固定方法有物理固定和化學固定兩類，物理固定可采用空氣幹燥（血塗片）、驟冷（在液氮中迅速冷凍）或微波固定等；化學固定有浸潤法（immersion method）和灌流法（perfusion method）。灌流法適用於動物實驗中對缺氧敏感的器官，如神經係統和胃腸等取材。

 

一
、浸潤法

 

浸潤法是組織化學和免疫 組織化學常用的固定方法，一次要處理許多組織樣品時也多用此法。

 

預yu先xian需xu估gu計ji固gu定ding劑ji的de用yong量liang，並bing在zai取qu材cai前qian配pei好hao固gu定ding液ye，分fen裝zhuang於yu小xiao容rong器qi內nei，在zai容rong器qi上shang標biao記ji組zu別bie和he取qu材cai時shi間jian。容rong器qi內nei放fang人ren記ji錄lu組zu織zhi類lei型xing的de紙zhi條tiao，以yi便bian包bao埋mai時shi辨bian認ren。固gu定ding液ye的de用yong量liang應ying是shi樣yang品pin的de40倍
，以保證組織充分固定。固定時間可根據所選固定液和組織類型而定。

 

若進行酶組織化學染色，應在4℃短時間固定，固定時間長會導致酶活性減弱，甚至消失。

 

二
、灌流固定法

 

此ci法fa是shi經jing血xue管guan途tu徑jing，將jiang固gu定ding液ye灌guan注zhu到dao欲yu固gu定ding的de器qi官guan內nei
，使shi生sheng活huo的de細xi胞bao在zai原yuan位wei及ji時shi迅xun速su固gu定ding
，取qu下xia組zu織zhi之zhi後hou再zai浸jin入ru相xiang同tong的de固gu定ding液ye內nei繼ji續xu固gu定ding。

 

guanliugudingshidadongwuduocaiyongshuyefangshi
，jianggudingyecongyicejingzongdongmaihuogudongmaishuru，conglingyiceqiekaijingmaifangxue
，shurugudingyeyufangxuetongshijinxing。gudingyedeshurenliangyingetibutongeryi，ji500―2000ml不等。

 

小動物多采用心髒主動脈灌流，如大鼠和小鼠，在吸人 shendumazuiqingkuangxia，dakaixiongqiang，zongxiangqiekaixinbaomo，bingyongshaxianzaidongmaigongxiadayisongjie，ranhouyongjingmaishuyezhencongzuoxinshixiangzhudongmaifangxiangciren，zhenjiancirenhou
，suijijiangshaxianzhajinguding，wushiqiyidong

，zaijiangyouxinerjiankaifangxue。zaiguanzhugudingyeqian，xianyonghankangningjide37℃生理鹽水灌流
，衝洗血管內的血液，防止血液凝固阻塞血管。抗凝劑常用肝素，劑量為40mg/L衝洗液。肝髒顏色由鮮紅變為淺白色時，即可灌流固定液，灌注速度為5～10ml/min，應在30分鍾內結束灌注並取材，而後將組織浸入相同的固定液中1～3小時。灌流固定對組織結構和酶活性保存較好。