取(qu)材(cai)是(shi)製(zhi)作(zuo)切(qie)片(pian)程(cheng)序(xu)中(zhong)的(de)首(shou)要(yao)步(bu)驟(zhou)，取(qu)材(cai)不(bu)當(dang)
，將(jiang)直(zhi)接(jie)影(ying)響(xiang)病(bing)理(li)診(zhen)斷(duan)和(he)科(ke)研(yan)工(gong)作(zuo)的(de)效(xiao)果(guo)。組(zu)織(zhi)標(biao)本(ben)的(de)選(xuan)用(yong)非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao)，不(bu)能(neng)隨(sui)意(yi)的(de)切(qie)取(qu)組(zu)織(zhi)來(lai)製(zhi)作(zuo)組(zu)織(zhi)切(qie)片(pian)，否(fou)則(ze)病(bing)理(li)檢(jian)驗(yan)的(de)結(jie)果(guo)是(shi)不(bu)會(hui)令(ling)人(ren)滿(man)意(yi)的(de)。
一、取材工具：取qu材cai刀dao具ju必bi須xu鋒feng利li。切qie取qu標biao本ben不bu應ying該gai擠ji壓ya和he揉rou擦ca，不bu應ying使shi用yong有you鉤gou鑷nie子zi或huo血xue管guan鉗qian等deng手shou術shu器qi械xie鑷nie取qu標biao本ben，以yi免mian損sun害hai組zu織zhi造zao成cheng人ren為wei組zu織zhi變bian化hua，給gei診zhen斷duan帶dai來lai困kun難nan或huo導dao致zhi錯cuo診zhen，漏lou診zhen。
二、標本的選取：應(ying)選(xuan)擇(ze)病(bing)變(bian)或(huo)可(ke)疑(yi)病(bing)變(bian)的(de)組(zu)織(zhi)。必(bi)要(yao)時(shi)選(xuan)取(qu)病(bing)變(bian)與(yu)正(zheng)常(chang)組(zu)織(zhi)交(jiao)界(jie)處(chu)。切(qie)取(qu)標(biao)本(ben)的(de)原(yuan)則(ze)是(shi)求(qiu)準(zhun)而(er)不(bu)是(shi)求(qiu)量(liang)多(duo)，所(suo)以(yi)切(qie)取(qu)組(zu)織(zhi)宜(yi)小(xiao)不(bu)宜(yi)大(da)，以(yi)不(bu)超(chao)過(guo)24x24mm2為佳，厚度以3—5mm為度，過大過厚會影響對標本的固定

，另方麵也影響切片的製作。特殊目的者應屬例外。
1.了使組織切片的結構清楚，取材要及時，組織塊必須爭取時間及時固定。組織的固定以愈新鮮愈好。
2.取材時對大體標本（肉眼標本）繪製圖象，進行仔細描述。包括形狀、大小，硬度，顏色，病灶（或可疑病變）部位等。對所取的組織應定位編號。
3.切取各組織塊時，切勿擠壓損傷，對典型或具有教學和科研價值的肉眼標本，
不能因取材而對標本造成人為的“病變”。腸粘膜組織上沾有少量糞便，也不應以手拭去或以水洗去。
4.下的組織塊應盡量防止其彎曲扭轉，如胃腸等組織
，應先平展於草紙上粘著以後
，慢慢地放入固定液中（故應在動手剖驗之前做好準備工作）。固定液的量要充足，應為固定組織的10倍。
5.zuzhicaiquyingzaizhengchangyubingzaojiaojiezhichu。zuzhixingzhuangzuihaoweifangxinghuochangfangxingzhuang
，zheyangyouliyuzhipian。qiebukeyixingzhuangdingwei，zuzhihouboyaojunyun。yinweizuzhikuaidehoudujuedinggudingdesudu，yaochongfenmanzutazaiyidingshijianneiquanbudadaoshiyideguding。ruzuzhihoubobujun，zaituoshuishijianghuiyinqibiaobenbianxinghuo 曲，而影響製片。在典型病變部位不妨多切數塊
，以備日後添製教學切片或研究的需要。
6.微量標本和易碎標本
，為避免破損或丟失應以紗布包裹，但包裹前紗布必須浸濕
，以免標本粘附紗布上。
7.各組織塊應包括各髒器的重要結構
，如腎髒組織包括皮質部分和髓質部分。在有漿膜的髒器（如胃等）組織塊中，要至少有一塊帶有漿膜。
8.組織內的鈣化病灶或骨質，應在充分固定之後進行脫鈣，組織內的非病理性異物應予剔除。
9. 標本上（組織塊）附著的軟組織如脂肪等
，如屬非病變成分
，則應在不影響病理診斷的原則下
，盡量剝去或切除
，以利製片。
10.組織塊的固定時間不宜過長或過短，不同的固定液
，固定時間有所不同，固定後的組織需要用流水衝洗，再進行脫水製片。
11.切取鏡檢組織塊後，可將剩餘的組織放入70%灑精中保存
，這樣有利於日後再取材切片時的細胞染色。

組織的固定 

一
、固定的意義
gudingshizhijianggezhongzuzhijinrufangfujinei，shixibaoneidewuzhiweiburongxing。gudingdezuoyongjishiyongyizhongfangfajiangzuzhijinkenengbaochizaitayuanlaidexingtai，qienengshiyumouxieyanjiuchengxu。
凡(fan)是(shi)需(xu)要(yao)製(zhi)作(zuo)作(zuo)病(bing)理(li)檢(jian)驗(yan)標(biao)本(ben)的(de)各(ge)種(zhong)組(zu)織(zhi)，無(wu)論(lun)是(shi)製(zhi)作(zuo)切(qie)片(pian)標(biao)本(ben)，還(hai)是(shi)製(zhi)作(zuo)巨(ju)體(ti)標(biao)本(ben)，首(shou)先(xian)必(bi)須(xu)固(gu)定(ding)。在(zai)製(zhi)作(zuo)切(qie)片(pian)過(guo)程(cheng)中(zhong)

，固(gu)定(ding)最(zui)為(wei)重(zhong)要(yao)的(de)步(bu)驟(zhou)
，一(yi)張(zhang)優(you)秀(xiu)的(de)組(zu)織(zhi)學(xue)切(qie)片(pian)是(shi)建(jian)立(li)在(zai)適(shi)當(dang)而(er)完(wan)全(quan)的(de)固(gu)定(ding)基(ji)礎(chu)之(zhi)上(shang)的(de)。固(gu)定(ding)不(bu)良(liang)在(zai)以(yi)後(hou)製(zhi)片(pian)的(de)任(ren)何(he)階(jie)段(duan)皆(jie)不(bu)能(neng)補(bu)救(jiu)。因(yin)此(ci)製(zhi)片(pian)的(de)優(you)劣(lie)首(shou)先(xian)取(qu)決(jue)於(yu)最(zui)初(chu)固(gu)定(ding)適(shi)當(dang)與(yu)否(fou)。
重zhong要yao的de是shi，被bei固gu定ding組zu織zhi在zai動dong物wu死si後hou或huo從cong活huo體ti切qie取qu後hou要yao盡jin可ke能neng立li即ji固gu定ding。及ji時shi的de取qu材cai給gei迅xun速su固gu定ding提ti供gong了le先xian決jue條tiao件jian。如ru果guo不bu迅xun速su固gu定ding，造zao成cheng固gu定ding不bu良liang，將jiang導dao致zhi染ran色se不bu良liang後hou果guo。組zu織zhi的de良liang好hao固gu定ding，應ying該gai是shi一yi次ci性xing的de
；某些固定劑還具有助染的作用，可使細胞各部易於著色。固定不良的組織，即使進行補充固定也起不到改善染色的效果。

二、固定的目的和效果
固定組織的目的是設法得到接近正常生命狀態的細胞結構，有人說“形態學的美是良好固定產物”，這說明固定的特殊重要作用。
1、抑製自溶和腐敗：
組織的固定能保持細胞與生活時的形態相似。因為當機體生命活動停止
、或局部器官、組(zu)織(zhi)割(ge)離(li)機(ji)體(ti)之(zhi)後(hou)
，組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)的(de)代(dai)謝(xie)功(gong)能(neng)即(ji)行(xing)喪(sang)失(shi)
，新(xin)鮮(xian)組(zu)織(zhi)如(ru)果(guo)不(bu)經(jing)固(gu)定(ding)

，任(ren)意(yi)放(fang)置(zhi)，由(you)於(yu)細(xi)胞(bao)內(nei)酶(mei)對(dui)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)分(fen)解(jie)，以(yi)及(ji)細(xi)胞(bao)的(de)孳(zi)生(sheng)等(deng)各(ge)種(zhong)因(yin)素(su)的(de)作(zuo)用(yong)
，則(ze)易(yi)因(yin)細(xi)胞(bao)繁(fan)殖(zhi)而(er)致(zhi)組(zu)織(zhi)腐(fu)爛(lan)。細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)分(fen)解(jie)酶(mei)將(jiang)蛋(dan)白(bai)質(zhi)分(fen)解(jie)為(wei)氨(an)基(ji)酸(suan)後(hou)脫(tuo)離(li)細(xi)胞(bao)而(er)引(yin)起(qi)組(zu)織(zhi)的(de)自(zi)溶(rong)。
2、保存：
細胞經過固定
，不但可以防止自溶和細菌性腐敗，而且能沉澱或凝固組織內的各種成份和病理代謝產物，如蛋白質，脂及脂蛋白、脂肪、糖類、色素，其它碳水化合物，無機成份，微生物等都可以經過固定而保存下來，並在製片過程中不為其他試劑 溶解破壞。
3、硬化：
固定劑的硬化作用能使柔軟組織（如腦）的質地變硬而易於操作。
4、膠質物體的固化：
固定能使細胞正常的半液體狀（溶膠）變為不能逆轉的固體狀（凝膠）粘度。
5
、肉眼鑒別：
固定可將各種細胞和組織成分的析光率作不同程度的改變，增強組織的析光指數，這樣能使各種染色成份較之未固定時更容易辨認。
6、對染色的影響：
某些固定劑尚具有一定的媒染作用而增進染色（如苦味酸對於染色的媒染作用）可ke使shi細xi胞bao各ge種zhong部bu位wei易yi於yu著zhe色se
，所suo以yi組zu織zhi固gu定ding後hou有you利li於yu製zhi片pian染ran色se和he在zai顯xian微wei鏡jing下xia的de觀guan察cha。此ci外wai
，固gu定ding劑ji有you時shi也ye會hui影ying響xiang染ran色se效xiao果guo，導dao致zhi著zhe色se效xiao果guo不bu理li想xiang（如福爾馬林對水溶猩紅S染色的影響）。
7、滲透和固定：
固定還可以使組織和細胞的各種滲透壓不再發生改變，在製片時就能在最大範圍內保持組織和細胞的原來形態。
三、固定的方法及注意事項：
為使組織固定充分，應做到固定容器要合適、固定時間要充足，固定液量要足夠。
固定組織時，應選擇合適的容器
、一般容器的容積是組織的10~15倍(bei)以(yi)上(shang)。標(biao)本(ben)瓶(ping)應(ying)選(xuan)擇(ze)瓶(ping)口(kou)較(jiao)大(da)的(de)為(wei)宜(yi)

，這(zhe)樣(yang)便(bian)於(yu)固(gu)定(ding)後(hou)的(de)標(biao)本(ben)經(jing)小(xiao)口(kou)瓶(ping)硬(ying)塞(sai)進(jin)去(qu)
，這(zhe)樣(yang)不(bu)僅(jin)不(bu)利(li)於(yu)標(biao)本(ben)易(yi)於(yu)取(qu)出(chu)，還(hai)可(ke)能(neng)造(zao)成(cheng)人(ren)為(wei)擠(ji)壓(ya)組(zu)織(zhi)而(er)致(zhi)形(xing)態(tai)變(bian)化(hua)，對(dui)大(da)件(jian)的(de)標(biao)本(ben)應(ying)按(an)巨(ju)檢(jian)常(chang)規(gui)切(qie)片(pian)後(hou)放(fang)於(yu)容(rong)器(qi)固(gu)定(ding)。
組織固定的時間要足夠
，根據標本體積大小不同
，固定時間應有所不同
，組織越大越厚
，固定時間應越長
，反之。一般4—12小時或更長。在溫箱內將固定液稍加溫
，可使固定作用加快而縮短固定時間。
固定組織時，應該使用足量的固定液
，多比少好，一般應為組織體積的5—10bei，zuishaoyebuyingyuwubei。biaobenzuihaoxuanfuyugudingyezhizhong，piaofuyugudingyezhishanghuochenyugudingyongqizhidibu，doubuliyugudingyeduibiaobendeshenru。rubiaobenkuaiduoshi，gudingshibuyingzhongdie。buyaoxianjiangbiaobenkuaifangrurongqihouzaizhurugudingye

，yimianbiaobentiefuyuqimin，xingchenggudingbujunyunzhibi。xinxianbiaobenyingjishiguding，fouzehuoyinzuzhichenjiu，huoyingudingbudang，ershizuzhiyuanyoujiegouxiaoshieryingxiangguancha。
標本經固定後，應及時製作切片，如不能及時製片，而該固定液又不能作為保存液時，應改換適當的保存液。
在配製混合液時，應了解每種固定劑的理化性質
，氧化劑不能與還原劑混合，以免引起化學反應，失去固定作用。
對(dui)於(yu)某(mou)些(xie)需(xu)要(yao)製(zhi)作(zuo)神(shen)經(jing)染(ran)色(se)和(he)酶(mei)反(fan)應(ying)等(deng)組(zu)織(zhi)的(de)固(gu)定(ding)，要(yao)求(qiu)較(jiao)一(yi)般(ban)嚴(yan)格(ge)，組(zu)織(zhi)的(de)大(da)小(xiao)，固(gu)定(ding)的(de)時(shi)間(jian)，溫(wen)度(du)的(de)適(shi)當(dang)都(dou)應(ying)慎(shen)重(zhong)考(kao)慮(lv)，尤(you)其(qi)是(shi)對(dui)於(yu)酶(mei)反(fan)應(ying)的(de)固(gu)定(ding)液(ye)，一(yi)般(ban)都(dou)要(yao)置(zhi)於(yu)冰(bing)箱(xiang)
，在(zai)低(di)溫(wen)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)固(gu)定(ding)。固(gu)定(ding)不(bu)好(hao)，是(shi)得(de)不(bu)到(dao)滿(man)意(yi)的(de)切(qie)片(pian)和(he)合(he)乎(hu)標(biao)準(zhun)的(de)反(fan)應(ying)效(xiao)果(guo)的(de)。
任何固定液對人體都有損害作用
，因此固定液的容器必須密閉，以防揮發損傷器官和眼睛
，忌用手與固定劑直接接觸，以免損傷皮膚。

四
、固定劑的選擇
理想的固定劑應該具備下列幾種性能：
1、滲透性強：固定劑必須能迅速滲入組織，這樣組織內各種成分才能盡快地被固定在原位置，而不致彌散。
2、組zu織zhi在zai固gu定ding液ye的de作zuo用yong下xia，不bu應ying發fa生sheng顯xian著zhu的de收shou縮suo和he膨peng脹zhang現xian象xiang。實shi際ji上shang經jing過guo固gu定ding後hou的de組zu織zhi，由you於yu蛋dan白bai質zhi發fa生sheng凝ning固gu或huo沉chen澱dian，必bi然ran導dao致zhi組zu織zhi出chu現xian不bu同tong程cheng度du的de收shou縮suo或huo膨peng脹zhang。因yin此ci，良liang好hao的de固gu定ding劑ji應ying盡jin量liang減jian少shao組zu織zhi發fa生sheng這zhe類lei變bian化hua。
3、固定劑應該有利組織切片和染色
，這其中含有兩種意義

；
（1）固定劑對固定後的組織應有利於染色劑的染色。例如：重鉻酸鉀對於類脂質具有一定媒染作用；中性福爾馬林比一般福爾馬林所固定組織更優於核的染色。
(2)固定劑能將組織或細胞中某些必須觀察的成分予充分固定而保存下來，以便染色。例如：酸suan可ke以yi滲shen入ru脂zhi類lei物wu質zhi使shi其qi固gu定ding下xia來lai而er不bu至zhi在zai製zhi片pian過guo程cheng中zhong為wei酒jiu精jing和he二er甲jia苯ben溶rong解jie或huo較jiao少shao地di溶rong解jie，並bing可ke用yong石shi蠟la包bao埋mai進jin行xing切qie片pian。糖tang原yuan的de證zheng明ming，則ze宜yi使shi用yong非fei水shui溶rong性xing固gu定ding劑ji如ru無wu水shui酒jiu精jing、Camoy氏固定液等。
4
、固定液應該同時也是一種較好的保存液。
實shi際ji上shang，沒mei有you哪na一yi種zhong固gu定ding液ye
，無wu任ren是shi單dan一yi固gu定ding液ye或huo混hun合he固gu定ding液ye都dou能neng夠gou完wan全quan達da到dao上shang述shu要yao求qiu。各ge種zhong固gu定ding劑ji性xing能neng和he作zuo用yong都dou不bu盡jin相xiang同tong
，因yin此ci
，對dui標biao本ben的de固gu定ding應ying根gen據ju組zu織zhi的de製zhi片pian目mu的de和he要yao求qiu去qu選xuan擇ze適shi當dang的de固gu定ding劑ji。

五、固定劑的種類
組織製片技術上所使用的固定劑種類繁多，性能各有不同
，有的為氧化劑
，有的為還原劑
；有的呈酸性，有的呈堿性；有的滲透力強，有的滲透力弱
；有(you)些(xie)易(yi)使(shi)組(zu)織(zhi)收(shou)縮(suo)，有(you)些(xie)則(ze)使(shi)組(zu)織(zhi)發(fa)生(sheng)輕(qing)微(wei)膨(peng)脹(zhang)現(xian)象(xiang)。一(yi)般(ban)地(di)說(shuo)，單(dan)一(yi)固(gu)定(ding)劑(ji)要(yao)想(xiang)使(shi)組(zu)織(zhi)固(gu)定(ding)後(hou)達(da)到(dao)某(mou)種(zhong)特(te)殊(shu)染(ran)色(se)要(yao)求(qiu)是(shi)比(bi)較(jiao)困(kun)難(nan)的(de)。因(yin)此(ci)，在(zai)標(biao)本(ben)固(gu)定(ding)中(zhong)常(chang)使(shi)用(yong)兩(liang)種(zhong)以(yi)上(shang)成(cheng)分(fen)（固定劑）的混合固定液。

六、用做固定劑的試劑
1、單一固定劑：
jinyouyizhonghuaxuewuzhijiashuirongjiehouyongyigudingbiaobendegudingyejiaodanyigudingye。changyongdanyigudingshijiyoujiaquan，sajing，bingcusuan，kuweisuan，zhonggesuanjia
，esuan，yanghuagong ，丙酮等。除福爾馬林，酒精和丙酮常用作單一固定劑外，其它多作混合液中的一種成分。

甲醛formaldeloyde (H·CHO)
甲醛是一種氣體
，約有40%重量溶於水。這是一種還原劑，頗易揮發，這種飽和溶液稱為甲醛溶液；其商品名叫福爾馬林。
10%福爾馬林的組成係；
甲醛溶液（福爾馬林） 10ml
水 90 ml
甲醛是一種使用廣泛、簡(jian)便(bian)的(de)固(gu)定(ding)劑(ji)，同(tong)時(shi)又(you)是(shi)一(yi)種(zhong)良(liang)好(hao)別(bie)的(de)標(biao)本(ben)保(bao)存(cun)液(ye)。經(jing)它(ta)固(gu)定(ding)的(de)標(biao)本(ben)，可(ke)適(shi)應(ying)一(yi)些(xie)特(te)殊(shu)染(ran)色(se)。它(ta)的(de)滲(shen)透(tou)性(xing)較(jiao)強(qiang)
，固(gu)定(ding)均(jun)勻(yun)，能(neng)增(zeng)加(jia)組(zu)織(zhi)的(de)韌(ren)性(xing)
，組(zu)織(zhi) 縮輕微，硬性大於酒精。
福爾馬林主要是由甲醛的聚合形式構成，然而聚合形式的固定效果低於單體形式構成的10%福爾馬林，為阻止在放置一定時間的重聚作用，一般將溶液的PH值調節至中性或偏堿性。
甲醛與蛋白質是在分子間的交聯上起反應
，最終產生一種不溶性產物。它經過絡合交聯，使蛋白質固定，能較好地保存脂類
；對肝糖也有固定作用，但必須及時固定及時處理
，以免產生水解。
甲醛當長期貯存，特別於寒冷氣候下，自行分解，可變混濁，有白色沉澱物，這種沉澱即三聚甲醛，是甲醛的一種聚合形式（加熱可重新分解成甲醛）。商品福爾馬林用甲醇阻止聚合作用。有時由於溶液不純或甲醛氧化產生的甲酸成分使溶液呈酸性，酸性的甲醛溶液使標本嗜染酸性、嚴重時可導致細胞核的嗜酸性染色。因此，在備用的甲醛中宜放入小量的碳酸鎂或碳酸鈉作為中和劑。如果每100毫升的福爾馬林固定液中加入5ml的吡啶
，則可調整PH為7。不過
，這些方法不能永久保持其PH值；欲望使其長期保持中性
，則需以磷酸緩衝液作溶劑進行配製。其配製方法如下：
10%福爾馬林 1000ml
磷酸二氫鈉（NaH2 PO4 ） 4g
磷酸氫二鈉（Na2 HPO4 ） 6.5g
固定小的組織塊數小時即可達到固定要求。如需要快速固定時，可加溫到70～80℃，經過10分鍾即可達到固定要求。在甲醛溶液中短時固定的標本，衝洗時間在10分鍾至2小時即可，但固定時間較長的標本需要較長時間的流水衝洗。一般要衝洗24小時，甚至延長48小時
，否則，由於甲酸的沉澱將會影響染色的結果。
甲醛能保存脂肪和類脂體
，對染色體，線粒體，高爾基體，具有良好的固定作用。
jingjiaquangudingdechenjiuzuzhi
，youyiduoxuedeganpizuzhineichangkechuxianzongheisedefuermalinsesukeli
，zhezhongsesuburongyushui

，jiujingjibingtongdeng
，ruyuyuhantiexuehuangsujiayiqubie，keyongpulushilanfanyingjinxingjianbie。fuermalinsesubuhanyoutie
，yinci
，fuermalinsesuchengyinxingfanying，yongzhongxinghuoweijianxingfuermalingudingdexiaoguonengxianzhuzengjiaduitielizidejianchusuduqiekewanquanbimianfuermalinsesudexingcheng。ciwaiyekeyishiyongqitashijiyijinxifangfachuqufuermalinsesudechendian，ru：
（1）苦味酸飽和酒精（90%）溶液浸洗30分鍾後經70%酒精再水洗後進行染色。
（2）什端氏（Schriade）法：
70%酒精 200ml
28%氨水 1ml
將石蠟切片在脫蠟以後放於上述液體中30分鍾
，再用流水衝洗，而後染色。若甲醛產生的色素沉澱仍未被其洗去
，則可在Schriade氏液中延長時間。此法並不損害組織。
(3)費羅氏（Verocay）法:
80%酒精 100ml
1%KOH 1ml
將切片在脫蠟至80%酒精後，浸入上液10分鍾，再流水衝洗5分鍾

，入80%酒精之後水洗染色。
福爾馬林固定的標本，經酒精脫水收縮較大，是其缺點。

酒精（C2 H5 OH）
可單獨用作固定液；亦可作混合固定液，因為酒精（乙醇）是一種還原劑，所以不可與鉻酸，重鉻酸鉀或鋨酸等氧化劑相混合使用。在氧量不足時酒精易氧化成乙醛
；氧量充足則能生成酯酸，所以在正常情況下
，酒精是偏酸性試劑。
jiujingweichangyongdeyoujirongji，nengrongjieduozhongyoujiwu，gaonongdujiujingnengninggubaidanbai
，qiudanbaihehedanbai
，duigantangyougudingzuoyong
，hedanbaihegantangjingjiujinggudingchengshuirongxingzhuangtai，yinci，jingjiujinggudingdebiaobenruguogudinghouyongshuixidi，zehezheseqianjia，gantangyejiangbeishuijie。zuoweiyizhongzhirongji，nongduzai50%以上的酒精可溶解脂肪和類酯體，因此，對脂類的證明，高爾基氏體，線粒體等染色不宜使用酒精作固定劑。
酒精還可溶解血紅蛋白和損害多數其他色素，因此，如果證明組織蛋白的色素時也不宜以酒精作為固定劑。
濃酒精有較大的收縮力
，被它固定的組織收縮顯著，表麵發硬
，因而酒精較難滲入到組織中去，組織必須用酒精固定時宜先用80%的酒精固定數小時
，然後再換95%酒精，這樣可以避免組織過度收縮，因此它的穿透力緩慢且與組織長期接觸能使之硬化
，如需要證明尿酸結晶和保存糖類
，則須用100%酒精固定。
酒精既有固定作用
，又有脫水作用，經酒精固定的標本不需洗滌
，可用較高濃度酒精直接進行脫水，也可暫存於70%酒精中。

醋酸（CH3 COOH）
純醋酸為無色，具有強烈刺激性的酸性液體，溫度低於17℃時呈固體狀，形成冰樣結晶體。所以
，一般稱為冰醋酸。
醋酸因使膠原纖維腫脹，故不能單獨使用
；danzaihunhegudingyezhongyoukangqitashijishixibaozhousuodezuoyong。yinci，cusuanchangtongjiujingpeizhichengweihunhegudingyelaidixiaojingguogudingsuoyinqizuzhidegaodushousuoheyinghuadezuoyong。
醋酸可與水，酒精等溶劑相混合。一般使用濃度為0.3～5%
，以5%為備用液。用醋酸固定後的組織不必水洗，即可直接投入50%或70%酒精之中。醋酸的滲透性很強，一般較小的組織塊隻須1小時即可。
醋酸可使核蛋白沉澱

，因此染色質固定很快
，是染色質良好的固定液。對蛋白質具有保存作用，對脂類、糖tang不bu產chan生sheng影ying響xiang
，高gao濃nong度du醋cu酸suan則ze可ke溶rong解jie脂zhi肪fang及ji類lei脂zhi，並bing使shi線xian粒li體ti和he高gao爾er基ji體ti被bei破po壞huai或huo變bian形xing。所suo以yi
，一yi般ban配pei製zhi含han醋cu酸suan的de混hun合he液ye時shi
，其qi濃nong度du都dou不bu超chao過guo5%。

苦味酸（C6 H2 (NO2 )3 OH）
kuweisuanshiyizhongjuduxingdehuangsejiejingti
，weiku

，zaikongqizhongganzaoshiyoubaozhaxing
，guxubaoshibaocun，zuihaoshichucunzaiyicengshuixia。yibanqingkuangxia，zhipianshijiangkuweisuanzhichengbaoherongyezuoweichangbeiyongye
，tongchanggudingdenongdushibaoheye，qibaoheduwei0.9%~1.2%。kuweisuanrongyujiujing，erjiaben
，gudinghoudezuzhijingjiujingtuoshuijike。kuweisuanyeshiyizhonglianghaodezuzhiranseji，jingkuweisuangudingjigudingdezuzhizuosanseransekeshiyanseduibixianyan。
苦ku味wei酸suan能neng沉chen澱dian一yi切qie蛋dan白bai質zhi，並bing與yu其qi結jie合he形xing成cheng苦ku味wei酸suan鹽yan
，遇yu水shui時shi
，其qi中zhong有you的de部bu分fen可ke溶rong與yu水shui，因yin此ci在zai一yi般ban情qing況kuang下xia，組zu織zhi經jing苦ku味wei酸suan或huo含han有you苦ku味wei酸suan的de固gu定ding劑ji固gu定ding後hou

，這zhe種zhong水shui溶rong性xing苦ku味wei酸suan鹽yan在zai與yu水shui接jie觸chu前qian需xu先xian經jing酒jiu精jing處chu理li使shi其qi呈cheng不bu溶rong性xing，可ke以yi70%酒精浸洗
，在酒精內加上少量碳酸鋰或氨水即可被洗去。或者是不經水洗
，直接投入70%酒(jiu)精(jing)脫(tuo)水(shui)。在(zai)脫(tuo)水(shui)過(guo)程(cheng)中(zhong)，苦(ku)味(wei)酸(suan)可(ke)被(bei)各(ge)級(ji)酒(jiu)精(jing)溶(rong)解(jie)洗(xi)去(qu)。即(ji)使(shi)不(bu)能(neng)全(quan)部(bu)洗(xi)去(qu)
，亦(yi)不(bu)妨(fang)礙(ai)染(ran)色(se)，脫(tuo)水(shui)酒(jiu)精(jing)雖(sui)被(bei)染(ran)黃(huang)，但(dan)亦(yi)不(bu)失(shi)其(qi)脫(tuo)水(shui)效(xiao)果(guo)。
通常苦味酸沉澱紅細胞
，可移走鐵離子，特別是僅少量存在時可使RNA抵抗核糖核酸酶的消化。

重鉻酸鉀(K2 Cr2 O7 )
zhonggesuanjiaweiyizhongjuhongseyouduxingdekuaizhuangjiejingti
，rongyushui，burongyujiujing，weiyizhongqiangyanghuaji。suoyiqishuirongyebuyingyujiujing，fuermalindenghaiyuanjixianghunheshiyong。zaimouxieqingkuangxia，tongfuermalinhunhegudingbiaobenshi，zhinengzaishiyongqianxianghunhe，guojiujishiqugudingzuoyong。jingzhonggesuanjiagudinghoudezuzhiyingjishijinxingshuixituoshui
，fouzebiaobenbianyingcuihua，buyizhichengqiepian。rubunengdangjizhizuoqiepian，kejiangbiaobenbaocunyufuermalinyenei。
重鉻酸鉀對蛋白質的結合作用像福爾馬林一樣，固定胞漿不易引起沉澱作用。但在溶液中加入醋酸，PH為3.75shi
，huishiransezhihexibaojiangyinghua，shizhichanshenggesuan
，cainengshidanbaizhichengwangzhuangchendian。zhonggesuanjiaduixibaozhi，ransezhigudinglianghao，danransezhizebeirongjie。weisuanhuadezhonggesuanjiasuibunengchendiandanbaizhi
，dankeshidanbaizhibianweiburongxing，haikeyibaohulinzhilei，yinenggudingleizhiwu

，shiqiburongjieyuzhirongji。yinci，keyigudinggaoerjishitihexianliti。
重鉻酸鉀不是糖的固定液
，用重鉻酸鉀（或鉻酸）固定的組織幾乎完全不會發生收縮
，但經酒精脫水時，則收縮明顯。所以在脫水之前


，組織需用流水衝洗16－12小時。如把含鉻組織直接轉移到酒精內

，會形成一種非溶性低氧化物而不易除去。
重鉻酸鉀有溶解染色質的缺點，一般備用液為5％水溶液，固定液使用濃度為1％－3％水溶液。

鉻酸（CrO3 ）
為暗紅色或帶暗紫色的塊狀結晶，具有強酸性及腐蝕性

，劇毒

，易潮解
，為強氧化劑
，應置於暗處。它是Orth氏液或ZenRer氏液等複合固定劑中的一種成分，不應同酒精、福爾馬林等還原劑混合使用。鉻酸與乙醇
，乙醚少許接觸即可引起爆炸。
鉻酸可沉澱所有的蛋白質

，使不溶於水，並可保存糖類。鉻酸水解DNA係將其戊糖轉變為一種醛；亦可將糖類轉變為醛。因此DNA和糖類不需經過常規PAS或Feulgen反應的預先處理即與Schiff試劑呈陽性染色。
gesuandeshentoulijiaodi，duibiaobenshousuoqingwei
，jinggesuangudingjigudingdezuzhixiangyongzhonggesuanjiagudingyiyangxuchedishuixi，jiangzuzhizhonggesuanquanbuxiqu，fouzezaituoshuiguochengzhong，gesuanyujiujingzuoyongshengchengyanghuagedechendian，shizuzhicuihua
，qiebuyiyuzuzhidezhese。gesuanshihegudingdenongduwei0.5%～1%。

四氧化鋨（OsO4 ）
為微黃色結晶，通常密裝於安瓿內出售，為強氧化劑，一般認為它使未飽和鍵氧化。對飽和脂肪不起反應
，未飽和脂類可還原OsO4 ，易(yi)氧(yang)化(hua)為(wei)黑(hei)色(se)氫(qing)氧(yang)化(hua)物(wu)，溶(rong)液(ye)呈(cheng)中(zhong)性(xing)
，揮(hui)發(fa)性(xing)強(qiang)
，在(zai)操(cao)作(zuo)四(si)氧(yang)化(hua)鋨(e)時(shi)應(ying)小(xiao)心(xin)，因(yin)其(qi)氣(qi)體(ti)有(you)刺(ci)激(ji)性(xing)，會(hui)引(yin)起(qi)結(jie)膜(mo)炎(yan)。遇(yu)熱(re)和(he)光(guang)時(shi)易(yi)還(hai)原(yuan)
，故(gu)應(ying)貯(zhu)於(yu)冷(leng)暗(an)處(chu)。平(ping)時(shi)溶(rong)液(ye)密(mi)閉(bi)有(you)色(se)瓶(ping)中(zhong)
，並(bing)置(zhi)於(yu)冰(bing)箱(xiang)內(nei)。
四氧化鋨是脂肪和類脂質的固定液，用以顯示脂類（例如髓脂類）。能(neng)使(shi)單(dan)個(ge)細(xi)胞(bao)或(huo)小(xiao)組(zu)織(zhi)的(de)微(wei)細(xi)構(gou)造(zao)得(de)以(yi)極(ji)好(hao)地(di)保(bao)存(cun)，因(yin)此(ci)幾(ji)乎(hu)是(shi)用(yong)於(yu)電(dian)子(zi)顯(xian)微(wei)術(shu)最(zui)佳(jia)固(gu)定(ding)劑(ji)。組(zu)織(zhi)經(jing)固(gu)定(ding)後(hou)，脂(zhi)肪(fang)，類(lei)脂(zhi)呈(cheng)黑(hei)色(se)，微(wei)溶(rong)於(yu)二(er)甲(jia)苯(ben)及(ji)酒(jiu)精(jing)，脫(tuo)水(shui)後(hou)最(zui)好(hao)以(yi)苯(ben)作(zuo)透(tou)明(ming)劑(ji)。
四氧化鋨的滲透力弱。組織塊如過2－3厘米厚度則穿透不良和不均。所有含四氧化鋨固定劑的固定作用皆很不均勻

；固定不良的組織切片表現周圍有一圈過度固定的暗色區帶
；中心為固定不足致使細胞微細結構不清的區域。有些成分變暗是由於無色的OsO4 轉變為黑色水合物OsO4·5H2 O形式。
四si氧yang化hua鋨e常chang與yu鉻ge酸suan，醋cu酸suan，重zhong鉻ge酸suan鉀jia等deng混hun合he使shi用yong，固gu定ding後hou的de組zu織zhi需xu經jing流liu水shui衝chong洗xi，否fou則ze在zai脫tuo水shui酒jiu精jing中zhong易yi被bei還hai原yuan產chan生sheng沉chen澱dian，不bu利li於yu核he著zhe色se
，在zai每mei10毫升溶液中內加入1滴飽和氯化汞水溶液有助於製止還原作用。

氯化汞（又名升汞或二氯化汞HgCL2 ）
氯化汞為白色粉末或針狀結晶，後者為化學純品，易升華，能溶於水和酒精。一般固定用其飽和溶液。
氯lv化hua汞gong是shi一yi種zhong能neng迅xun速su透tou入ru並bing使shi組zu織zhi硬ying化hua的de蛋dan白bai沉chen澱dian劑ji。通tong常chang像xiang別bie的de金jin屬shu離li子zi那na樣yang，它ta與yu蛋dan白bai質zhi的de酸suan基ji以yi及ji核he蛋dan白bai的de磷lin酸suan基ji相xiang結jie合he，亦yi特te異yi地di與yu氫qing硫liu基ji起qi反fan應ying。因yin而er經jingHg固定後的蛋白質不溶於水，大多數蛋白反應可被利用。可惜，它的透入速度於最初幾毫米後就急驟降低
，因此組織塊厚度如超過5毫米常使外圍過度固定致堅硬而中心固定不足仍柔軟，隻宜固定薄片組織。由於此缺點加之使組織收縮劇烈，很少單獨使用
；當dang與yu拮jie抗kang此ci缺que點dian的de試shi劑ji如ru醋cu酸suan

，福fu爾er馬ma林lin
，重zhong鉻ge酸suan鉀jia等deng結jie合he使shi用yong時shi，氯lv化hua汞gong仍reng是shi很hen多duo優you良liang常chang規gui固gu定ding劑ji的de一yi種zhong成cheng分fen。用yong氯lv化hua汞gong固gu定ding的de組zu織zhi使shi染ran色se特te別bie對dui胞bao漿jiang著zhe色se比bi較jiao鮮xian麗li。
fanyonghanlvhuagongdegudingjigudingdezuzhiruchaoguoguidingshijianhuishizuzhiguoduyinghua
，ernanqiebopian。zuzhineichangcunyougongyan
，qiepianshinengsunshangqiepiandao
，suoyizaituoshuiqianyingyuyixiqu。changyongfangfashiyong70%酒精加入少量碘（0.5%）浸洗，再進行充分的衝洗或以70%酒精洗後進行脫水。也可在切片染色前用含碘的70%酒精漂洗數分鍾，再以5%硫代硫酸鈉漂洗，水洗後進行染色。
氯化汞常備溶液為飽和（約7%）水溶液
，固定用濃度常為5%水溶液。用升汞飽和液固定組織時
，臨時須加5%冰醋酸。固定2－3mm厚的組織塊須經6－18小時，然後用水洗24小時，再保存於80%酒精中。
氯化汞腐蝕金屬，混有此試劑的固定液不能使用金屬容器盛裝或用金屬鑷子夾持。氯化汞有劇毒

，應妥善保管。
gudingjidexuanzequjueyuyanjiugongzuodangshihexiayibudexuyao，zaixuanzehunhegudingjishi，yingzhuyigezhongshijidepingheng，rushizuzhishousuodeshijikepeiyishizuzhipengzhangdeshiji
，shentouliruodekeyushentouliqiangdehunheshiyong。danshi，yanghuajiyuanzeshangbuyuhaiyuanjihunyong，ruxuyaoshi，zhinengzaishiyongqianlinshihunhe。yizhonghunhegudingjineibuyiyouliangzhongyishangdeyanlei，yimianchanshengfuyanyingxiangduizuzhideguding，ruyanghuanahelvhuanatongshiyingyongshi，changjianglvhuanagaiyongliusuanna。jishugongzuozhehebingligongzuozhedouyinglejiegezhonggudingjidexingneng。gudingyedexuanzeqiadang，cainenghuodemanyidezhipianjieguo。
混合固定液的種類很多
，本章內所述的固定劑皆是較常用的
，特殊染色所需的固定劑皆列在相應的標題下。
Miiller氏液
配方：重鉻酸鉀 2.5g
硫酸鈉 1.0g
蒸餾 水加至 100ml
此ci液ye固gu定ding作zuo用yong緩huan慢man，但dan頗po均jun勻yun
，收shou縮suo亦yi小xiao。多duo用yong於yu媒mei染ran和he硬ying化hua神shen經jing組zu織zhi
，在zai這zhe種zhong固gu定ding溶rong液ye中zhong，重zhong鉻ge酸suan鉀jia未wei經jing酸suan化hua，所suo以yi對dui染ran色se質zhi無wu固gu定ding作zuo用yong。不bu適shi用yong於yu一yi般ban細xi胞bao學xue染ran色se。除chu用yong於yu骨gu骼ge標biao本ben外wai，此ci液ye是shi一yi種zhong不bu常chang用yong的de固gu定ding劑ji。固gu定ding時shi間jian數shu天tian至zhi數shu周zhou，在zai固gu定ding過guo程cheng中zhong，需xu要yao每mei日ri更geng換huan新xin液ye並bing置zhi暗an處chu，固gu定ding後hou的de組zu織zhi用yong流liu水shui衝chong洗xi，再zai放fang入ru酒jiu精jing中zhong脫tuo水shui。

Orth氏液（Mullr氏液＋福爾馬林）
配方：重鉻酸鉀　　　 2.5g
硫酸鈉 1.0g
福爾馬林 10ml
蒸餾 水 加至 100ml
一般以Mullr氏液為備用液，用前以9份Mullr氏液加1份福爾馬林混合而成
，因為重鉻酸鉀是氧化劑，福爾馬林為還原劑
，混合後久放即失去固定作用。
固定0.5厘米的標本塊約需3－4日(ri)
，每(mei)日(ri)需(xu)更(geng)換(huan)新(xin)液(ye)，標(biao)本(ben)固(gu)定(ding)後(hou)要(yao)充(chong)分(fen)水(shui)洗(xi)
，然(ran)後(hou)進(jin)行(xing)脫(tuo)水(shui)包(bao)埋(mai)。如(ru)固(gu)定(ding)過(guo)久(jiu)
，標(biao)本(ben)變(bian)脆(cui)，顏(yan)色(se)由(you)棕(zong)黃(huang)轉(zhuan)變(bian)為(wei)黑(hei)色(se)


，則(ze)不(bu)能(neng)製(zhi)作(zuo)切(qie)片(pian)，標(biao)本(ben)經(jing)固(gu)定(ding)後(hou)如(ru)不(bu)能(neng)及(ji)時(shi)製(zhi)片(pian)時(shi)，應(ying)將(jiang)標(biao)本(ben)保(bao)存(cun)於(yu)福(fu)爾(er)馬(ma)林(lin)內(nei)或(huo)70%酒精中。
Orth氏液對染色質
，線粒體有較好的固定效果。硫酸鈉在固定液中有助於滲透作用，在一般情況下，可省去不用。

Zenker氏液（以Muller液為基液加入氯化汞在臨用前再加醋酸混合而成）
配方：重鉻酸鉀 2.5g
硫酸鈉 1.0g
氯化汞 5.0g
蒸餾水 加至 100ml
冰醋酸（臨用時加入） 5ml
Muller液加入醋酸後則不能貯存，未加醋酸的溶液（ZenRer氏原液）可ke保bao存cun較jiao久jiu。此ci液ye加jia入ru冰bing醋cu酸suan後hou，與yu重zhong鉻ge酸suan鉀jia作zuo用yong生sheng成cheng鉻ge酸suan，是shi蛋dan白bai質zhi的de良liang好hao固gu定ding劑ji
，其qi穿chuan透tou力li迅xun速su而er均jun勻yun硬ying化hua組zu織zhi能neng力li強qiang

，經jing它ta固gu定ding後hou的de標biao本ben利li於yu鹽yan基ji性xing染ran色se劑ji著zhe色se，胞bao核he和he胞bao漿jiang染ran色se頗po為wei清qing晰xi，是shi一yi種zhong優you良liang的de常chang規gui固gu定ding劑ji。
Zenker氏固定液中含有兩種蛋白質和三種染色質的固定劑：
 
福爾馬林（40%甲醛液） 25ml
冰醋酸 5ml
此ci固gu定ding液ye保bao存cun性xing良liang好hao
，滲shen透tou速su度du快kuai
，穿chuan透tou力li迅xun速su而er均jun勻yun，且qie很hen少shao引yin起qi收shou縮suo
，不bu使shi組zu織zhi變bian硬ying和he變bian脆cui，固gu定ding後hou的de組zu織zhi用yong三san色se染ran色se法fa著zhe色se鮮xian豔yan絢xuan麗li，過guo量liang苦ku味wei酸suan使shi組zu織zhi呈cheng黃huang色se，但dan並bing不bu妨fang礙ai染ran色se

，毋wu須xu洗xi淨jing除chu去qu。
此(ci)液(ye)也(ye)是(shi)皮(pi)膚(fu)組(zu)織(zhi)較(jiao)好(hao)的(de)固(gu)定(ding)液(ye)

，它(ta)可(ke)以(yi)軟(ruan)化(hua)表(biao)皮(pi)不(bu)使(shi)其(qi)變(bian)硬(ying)變(bian)脆(cui)。利(li)於(yu)切(qie)片(pian)，對(dui)蛋(dan)白(bai)質(zhi)核(he)酸(suan)有(you)較(jiao)好(hao)的(de)固(gu)定(ding)作(zuo)用(yong)，一(yi)般(ban)固(gu)定(ding)時(shi)間(jian)為(wei)數(shu)小(xiao)時(shi)至(zhi)一(yi)日(ri)。

Carrnoy氏固定液
配方：無水酒精 60ml
氯仿 30ml
冰醋酸 10ml
此液穿透力非常塊、固定力強，對核固定良好，並可保存糖原也用於糖類的固定。於脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的固定。一般組織固定2－3小時後即可直接投入95%酒精和純酒精中進行脫水，因此也可作快速固定的固定劑，厚度2－9毫米的小塊組織僅需15分鍾即可


，外檢胸腹水經過離心沉澱後，將沉澱物用Carrnoy氏液固定可製作石蠟切片。

醋酸－酒精－福爾馬林混合固定液
配方：福爾馬林 10ml
冰醋酸 5ml
70%酒精 85ml
這種混合固定液通常簡稱“AAF”gudingye。shiyongjiaoguangfan
，peizhishiyibankeyijiujingzuoweirongji
，ranhoujiarufuermalin，cusuan。jiujingkeyinzuzhizhongleibutongercaiyongbutongdenongdu，zaichangguiqiepianzhong，womenchangcaiyongnongduwei95%酒精。
此ci液ye對dui糖tang原yuan的de固gu定ding佳jia良liang，就jiu是shi說shuo在zai蛋dan白bai質zhi成cheng分fen完wan全quan固gu定ding之zhi前qian可ke以yi防fang止zhi糖tang類lei溶rong解jie，加jia入ru醋cu酸suan以yi保bao證zheng蛋dan白bai質zhi的de固gu定ding，由you於yu酒jiu精jing和he福fu爾er馬ma林lin二er者zhe皆jie為wei迅xun速su穿chuan透tou的de試shi劑ji，這zhe是shi一yi種zhong相xiang當dang好hao的de快kuai速su固gu定ding劑ji，對dui臨lin床chuang外wai檢jian工gong作zuo特te別bie有you利li，福fu爾er馬ma林lin對dui組zu織zhi染ran色se 效果較好，醋酸可以防止酒精而引起的收縮。常溫下
，5毫米厚的組織固定4小時即可，加溫（60℃）條件下，一般組織半小時內可固定良好
，固定後組織直接放入95%酒精中脫水。
AAF固定液的缺點是組織固定後對細胞膜上的蛋白質和細胞內的某些結構有一定破壞作用，而對免疫組織化學染色有一定影響（詳見免疫組織化學技術一章）。

其它常用固定液配方
10%甲醛生理鹽水液
配方：福爾馬林 100ml
氯化鈉 9.0g
蒸餾水 900ml

Gendre液
配方：苦味酸飽和於95%酒精溶液 80ml
福爾馬林 15ml
冰醋酸 5ml
用此液在室溫下3－4小時即可使糖原固定良好。

緩衝福爾馬林液
配方：福爾馬林 10ml
磷酸二氫鈉（NaH2 PO4 ·2H2 O） 0.4g
磷酸氫二鈉（Na2 HPO4 ） 0.65g
蒸餾水 100ml
緩衝福爾馬林固定劑具有能較好地保存細胞結構和某些細微結構，適於免疫組織化學染色和電鏡觀察
，並且可較長時間保存組織（半年至一年）而又不影響製片和染色。是近年來越來越受到重視的固定劑。

大體標本的處理和固定

jiepousuodedezangqibiaoben
，ketigonglinchuangbinglitaolunjijiaoxuehekeyanzhiyong，chuduiyoudianxingdebingbianzangqizhichengbiaobenwai
，duiyouzhongyaobingbiandezangqiyiyinggudingbaocun

，tiaojianyunxukejiangquanbuzangqiqiechengxuyaodedaxiaobaoliu。
通常所用的固定液是10%甲醛（即福爾馬林）水溶液（市售甲醛溶液用水稀釋1：9）。這樣既可使組織內的蛋白和脂類等成分凝固
，又可使組織不致腐爛。為了保存組織內的各種水溶性成分、如粘液、肝澱粉和尿酸鹽結晶等
，應在剖驗當時將部分髒器切成組織塊放入純酒精液固定，切不可著水。
zhiyouxixinqieyoujihuadijinxingshitipoujian，bingzaiqiechuqiguanhouzaixichulicainenghuodelianghaodichenliebiaoben。poujianguochengzhongdecuxinhecaolv，henrongyipohuaiyigeyoujiazhidebiaoben。yinweijintiandechangjianbingmingtianhuichengweihanjianbingli，weicizhongyaodeshibaochizhexiebinglibiaobenyuanyoudexingtaiheseze。youshiwaikeshoushu 摘除的標本，如經適當處理也可以成為最好的陳列標本。
常規的福爾馬林固定後

，大體標本常呈灰褐色，用下述方法擬可保存大體標本的色澤，使之更接近自然色彩。
配方：甲醛 20ml
硝酸鉀 3g
醋酸鉀 3g
生理鹽水 加至 100ml
固定時間視標本的大小而定，一般24－72小時。固定後經充分的流水衝洗後再放入下述保存液中長期保存。
甘油 20ml
醋酸鉀 4g
麝香草酚 0.2g
蒸餾水 加至 100ml（PH＝8）

陳列標本的固定 

一.為供日後臨床病理討論、教學和研究用的標本
，必須將有關主要病變的髒器和其它繼發變化的髒器一並保留，這樣就保持了各髒器病變的聯係性和整體性。

二.將每一屍體的內髒放入一個較大的玻璃缸內。這種園缸應有緊密的玻璃蓋，使之不漏氣。缸內先裝半缸10%甲醛液
，再將需要保留的各髒器放入，一定要浸在固定劑內，若聽任露在液麵外的組織變幹
，則會造成一塊永久的暗色區。

三.各標本如肝、脾和腎等應具有一光滑平整地切麵（須以鋒利的長刃刀一次切出）。輕放在缸內
，以免彎曲變形
，缸內切不可多裝標本，特別是新鮮的軟標本和對有教學價值的標本要分別固定，以免擠壓、防止固定不足和變形而失去原有的特征。缸內固定液的量是標本體積的4－5倍。一般實質性髒器製作標本時，其厚度宜在1.5厘米左右，過厚則固定液不易滲透入內，過薄則易變形翹起。

四.肺髒標本比重較輕
，易漂浮在液麵
，可用薄層脫脂棉花覆蓋其表麵
、借以棉花纖維的虹吸現象
，可不斷地浸濕標本。在有條件的情況下
，為保證充分固定，應盡可能向標本內灌注固定劑。

五.標本放入固定液12小時後應加以翻轉，以使標本與缸底或缸壁接觸部分能很好浸透固定液。

六.具有空腔的髒器（如大
、小腸）膜組織（如胸膜
、腹膜等），皮膚等則應在剪開後用扣針將其邊沿釘在硬紙板上，標本朝下浸到固定液內，以保持病變的形態，使用的扣針需防鏽（也可用玻璃，竹簽或不鏽鋼針）以免汙染標本。

七.囊腔組織如果沒有打開可用注射器注入固定液使之充盈；如已打開則需填入浸有固定劑的脫脂棉以保持其自然狀態。

八.被膽汁汙染或含膽汁的標本
，必須分別固定貯存，否則會汙染別的標本。

九.標本的外觀

、biaoqianhemuluyetongyangzhongyao，datibiaobendebianhaozuihaoyongbutiao，yongtansumoshuishuxiejiepouhaoma，ranhoujiangbutiaojinzironghuadeshila，lengquehoujiangbiaoqianxiyubiaobenshanghuotourugangnei

，biaobengangwaimianyixutieshangjiepouhaoma，yibiansuishiquyan。

十.大(da)體(ti)標(biao)本(ben)的(de)保(bao)存(cun)和(he)管(guan)理(li)必(bi)須(xu)予(yu)以(yi)重(zhong)視(shi)，應(ying)定(ding)期(qi)加(jia)入(ru)甲(jia)醛(quan)溶(rong)液(ye)以(yi)補(bu)充(chong)平(ping)時(shi)之(zhi)揮(hui)發(fa)。液(ye)體(ti)內(nei)混(hun)和(he)少(shao)量(liang)麝(she)香(xiang)草(cao)酚(fen)，作(zuo)為(wei)防(fang)黴(mei)劑(ji)。平(ping)時(shi)也(ye)勤(qin)加(jia)管(guan)理(li)，以(yi)防(fang)止(zhi)發(fa)黴(mei)和(he)標(biao)本(ben)腐(fu)爛(lan)。除(chu)有(you)明(ming)確(que)病(bing)變(bian)需(xu)要(yao)保(bao)留(liu)的(de)標(biao)本(ben)外(wai)
，對(dui)廢(fei)舊(jiu)標(biao)本(ben)亦(yi)須(xu)妥(tuo)善(shan)處(chu)理(li)。一(yi)般(ban)相(xiang)隔(ge)3－6個月後

，集中裝於草包內焚化或深埋。

脫 鈣 

組(zu)織(zhi)裏(li)存(cun)有(you)鈣(gai)鹽(yan)可(ke)妨(fang)礙(ai)用(yong)常(chang)規(gui)方(fang)法(fa)製(zhi)作(zuo)良(liang)好(hao)切(qie)片(pian)。骨(gu)組(zu)織(zhi)及(ji)鈣(gai)化(hua)病(bing)灶(zao)
，經(jing)過(guo)固(gu)定(ding)後(hou)

，必(bi)先(xian)將(jiang)鈣(gai)鹽(yan)除(chu)去(qu)使(shi)組(zu)織(zhi)軟(ruan)化(hua)，才(cai)能(neng)進(jin)行(xing)常(chang)規(gui)切(qie)片(pian)。如(ru)脫(tuo)鈣(gai)不(bu)全(quan)則(ze)切(qie)片(pian)易(yi)撕(si)開(kai)或(huo)碎(sui)裂(lie)並(bing)損(sun)傷(shang)切(qie)片(pian)刀(dao)刃(ren)。脫(tuo)去(qu)鈣(gai)鹽(yan)的(de)過(guo)程(cheng)――稱為脫鈣。脫鈣時應注意：
1.骨組織固定24小時後，鋸下不超過0.5mm厚的薄骨片
，再以10%福爾馬林固定後進行脫鈣。（未固定的組織在酸性脫鈣液中受到的損傷比已固定的組織約大三倍）。骨組織過厚則需延長脫鈣時間，長時間浸於強酸影響切片染色效果。
2.在(zai)不(bu)影(ying)響(xiang)診(zhen)斷(duan)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)，應(ying)將(jiang)骨(gu)組(zu)織(zhi)周(zhou)圍(wei)的(de)軟(ruan)組(zu)織(zhi)全(quan)部(bu)剝(bo)去(qu)。如(ru)果(guo)切(qie)片(pian)目(mu)的(de)在(zai)於(yu)觀(guan)察(cha)骨(gu)髓(sui)病(bing)變(bian)或(huo)骨(gu)組(zu)織(zhi)腫(zhong)瘤(liu)，最(zui)好(hao)除(chu)去(qu)一(yi)部(bu)分(fen)正(zheng)常(chang)的(de)致(zhi)密(mi)的(de)骨(gu)組(zu)織(zhi)，以(yi)利(li)於(yu)脫(tuo)鈣(gai)和(he)製(zhi)片(pian)。
3.脫鈣前最好先將骨組織進行脫脂。
4.脫鈣要徹底，脫水應充分，在脫水過程中，要注意不使其過度硬化。

脫鈣劑
優質脫鈣劑的標準是：
（a） 完全脫鈣。
（b） 不損傷組織細胞或纖維。
（c） 不妨礙以後的染色技術。
（d） 適當的脫鈣速度。

一、強酸脫鈣劑
1.含甲酸脫鈣液
Gooding和Stewart氏液（甲酸－福爾馬林液）
配方：甲酸 5－25ml
福爾馬林 5ml
蒸餾水 加至 100ml
5%的甲酸是一種良好的常規脫鈣劑，速度適當，組織損害小。當甲酸成分增至25%則增快脫鈣速度，加入甲醛可適當保護組織不受酸損害
，但應切記，增加脫鈣速度隻能靠犧牲細胞微細構造來獲得。
根據組織的厚度和鈣化程度

，在5％甲酸液內2－4天可完全脫鈣，橫切的肋骨需36－48小時。
2.含鹽酸脫鈣液
Von Ebner氏液
配方：濃鹽酸 15ml
氯化鈉 7.5ml
蒸餾水 加至 100ml
鹽酸脫鈣易使組織收縮，作用速度較快
，用氯化鈉作為溶劑則效果良好，牙齒脫鈣時鹽酸可增至10－20%。脫鈣時，每日應加鹽酸（0.5%）直至完成脫鈣，橫切的人肋骨（5毫米厚度）於36－72小時內脫鈣。
3． 硝酸脫鈣液
是(shi)最(zui)常(chang)用(yong)的(de)脫(tuo)鈣(gai)劑(ji)，用(yong)硝(xiao)酸(suan)作(zuo)脫(tuo)鈣(gai)液(ye)的(de)缺(que)點(dian)是(shi)形(xing)成(cheng)亞(ya)硝(xiao)酸(suan)而(er)使(shi)溶(rong)液(ye)呈(cheng)黃(huang)色(se)，產(chan)生(sheng)顏(yan)色(se)即(ji)迅(xun)速(su)影(ying)響(xiang)脫(tuo)鈣(gai)速(su)度(du)，且(qie)組(zu)織(zhi)的(de)黃(huang)染(ran)會(hui)妨(fang)礙(ai)隨(sui)後(hou)的(de)染(ran)色(se)反(fan)應(ying)。在(zai)硝(xiao)酸(suan)內(nei)加(jia)入(ru)0.1％尿素可以防止變黃而使之無色，但尿素僅有暫時作用，一旦硝酸顯淡黃時需要加入。
福爾馬林－硝酸液（Clayden氏液）
配方：福爾馬林 5ml
硝酸（比重1.41） 7.5－15ml
蒸餾水 加至 100ml
此(ci)處(chu)方(fang)中(zhong)甲(jia)醛(quan)可(ke)部(bu)分(fen)地(di)抑(yi)製(zhi)硝(xiao)酸(suan)的(de)浸(jin)軟(ruan)作(zuo)用(yong)，這(zhe)即(ji)具(ju)有(you)脫(tuo)鈣(gai)作(zuo)用(yong)，又(you)具(ju)有(you)固(gu)定(ding)作(zuo)用(yong)
，硝(xiao)酸(suan)脫(tuo)鈣(gai)迅(xun)速(su)，組(zu)織(zhi)不(bu)膨(peng)脹(zhang)
，掌(zhang)握(wo)好(hao)脫(tuo)鈣(gai)時(shi)間(jian)可(ke)直(zhi)接(jie)脫(tuo)水(shui)，不(bu)影(ying)響(xiang)染(ran)色(se)效(xiao)果(guo)。但(dan)最(zui)好(hao)先(xian)洗(xi)去(qu)硝(xiao)酸(suan)。
橫切人肋骨（5mm）用含7.5％硝酸液於1－2天內脫鈣。
硝酸水溶液
配方：硝酸（用0.1尿素穩定） 5－10ml
蒸餾水 加至 100ml
此(ci)液(ye)用(yong)作(zuo)常(chang)規(gui)脫(tuo)鈣(gai)劑(ji)
，作(zuo)用(yong)迅(xun)速(su)，對(dui)組(zu)織(zhi)不(bu)膨(peng)脹(zhang)，對(dui)細(xi)胞(bao)的(de)保(bao)存(cun)和(he)染(ran)色(se)比(bi)前(qian)者(zhe)更(geng)好(hao)，能(neng)適(shi)用(yong)多(duo)種(zhong)染(ran)色(se)技(ji)術(shu)
，但(dan)每(mei)日(ri)需(xu)要(yao)更(geng)換(huan)新(xin)鮮(xian)溶(rong)液(ye)，最(zui)好(hao)早(zao)晚(wan)各(ge)一(yi)次(ci)，一(yi)般(ban)1－3天完成。
橫切人肋骨（5mm）在12－24小時內脫鈣。

二、螯合劑脫鈣
乙二胺四乙酸（EDTA ）是用以脫鈣地螯合劑。為有機化合物，有結合某些金屬的能力，能結合鈣鹽，15%derongyejiqituogaizuoyong

，zuzhiyongcifangfatuogai
，duizuzhipohuaixingxiao
，jifangzhishuyueyibuzhiyinqiduizuzhidepohuai
，duiyihoudaduoshuderansejishujiekededaomanyijieguo。
經10%中性福爾馬林鹽固定後，將組織移到50倍用磷酸鹽緩衝劑緩衝至PH值等於7的5.5％EDTA 內。
不超過5毫米厚度的小塊組織在此液內每4－5天換液一次，更換三次後再每天換液一次以便較準確的確定脫鈣終點。脫鈣“終點”可用X射線方法或用草酸鹽化學方法。
完全脫鈣後將組織直接移到70%酒精內常規脫水，浸蠟，石蠟或火棉膠包埋。

三、脫鈣步驟
1．取材：骨組織固定於10%福爾馬林24小時後再鋸取厚度約0.5厘米骨片。
2．固定：再以10%福爾馬林固定2天。
3．將組織置於脫鈣劑中，每日更換新鮮液、直至組織軟化為止。
4．流水衝洗24小時（除酸）。
5．進行常規脫水，透明，浸蠟
，切片。

四、鑒定脫鈣是否徹底
確定脫鈣“終點”三種方法：
1. 最常用的是最簡單的方法――zhenci

，ruguohenrongyibeicitou，erqiebugandaozulishi
，shuomingzuzhijibenshangtuogaiwanquan，fouzeyingjixutuogai。kaozuzhiderouruanxingceyantuogaizuoyongkaobuzhu，erqiezhezhongcharuyigenzhenyichajiaogaichendiandefangfahuizaochengzuzhisunshang。
2．用X射線檢查：看組織內是否仍有鈣質。
3．用化學實驗檢查：
取5ml脫鈣液用2M的NaOH（氫氧化鈉）調整至中性，再加5％草酸鈉或草酸銨1ml，液體混濁表示有鈣質。遲至5分鍾仍不混濁表示脫鈣液中不含有鈣質。
組(zu)織(zhi)中(zhong)仍(reng)有(you)鈣(gai)質(zhi)時(shi)
，一(yi)定(ding)量(liang)的(de)鈣(gai)離(li)子(zi)會(hui)溶(rong)於(yu)脫(tuo)鈣(gai)液(ye)中(zhong)，遊(you)離(li)的(de)鈣(gai)會(hui)幹(gan)擾(rao)脫(tuo)鈣(gai)作(zuo)用(yong)的(de)完(wan)成(cheng)。顯(xian)然(ran)

，應(ying)在(zai)每(mei)次(ci)試(shi)驗(yan)時(shi)完(wan)全(quan)更(geng)換(huan)
，再(zai)試(shi)驗(yan)中(zhong)必(bi)須(xu)經(jing)過(guo)2－3小時間隔讓鈣溶解。

五．酸的中和
脫鈣後水洗24小時，目的是除去組織中經無機酸浸漬後過多的酸，以免影響染色。再衝洗前應將組織用一種堿處理以使之脫酸呈中性，可用5％硫酸鉀或硫酸鈉處理過夜。（否則會引起組織膨脹）但直接轉移到稀酒精（70％）內過12－18小時換液2次(ci)
，再(zai)繼(ji)續(xu)脫(tuo)水(shui)，經(jing)無(wu)水(shui)酒(jiu)精(jing)，氯(lv)仿(fang)透(tou)明(ming)，石(shi)蠟(la)包(bao)埋(mai)，切(qie)片(pian)，整(zheng)個(ge)過(guo)程(cheng)其(qi)酸(suan)已(yi)全(quan)部(bu)除(chu)去(qu)
，在(zai)多(duo)數(shu)情(qing)況(kuang)下(xia)不(bu)僅(jin)不(bu)膨(peng)脹(zhang)且(qie)對(dui)染(ran)色(se)反(fan)應(ying)能(neng)有(you)所(suo)改(gai)善(shan)。因(yin)此(ci)不(bu)衝(chong)洗(xi)對(dui)染(ran)色(se)也(ye)沒(mei)大(da)礙(ai)
，隻(zhi)是(shi)脫(tuo)水(shui)劑(ji)被(bei)酸(suan)化(hua)。

組織的衝洗 

組zu織zhi經jing過guo固gu定ding後hou
，脫tuo水shui之zhi前qian應ying進jin行xing衝chong洗xi，將jiang組zu織zhi內nei的de固gu定ding液ye洗xi幹gan淨jing，否fou則ze殘can留liu組zu織zhi內nei的de固gu定ding液ye有you礙ai製zhi片pian和he染ran色se
，而er有you些xie固gu定ding液ye則ze可ke在zai組zu織zhi中zhong繼ji續xu起qi到dao脆cui化hua組zu織zhi的de作zuo用yong，以yi至zhi於yu損sun壞huai組zu織zhi，給gei製zhi片pian工gong作zuo帶dai來lai不bu利li。在zai衝chong洗xi時shi

，衝chong洗xi劑ji的de選xuan擇ze應ying依yi固gu定ding液ye的de種zhong類lei和he性xing質zhi而er有you所suo不bu同tong。
衝洗時應注意以下事項：
1.水溶性的固定劑：需用流水衝洗。
2.酒精溶劑的固定劑：應用同濃度的酒精浸洗。
3.含苦味酸的固定劑：（苦味酸與甲醛混合液除外），須用70％酒精浸洗，以免水洗後固定作用消失。
4.含有升汞固定劑：組織經固定後應在衝洗劑－水或酒精中加碘以洗去組織內汞的沉澱。
含有鉻酸的固定劑：組織在衝洗時最好置於暗處，以免產生沉澱或使組織硬化而影響製片。