)的(de)常(chang)規(gui)檢(jian)測(ce)。現(xian)場(chang)檢(jian)測(ce)應(ying)由(you)有(you)資(zi)質(zhi)的(de)專(zhuan)業(ye)人(ren)員(yuan)按(an)照(zhao)生(sheng)產(chan)商(shang)的(de)說(shuo)明(ming)對(dui)每(mei)一(yi)台(tai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)的(de)運(yun)行(xing)性(xing)能(neng)以(yi)及(ji)完(wan)整(zheng)性(xing)進(jin)行(xing)評(ping)估(gu)，以(yi)檢(jian)查(zha)其(qi)是(shi)否(fou)符(fu)合(he)國(guo)家(jia)標(biao)準(zhun)要(yao)求(qiu)。安(an)全(quan)櫃(gui)防(fang)護(hu)效(xiao)果(guo)的(de)評(ping)估(gu)應(ying)該(gai)包(bao)括(kuo)對(dui)安(an)全(quan)櫃(gui)的(de)完(wan)整(zheng)性(xing)
、HEPA過濾器的泄漏
、垂直氣流的速度、工作窗口氣流流向和平均風速
、負壓/換氣次數、氣流的煙霧模式以及警報和互鎖係統進行測試。還可以選擇進行漏電、光照度
、紫外強度、噪(zao)音(yin)水(shui)平(ping)以(yi)及(ji)振(zhen)動(dong)性(xing)測(ce)試(shi)。在(zai)進(jin)行(xing)這(zhe)些(xie)測(ce)試(shi)時(shi)

，檢(jian)測(ce)人(ren)員(yuan)要(yao)經(jing)過(guo)專(zhuan)門(men)的(de)培(pei)訓(xun)，采(cai)用(yong)專(zhuan)門(men)的(de)技(ji)術(shu)和(he)儀(yi)器(qi)設(she)備(bei)。強(qiang)烈(lie)建(jian)議(yi)由(you)有(you)資(zi)質(zhi)的(de)專(zhuan)業(ye)人(ren)員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)測(ce)試(shi)。

每周采用空氣落菌數相似的方法進行無菌檢查。

生物安全櫃在移動以及更換過濾器之前，必須清除汙染。最常用的方法是采用甲醛熏蒸,應該由有資質的專業人員來清除汙染。