亦稱礦物油保藏法,定(ding)期(qi)移(yi)植(zhi)保(bao)藏(zang)法(fa)的(de)輔(fu)助(zhu)方(fang)法(fa)。是(shi)指(zhi)將(jiang)菌(jun)種(zhong)接(jie)種(zhong)在(zai)適(shi)宜(yi)的(de)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang),最(zui)適(shi)條(tiao)件(jian)下(xia)培(pei)養(yang)至(zhi)菌(jun)種(zhong)長(chang)出(chu)健(jian)壯(zhuang)菌(jun)落(luo)後(hou)注(zhu)入(ru)滅(mie)菌(jun)的(de)液(ye)體(ti)石(shi)蠟(la),使(shi)其(qi)覆(fu)蓋(gai)整(zheng)個(ge)斜(xie)麵(mian),再(zai)直(zhi)立(li)放(fang)置(zhi)於(yu)低(di)溫(wen)(4~6℃)幹燥處進行保存的一種菌種保藏方法。
操作步驟如下:
1 液體石蠟的準備
選用優質化學純液體石蠟,將液體石蠟分裝加塞,用牛皮紙包好,采用以下兩種方式進行滅菌:
121℃濕熱滅菌30min,置40℃恒溫箱中蒸發水分,經無菌檢查後備用。
160℃幹熱滅菌2個小時,冷卻後,經無菌檢查後備用。
2 斜麵培養物的製備 參照定期移植法。
3 灌注石蠟 將無菌的液體石蠟在無菌條件下注入培養好的新鮮斜麵培養物上,液麵高出斜麵頂部1cm左右,使菌體與空氣隔絕。
4 保藏
4.1 注入液體石蠟的菌種斜麵以直立狀態置低溫(4~6℃)幹燥處保藏,保藏時間2~10年。
4.2 保藏期間應定期檢查,如培養基露出液麵,應及時補充無菌的液體石蠟。
5 恢複培養 恢複培養時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上,生長繁殖後,再重新轉接一次。
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