定期移植法亦稱傳代培養保藏法，包括斜麵培養、穿刺培養、液體培養等。是指將菌種接種於適宜的培養基中，最適條件下培養，待生長充分後，於4～6℃進行保存並間隔一定時間進行移植培養的菌種保藏方法。

操作步驟如下：
1 培養基製備 
器皿準備    培養基製備過程中所用的一些玻璃器皿，如三角瓶
、試管
、培養皿、燒杯

、吸管等，經洗滌
、幹燥
、包裝
、滅菌後使用。

溶解培養基配料    先在燒杯中放適量水
，按培養基配方稱取各項材料，依次將緩衝化合物、主要元素
、微量元素

、維生素等材料加入水中溶解，最後加足水量

，攪拌均勻。

調pH值     配料溶解後將培養基冷卻至室溫
，根據要求加稀酸（0.1mol/L鹽酸）或稀堿(10%氫氧化鈉)調pH值。加酸或堿液時要緩慢
、少量、多次攪拌，防止局部過堿或過酸而導致測量不準確和營養成分被破壞。

 加凝固劑    配製固體培養基時需加凝固劑，如瓊脂、明膠等。將凝固劑加入液體培養基中
，加熱並不斷攪拌至融解，再補足所蒸發水分。

過濾分裝   在二層紗布中間夾入脫脂棉，將配好的培養基趁熱過濾並分裝。斜麵培養基分裝量約為試管高度的四分之一(4～5mL)
，穿刺培養基分裝量以試管高度的二分之一為宜。分裝過程中勿使培養基沾汙管口，以免弄濕棉塞造成汙染。

包紮標記     將試管加棉塞，外麵包紮一層牛皮紙或鋁箔並注明培養基名稱及配製日期。

 滅菌   根據要求將培養基滅菌，通常蒸汽滅菌為121℃，15～20min。

斜麵擺放   滅菌後及時擺放斜麵，斜麵長度不超過試管管長的二分之一為宜。

 無菌檢查     將滅菌的培養基放入培養箱中作無菌檢驗
，通常30℃培養1～3天。無菌檢查合格後將其保存於4℃下備用。

2接種
2.1 斜麵接種
點接    把菌種點接在斜麵中部偏下方處。適用於擴散型生長及絨毛狀氣生菌絲類黴菌（如毛黴、根黴等）。

中央劃線 從斜麵中央自下而上劃一直線。適用於細菌和酵母菌等。

 稀波狀蜿蜒劃線法    從斜麵底部自下而上劃“之”字形線。適用於易擴散的細菌，也適用於部分真菌。

密波狀蜿蜒劃線法     從斜麵底部自下而上劃密“之”字形線。能充分利用斜麵獲得大量菌體細胞

，適用於細菌和酵母菌等。

 挖塊接種法     挖取菌絲體連同少量培養基，轉接到新鮮斜麵上。適用靈芝等擔子菌類真菌。

2.2 穿刺接種
用接種針從原菌種斜麵上挑取少量菌體
，從柱狀培養基中心自上而下刺入
，直到接近管底（勿穿到管底）
，然後沿原穿刺途徑慢慢抽出接種針。適用於細菌和酵母菌等。

2.3 液體接種
挑取少量固體斜麵菌種或用無菌滴管等吸取原菌液接種於新鮮液體培養基中。

3 培養
將接種後的培養基放入培養箱中，在適宜的條件下培養至細胞穩定期或得到成熟孢子。細菌培養溫度一般為30～37℃，真菌培養溫度一般為25～28℃。

4 保藏
培養好的菌種於4～6℃保存，根據要求每3～6個月移植一次。某些菌種，如芽裂酵母，阿舒假囊酵母，棉病囊黴等，須1～3個月移植一次。
保藏濕度用相對濕度表示

，通常為50%～70%。
斜麵菌種應保藏相繼三代培養物以便對照，防止因意外和汙染造成損失。