在製備培養基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶
、培養皿
、shaobeihexiguandeng。zhexieqiminzaishiyongqiandouyaogenjubutongdeqingkuang，jingguoyidingdechuli
，xishuaganjing。youdehaiyaojinxingbaozhuang，jingguomiejundengzhunbeijiuxuhou
，cainengshiyong。

1、新購的玻璃器皿

除去包裝沾染的汙垢後
，先用熱肥皂水刷洗
，流水衝淨，再浸泡於１～２％的工業鹽酸中數小時，使遊離的堿性物質除去，再以流水衝淨。對容量較大的器皿

，如大燒瓶、liangtongdeng，xijinghouzhurunongyansuanshaoxu，zhuandongrongqishiqineibubiaomianjunzhanyouyansuan，shufenzhonghouqingquyansuan
，zaiyiliushuichongjing，daozhiyuxidijiashangjiangshuikonggan，jikeshiyong。

2
、用過的玻璃器皿

凡(fan)確(que)無(wu)病(bing)原(yuan)菌(jun)或(huo)未(wei)被(bei)帶(dai)菌(jun)物(wu)汙(wu)染(ran)的(de)器(qi)皿(min)，使(shi)用(yong)後(hou)可(ke)隨(sui)時(shi)衝(chong)洗(xi)

，吸(xi)取(qu)過(guo)化(hua)學(xue)試(shi)劑(ji)的(de)吸(xi)管(guan)，可(ke)先(xian)浸(jin)泡(pao)於(yu)清(qing)水(shui)中(zhong)
，待(dai)到(dao)一(yi)定(ding)數(shu)量(liang)後(hou)再(zai)集(ji)中(zhong)進(jin)行(xing)清(qing)洗(xi)。有(you)可(ke)能(neng)被(bei)病(bing)原(yuan)菌(jun)汙(wu)染(ran)的(de)器(qi)皿(min)
，必(bi)須(xu)經(jing)過(guo)適(shi)當(dang)消(xiao)毒(du)後(hou)，將(jiang)汙(wu)垢(gou)除(chu)去(qu)，用(yong)皂(zao)液(ye)洗(xi)刷(shua)

，再(zai)用(yong)流(liu)水(shui)衝(chong)洗(xi)幹(gan)淨(jing)。若(ruo)用(yong)皂(zao)液(ye)未(wei)能(neng)洗(xi)淨(jing)的(de)器(qi)皿(min)
，可(ke)用(yong)洗(xi)液(ye)浸(jin)泡(pao)適(shi)當(dang)時(shi)間(jian)後(hou)再(zai)用(yong)清(qing)水(shui)洗(xi)淨(jing)。洗(xi)液(ye)的(de)主(zhu)要(yao)成(cheng)份(fen)是(shi)重(zhong)鉻(ge)酸(suan)鉀(jia)和(he)濃(nong)流(liu)酸(suan)
，其(qi)作(zuo)用(yong)是(shi)將(jiang)有(you)機(ji)物(wu)氧(yang)化(hua)成(cheng)可(ke)溶(rong)性(xing)物(wu)質(zhi)，以(yi)便(bian)衝(chong)洗(xi)。洗(xi)液(ye)有(you)很(hen)強(qiang)的(de)腐(fu)蝕(shi)作(zuo)用(yong)，使(shi)用(yong)時(shi)應(ying)特(te)別(bie)小(xiao)心(xin)，避(bi)免(mian)濺(jian)到(dao)衣(yi)服(fu)、身體和其他物品上。

二
、培養基的類型

在實驗室中配製的適合微生物生長繁殖或累積代謝產物的任何營養基質，都叫做培養基(Media)。由you於yu各ge類lei微wei生sheng物wu對dui營ying養yang的de要yao求qiu不bu同tong
，培pei養yang目mu的de和he檢jian測ce需xu要yao不bu同tong，因yin而er培pei養yang基ji的de種zhong類lei很hen多duo。我wo們men可ke根gen據ju某mou種zhong標biao準zhun

，將jiang種zhong類lei繁fan多duo的de培pei養yang基ji劃hua分fen為wei若ruo幹gan類lei型xing。

1、根據對培養基組成物質的化學成分是否完全了解來區分
，可以將培養基分為天然培養基、合成培養基和半合成培養基。

１）天然培養基 天然培養基是指利用各種動、植物或微生物的原料，其成分難以確切知道。用作這種培養基的主要原料有：牛肉膏、麥芽汁
、蛋白腖、酵母膏、玉米粉

、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血(xue)清(qing)等(deng)。用(yong)這(zhe)些(xie)物(wu)質(zhi)配(pei)成(cheng)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)雖(sui)然(ran)不(bu)能(neng)確(que)切(qie)知(zhi)道(dao)它(ta)的(de)化(hua)學(xue)成(cheng)分(fen)，但(dan)一(yi)般(ban)來(lai)講(jiang)，營(ying)養(yang)是(shi)比(bi)較(jiao)豐(feng)富(fu)的(de)
，微(wei)生(sheng)物(wu)生(sheng)長(chang)旺(wang)盛(sheng)
，而(er)且(qie)來(lai)源(yuan)廣(guang)泛(fan)，配(pei)製(zhi)方(fang)便(bian)，所(suo)以(yi)較(jiao)為(wei)常(chang)用(yong)，尤(you)其(qi)適(shi)合(he)於(yu)配(pei)製(zhi)實(shi)驗(yan)室(shi)常(chang)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)。這(zhe)種(zhong)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)穩(wen)定(ding)性(xing)常(chang)受(shou)生(sheng)產(chan)廠(chang)或(huo)批(pi)號(hao)等(deng)因(yin)素(su)的(de)影(ying)響(xiang)。

２）合成培養基 合成培養基是一類化學成分和數量完全知道的培養基，它是用已知化學成分的化學藥品配製而成。這類培養基化學成分精確
、重複性強，但價格昂貴
，而微生物又生長緩慢，所以它隻適用於做一些科學研究
，例如營養、代謝的研究。

３）半合成培養基 在合成培養基中
，加入某種或幾種天然成分；或(huo)者(zhe)在(zai)天(tian)然(ran)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)，加(jia)入(ru)一(yi)種(zhong)或(huo)幾(ji)種(zhong)已(yi)知(zhi)成(cheng)分(fen)的(de)化(hua)學(xue)藥(yao)品(pin)即(ji)成(cheng)半(ban)合(he)成(cheng)培(pei)養(yang)基(ji)。例(li)如(ru)馬(ma)鈴(ling)薯(shu)蔗(zhe)糖(tang)培(pei)養(yang)基(ji)等(deng)。這(zhe)種(zhong)培(pei)養(yang)基(ji)在(zai)生(sheng)產(chan)實(shi)踐(jian)和(he)實(shi)驗(yan)室(shi)中(zhong)使(shi)用(yong)最(zui)多(duo)。

２、根據培養基的物理狀態來區分，可以分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。

１）液體培養基 所suo配pei製zhi的de培pei養yang基ji是shi液ye態tai的de
，其qi中zhong的de成cheng分fen基ji本ben上shang溶rong於yu水shui
，沒mei有you明ming顯xian的de固gu形xing物wu，液ye體ti培pei養yang基ji營ying養yang成cheng分fen分fen布bu均jun勻yun，易yi於yu控kong製zhi微wei生sheng物wu的de生sheng長chang代dai謝xie狀zhuang態tai。

２）固體培養基 在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、矽膠等，以瓊脂最為常用。固體培養基在實際中用得十分廣泛。在實驗室中，它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏
、生物測定等。

３）半固體培養基 如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中，就製成了半固體培養基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力，有時用來保藏菌種。

３、根據培養基的用途來區分，可分為選擇培養基、增殖培養基、鑒別培養基等。

１）選擇培養基 在培養基中加入某種物質以殺死或抑製不需要的菌種生長的培養基，稱之為選擇培養基。如鏈黴素、氯黴素等抑製原核微生物的生長；而製黴菌素、灰黃黴素等能抑製真核微生物的生長；結晶紫能抑製革蘭氏陽性細菌的生長等。

２）增殖培養基 zaiziranjiezhong，butongzhongdeweishengwuchangshenghuozaiyiqi
，weilefenliwomensuoxuyaodeweishengwu
，zaiputongpeiyangjizhongjiaruyixiemouzhongweishengwutebiexihuandeyingyangwuzhi，yizengjiazhezhongweishengwudefanzhisudu，zhujiantaotaiqitaweishengwu
，zhezhongpeiyangjichengweizengzhipeiyangji
，zhezhongpeiyangjichangyongyujunzhongshaixuanhexuanzezengjunzhong。zaimouzhongchengdushangjiang

，zengzhipeiyangjiyeshiyizhongxuanzepeiyangji。

３）鑒別培養基 在zai培pei養yang基ji中zhong加jia入ru某mou種zhong試shi劑ji或huo化hua學xue藥yao品pin，使shi難nan以yi區qu分fen的de微wei生sheng物wu經jing培pei養yang後hou呈cheng現xian出chu明ming顯xian差cha別bie
，因yin而er有you助zhu開kai快kuai速su鑒jian別bie某mou種zhong微wei生sheng物wu。這zhe樣yang的de培pei養yang基ji稱cheng之zhi為wei鑒jian別bie培pei養yang基ji。例li如ru用yong以yi檢jian查zha飲yin水shui和he乳ru品pin中zhong是shi否fou含han有you腸chang道dao致zhi病bing菌jun的de伊yi紅hong美mei藍lan培pei養yang基ji就jiu是shi一yi種zhong常chang用yong的de鑒jian別bie性xing培pei養yang基ji。

有些培養基是具有選擇和鑒別雙重作用。例如食品檢驗中常用的麥康凱培養基是一例。它含有膽鹽

、乳糖和中性紅。膽鹽具有抑製腸道菌以外的細菌的作用（選擇性），乳糖和中性紅（指示劑）能幫助區別乳糖發酵腸道菌（如大腸杆菌）和不能發酵乳糖的腸道致病菌（如沙門氏菌和誌賀氏菌）。

另外
，根據培養基的營養成分是否“完全”，可以分為基本培養基、wanquanpeiyangjihebuchongpeiyangji，zheleishuyuzhuyaoshiyongzaiweishengwuyichuanxuezhong。genjupeiyangjiyongyushengchandemudelaiqufen
，keyifenweizhongzipeiyangjihefajiaopeiyangji。haiyouzhuanmenyongyupeiyangbingdudengjishengweishengwudehuozuzhipeiyangji，rujipeideng；專門用於培養自養微生物的無機鹽培養基等。

三、培養基製備的基本方法和注意事項

１、培養基配方的選定

同tong一yi種zhong培pei養yang基ji的de配pei方fang在zai不bu同tong著zhu作zuo中zhong常chang會hui有you某mou些xie差cha別bie。因yin此ci，除chu所suo用yong的de是shi標biao準zhun方fang法fa
，應ying嚴yan格ge按an其qi規gui定ding進jin行xing配pei製zhi外wai
，一yi般ban均jun應ying盡jin量liang收shou集ji有you關guan資zi料liao
，加jia以yi比bi較jiao核he對dui，再zai依yi據ju自zi己ji的de使shi用yong目mu的de，加jia以yi選xuan用yong，記ji錄lu其qi來lai源yuan。

２、培養基的製備記錄

每次製備培養基均應有記錄
，包括培養基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，最終pH值、消毒的溫度和時間製備的日期和製備者等，記錄應複製一份，原記錄保存備查，複製記錄隨製好的培養基一同存放
、以防發生混亂。

３

、培養基成分的稱取

培pei養yang基ji的de各ge種zhong成cheng分fen必bi須xu精jing確que稱cheng取qu並bing要yao注zhu意yi防fang止zhi錯cuo亂luan，最zui好hao一yi次ci完wan成cheng，不bu要yao中zhong斷duan。可ke將jiang配pei方fang置zhi於yu傍bang側ce，每mei稱cheng完wan一yi種zhong成cheng分fen即ji在zai配pei方fang麵mian軍jun做zuo出chu記ji號hao，並bing將jiang所suo需xu稱cheng取qu的de藥yao品pin一yi次ci取qu齊qi，置zhi於yu左zuo側ce，每mei種zhong稱cheng取qu完wan畢bi後hou
，即ji移yi放fang於yu右you側ce。完wan全quan稱cheng取qu完wan畢bi後hou

，還hai應ying進jin行xing一yi次ci檢jian查zha。

４
、培養基各成份的混合和溶化

培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋
，以防有微量銅或鐵混入培養基中
，使細菌不易生長。最好使用不鏽鋼鍋加熱溶化，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時

、可先用溫水加熱並隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該gai培pei養yang基ji即ji不bu能neng使shi用yong
，應ying重zhong新xin製zhi備bei。待dai大da部bu分fen固gu體ti成cheng分fen溶rong化hua後hou，再zai用yong較jiao小xiao火huo力li使shi所suo有you成cheng分fen完wan全quan溶rong化hua，迄qi至zhi煮zhu沸fei。如ru為wei瓊qiong脂zhi溶rong化hua

，用yong另ling一yi部bu分fen水shui溶rong化hua其qi它ta成cheng分fen，然ran後hou將jiang兩liang溶rong液ye充chong分fen混hun合he。在zai加jia熱re溶rong化hua過guo程cheng中zhong，因yin蒸zheng發fa而er丟diu失shi的de水shui分fen，最後必須加以補足。

５、培養基pH的初步調正

因培養基在加熱消毒過程中
、pH會有所變化
，培養基各成分完全溶解後
，應進行PH的初步調正。例如
，牛肉浸液約可降低pH0.2
，而腸浸液pH卻會有顯著的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的最終PH，保證培養基的質量。PH調整後
，還應將培養基煮沸數分鍾，以利培養基沉澱物的析出。

６
、培養基的過濾澄清

液ye體ti培pei養yang基ji必bi須xu絕jue對dui澄cheng清qing，瓊qiong脂zhi培pei養yang基ji也ye應ying透tou明ming無wu顯xian著zhu沉chen澱dian，因yin此ci
，須xu要yao采cai用yong過guo濾lv或huo其qi它ta澄cheng清qing方fang法fa以yi達da到dao此ci項xiang要yao求qiu。一yi般ban液ye體ti培pei養yang基ji可ke用yong濾lv紙zhi過guo濾lv法fa，濾lv紙zhi應ying折zhe疊die成cheng折zhe扇shan或huo漏lou鬥dou形xing，以yi避bi免mian因yin液ye壓ya不bu均jun勻yun而er引yin起qi濾lv紙zhi破po裂lie。

瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新製肉、肝

、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去，再用濾紙反複過濾。如過濾法不能達到澄清要求
、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55~60°C的培養基放入大的三角燒瓶內，裝入量不得超過燒瓶容量的1/2，每1000ml培養基加入1~2個雞蛋的蛋白，強力振搖3~5分鍾
，置高壓蒸汽滅菌器中
、121°C加熱20分鍾、取出趁熱以絨布過濾即可。

７、培養基的分裝

培養基的分裝，應按使用的目的和要求，分裝於試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵，其外還須用防水紙包紮（現試管一般多有用螺旋蓋者）。分裝時最好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜麵培養基時，分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜麵的量為洽當。分裝容器應預先清洗幹淨並經幹烤消毒
，以利於培養基的徹底滅菌。每批培養基應另外分裝20ml培養基於一小玻璃瓶中，隨該批培養基同時滅菌，以為測定該批培養基最終pH之用。

８
、培養基的滅菌

一般培養基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鍾的方法。在各種培養基製備方法中，如無特殊規定，即可用此法滅菌。

某些畏熱成分
，如糖類，應另行配成20%或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒，以後再用無菌操作技術
、定量加於培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應以無菌操作技術抽取和加入於經冷卻約50°C左右的培養基中。

瓊脂斜麵培養基應在滅菌後立即取出，冷至55℃-60℃時

，擺置成適當斜麵
，待其自然凝固。

９

、培養基的質量測試

每批培養基製備好以後，應仔細檢查一遍，如發現破裂

、水分浸入、色澤異常


、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。並測定其最終pH。

將全部培養基放入36±1°C恒溫箱培養過夜
，如發現有菌生長
，即棄去。

用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基，培養24~48小時，如無菌生長或生長不好。應追查原因並重複接種一次，如結果仍同前，則該批培養基即應棄去，不能使用。

10
、培養基的保存

培養基應存放於冷暗處，最好能放於普通冰箱內。放置時間不宜超過一周，傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基製備記錄副頁或明顯標簽。