（1）在肉膏蛋白腖斜麵試管上，用記號筆寫上將接種的菌名、日期和接種者。

（2）點燃酒精燈或煤氣燈。

（3）將菌種試管和待接種的斜麵試管，用大拇指和食指
、中指、無名指握在左手中，並將中指夾在兩試管之間
，使斜麵向上，成水平狀態
，。在火焰邊用右手鬆動試管塞
，以利於接種時拔出。

（4）右手拿接種環通過火焰燒灼滅菌（參照實驗一），在火焰邊用右手的手掌邊緣和小指，小指和無名指分別夾持棉塞（或試管帽）
，將其取出，並迅速燒灼管口。

（5）jiangmiejundejiezhonghuanshenrujunzhongshiguannei


，xianjianghuanjiechushiguanneibihuoweichangjundepeiyangji
，dadaolengquedemude，ranhouzaitiaoqushaoxujuntai。jiangjiezhonghuantuichujunzhongshiguan，xunsushenrudaijiezhongdexiemianshiguan，yonghuanzaixiemianshangzishiguandibuxiangshangduanqingqingdihuazhixian

，wujiangpeiyangjihuapo，yebuyaoshihuanjiechuguanbihuoguankou。

（6）jiezhonghuantuichuxiemianshiguan，zaiyonghuoyanshaoguankou，bingzaihuoyanbianjiangshiguansaisaishang。jiangjiezhonghuanzhujianjiejinhuoyan，zaishaozhuo。ruguojiezhonghuanshangzhandejuntijiaoduoshi，yingxianjianghuanzaihuoyanbiankaogan，ranhoushaozhuo
，yimianweishaosidejunzhongfeijianchuwuranhuanjing，jiezhongbingyuanjunshigengyaozhuyicidian。

二
、液體培養基接種

向(xiang)肉(rou)膏(gao)蛋(dan)白(bai)腖(dong)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)接(jie)種(zhong)少(shao)量(liang)菌(jun)體(ti)時(shi)，其(qi)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)基(ji)本(ben)與(yu)斜(xie)麵(mian)接(jie)種(zhong)時(shi)相(xiang)同(tong)
，不(bu)同(tong)之(zhi)處(chu)是(shi)挑(tiao)取(qu)菌(jun)體(ti)的(de)接(jie)種(zhong)環(huan)放(fang)入(ru)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)
，應(ying)在(zai)液(ye)體(ti)表(biao)麵(mian)處(chu)的(de)管(guan)內(nei)壁(bi)上(shang)輕(qing)輕(qing)磨(mo)擦(ca)
，使(shi)菌(jun)體(ti)從(cong)環(huan)上(shang)脫(tuo)落(luo)，混(hun)進(jin)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)，塞(sai)好(hao)試(shi)管(guan)塞(sai)後(hou)
，搖(yao)動(dong)液(ye)體(ti)，使(shi)菌(jun)體(ti)在(zai)液(ye)體(ti)中(zhong)分(fen)布(bu)均(jun)勻(yun)，或(huo)用(yong)試(shi)管(guan)振(zhen)蕩(dang)器(qi)混(hun)勻(yun)。

向xiang液ye體ti培pei養yang基ji中zhong接jie種zhong量liang大da或huo要yao求qiu定ding量liang接jie種zhong時shi，可ke將jiang無wu菌jun水shui或huo液ye體ti培pei養yang基ji注zhu入ru菌jun種zhong試shi管guan
，用yong接jie種zhong環huan將jiang菌jun苔tai刮gua下xia
，再zai將jiang菌jun種zhong懸xuan液ye以yi無wu菌jun吸xi管guan定ding量liang吸xi出chu加jia入ru
，或huo直zhi接jie倒dao入ru液ye體ti培pei養yang基ji。如ru果guo菌jun種zhong為wei液ye體ti培pei養yang物wu
，則ze可ke用yong無wu菌jun吸xi管guan定ding量liang吸xi出chu加jia入ru或huo直zhi接jie倒dao入ru液ye體ti培pei養yang基ji。整zheng個ge接jie種zhong過guo程cheng都dou要yao求qiu無wu菌jun操cao作zuo。

三、穿刺接種

用接種針挑取菌種（針必須挺直）
，自培養基的中心垂直地刺入半固體培養基中，直至接近管底
，但不要穿透


，然後沿原穿刺線將針拔出
，塞上試管塞，燒灼接種針。

上述幾種接種法的無菌操作
，凡未敘述的均按實驗一操作。試驗者應反複練習無菌操作接種技術
，直至較熟練地掌握。

四、將已接種的斜麵、液體和半固體培養基放置28—30℃溫箱
，培養2—3天後取出觀察結果。