學習生殖細胞的取材和染色體製片,認識減數分裂各時期的形態特征。
二、原理 生物秀細胞實驗論壇交流
jianshufenlieshixingchengshengzhixibaodeyizhongteshufangshidexibaofenlie。tashiyichuanxuezhongyigetebiezhongyaodeshijian,shiweichidaduoshudongzhiwupinzhongransetishumushidaiwendingchuandidegenbenjizhi。tongshi,jiyindefenli、自(zi)由(you)組(zu)合(he)以(yi)及(ji)交(jiao)換(huan)無(wu)不(bu)是(shi)通(tong)過(guo)減(jian)數(shu)分(fen)裂(lie)發(fa)生(sheng)的(de)。可(ke)以(yi)說(shuo)減(jian)數(shu)分(fen)裂(lie)是(shi)經(jing)典(dian)遺(yi)傳(chuan)學(xue)的(de)根(gen)本(ben),動(dong)植(zhi)物(wu)都(dou)是(shi)通(tong)過(guo)減(jian)數(shu)分(fen)裂(lie)形(xing)成(cheng)配(pei)子(zi),所(suo)以(yi)減(jian)數(shu)分(fen)裂(lie)通(tong)常(chang)以(yi)植(zhi)物(wu)的(de)花(hua)粉(fen)母(mu)細(xi)胞(bao)或(huo)動(dong)物(wu)的(de)精(jing)巢(chao)、卵巢作材料進行觀察。減數分裂的特點是:連續進行兩次核分裂,而染色體僅複製一次,從而形成四個隻含單倍數染色體的產物——生殖細胞(或配子)。
三、材料
1. 小麥雄花序。
2. 蝗蟲精巢。
四、器具和試劑
鑷子、解剖刀、解剖針、載玻片、蓋玻片、酒精燈、吸水紙、滴瓶、皮頭鉛筆、火柴、顯徽鏡。
卡諾氏固定液,改良苯酚品紅、70%酒精。
五、步驟 生物秀細胞實驗論壇交流
(一)小麥花粉母細胞塗片觀察
1. 取材和固定:當小麥植株開始挑旗,旗葉與下一葉片的葉耳間距約3~5cm,花藥長度約2.0~2.5mm,氣溫在23℃~25℃時,將穗子剝出,在卡諾氏固定液中固定24小時。如暫不製片可轉入70%酒精中,4℃保存。
2. 大鼠細胞染色和壓片:從(cong)穗(sui)中(zhong)部(bu)小(xiao)穗(sui)中(zhong)取(qu)出(chu)花(hua)藥(yao)若(ruo)幹(gan)置(zhi)於(yu)載(zai)片(pian)上(shang),切(qie)去(qu)花(hua)藥(yao)端(duan)部(bu),滴(di)兩(liang)滴(di)改(gai)良(liang)苯(ben)酚(fen)品(pin)紅(hong),用(yong)攝(she)子(zi)擠(ji)壓(ya)花(hua)藥(yao),使(shi)內(nei)含(han)物(wu)全(quan)部(bu)擠(ji)出(chu),除(chu)去(qu)藥(yao)壁(bi),將(jiang)擠(ji)出(chu)的(de)細(xi)胞(bao)輕(qing)輕(qing)敲(qiao)打(da);如ru果guo花hua藥yao較jiao小xiao,也ye可ke滴di兩liang滴di染ran液ye後hou用yong鑷nie子zi直zhi接jie將jiang花hua藥yao搗dao碎sui,去qu除chu未wei碎sui的de組zu織zhi,然ran後hou蓋gai上shang蓋gai玻bo片pian,在zai酒jiu精jing燈deng上shang微wei微wei加jia熱re。用yong左zuo手shou拇mu指zhi及ji食shi指zhi固gu定ding蓋gai片pian與yu載zai片pian,勿wu使shi其qi移yi動dong。右you手shou拇mu指zhi用yong力li壓ya蓋gai玻bo片pian,使shi細xi胞bao伸shen展zhan開kai。
3. 鏡檢:由於小麥小穗發育是以中部小穗最先發育,然後依次向上、下xia推tui移yi,所suo以yi在zai一yi個ge穗sui子zi上shang往wang往wang能neng找zhao到dao減jian數shu分fen裂lie的de若ruo幹gan時shi期qi。如ru果guo中zhong部bu花hua藥yao尚shang未wei進jin入ru減jian數shu分fen裂lie時shi期qi則ze需xu要yao另ling選xuan一yi個ge更geng大da的de穩wen於yu取qu花hua藥yao製zhi片pian。
(二)蝗蟲精巢精母細胞製片觀察
1. 取材和固定:捕捉進入繁殖期的雄性蝗蟲,剪開胸腹部體壁,放入卡諾氏固定液中固定24小時,暫不製片時,可重複固定一次,轉入70%酒精中4℃保存。
2. 製片:取(qu)蟲(chong)體(ti)剪(jian)去(qu)翅(chi)膀(pang),在(zai)翅(chi)的(de)基(ji)部(bu)後(hou)方(fang),相(xiang)當(dang)於(yu)腹(fu)部(bu)前(qian)端(duan)的(de)背(bei)側(ce),仔(zai)細(xi)剪(jian)幹(gan)體(ti)壁(bi),從(cong)精(jing)巢(chao)中(zhong)前(qian)部(bu)取(qu)幾(ji)段(duan)精(jing)細(xi)管(guan)放(fang)在(zai)載(zai)片(pian)上(shang),用(yong)解(jie)剖(pou)針(zhen)撕(si)碎(sui)精(jing)細(xi)管(guan),除(chu)去(qu)大(da)塊(kuai)管(guan)壁(bi)組(zu)織(zhi),塗(tu)勻(yun)。
3. 染色觀察:加改良苯酚品紅3~5滴,染色10分鍾(必要時可在酒精燈上快速掠幾下)加上蓋片和吸水紙,以指壓法壓片。
光鏡下,可以看到減數分裂的各個時期,以及精子的形成過程。
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