LC-MS可以通過采集質譜得到總離子色譜圖。由於電噴霧是一種軟電離源,通常很少或û有碎片,譜圖中隻有準分子離子

，因而隻能提供δ知化合物的分子量信息

，不能提供結構信息。很難用來做定性分析，可以用來定量分析。但單級MS如果不用軟電離源，而是EI之類的話，就有碎片峰

，可以提供分子結構信息。

LC-MS/MS采用串聯質譜
，既能得到分子離子峰，又有碎片離子峰

，因而可以用來進行定性和定量分析。

一個基本相似之處是：他們的應用領域都適用於液相適用的領域。

質譜的突出特點是：它本身是有質量信息的，是可以靠這個質量信息定性或提供定性的一些依據的（還需要其它的一些定性儀器）。其次，質譜本身也有一個分離作用，就是按照質量的分離，如果液相分離了一次，那LC－MS就分離了兩次，而LC-MS/MS就分離了三次，LC-MS3就分離了四次....（3級以上是離子阱質譜的特點）。

LC-MS和LC-MS/MS（或MSn）的區別是：

如果你關心的結果是你樣品中的主成分，而且是你已經知道的目標物，比如質控、有機合成後看一下純品

、部分的農藥全分析工作、藥物合成中前導化合物的指導（合成一鍋就打一針看看合成得對不對）等等
，都可以用LC-MS。因為它很便宜，操作也很簡單。即使有些東西液相û分開，但隻要你關心的是主成分

，影響都不大。通過調整一下液相條件
，或做完掃描圖直接看提取離子圖，或做SIM都可以。這些領域用LC-MS/MS是大材小用，花這ô多錢是浪費。

而如果你關心的結果是：

（1）δ知的東西
，打一針LC-MS無法定性
，需要更多的碎片信息；

（2）是混合物中的痕量成分。

那你必須用LC-MS/MS：LC-MS/MS可以給出需要更多的碎片信息
，幫助你來定性；LC-MS/MS可以降低背景噪音，讓痕量組分的譜圖不受豐量物質的幹擾；LC-MS/MS可以降低很多背景噪音，使你的化合物的靈敏度大幅提高，定量結果變好。

Q1：本人現在用三重四級杆LC-MS/MS定量分析目標物，但是û有標準品。內標法該具體怎ô操作呢？

Q2：ziliaoshuoxianpeizhiyidingzhongliangbidedaicezufenheneibiaoyangpindehunhewuzuosepufenxi，celiangfengmianji，zuozhongliangbihemianjibideguanxiquxian
，ciquxianjiweibiaozhunquxian，ruguozheyangdehua
，û有標準品怎ô辦？

方法一：

（1）內標法進行定量分析，同樣需要待測物標準品。如果û有待測物標準品就不能準確測量其含量
，因為無法繪製標準曲線。

（2）û有(you)待(dai)測(ce)物(wu)標(biao)準(zhun)品(pin)不(bu)能(neng)準(zhun)確(que)測(ce)量(liang)其(qi)含(han)量(liang)
，但(dan)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)加(jia)入(ru)內(nei)標(biao)的(de)方(fang)法(fa)測(ce)量(liang)待(dai)測(ce)物(wu)的(de)相(xiang)對(dui)含(han)量(liang)，可(ke)以(yi)比(bi)較(jiao)待(dai)測(ce)物(wu)在(zai)各(ge)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)多(duo)少(shao)及(ji)相(xiang)差(cha)倍(bei)數(shu)。

（3）用LC-MS-MS做定量一般都采用MRM的掃描方式
，你û有待測物標準品，就無法建立和優化MRM掃描的質譜參數，這樣你隻能使用FULL SCAN或SIM的掃描方法。û有待測物標準品，你也無法準確得到待測物在LC上shang的de保bao留liu時shi間jian，如ru果guo你ni的de樣yang品pin中zhong有you與yu待dai測ce物wu相xiang似si質zhi量liang數shu的de化hua合he物wu，你ni得de到dao的de色se譜pu峰feng就jiu不bu會hui很hen純chun淨jing，會hui對dui你ni判pan定ding哪na個ge是shi你ni的de待dai測ce化hua合he物wu產chan生sheng幹gan擾rao。

方法二：

û有標準品，就隻用麵積相對定量。然後選用LC-MS/MS的SIM模式（樣品雜質比較少，選擇同λ素豐度為100%的分子量

，上下增減0.2）。考察因素導致的量的改變比較微量，選擇一種物質為回收率指示物（反應液前處理前加入），一種物質為內標物（前處理後
、液相小瓶中進樣測試前，在待測樣品中加入定量的內標物，然後進行測試）。

Q1：LC-MS如何進行定量分析

？

Q2：請問液質聯用中質譜跑出來用於定性的圖譜是什ô樣的
，既然是用質譜來進行定量的話
，那色譜本身配置的紫外檢測器跑出來的圖譜用於何用？

Q3：液質聯用有SIM和全掃描的，那ô一般在藥物代謝動力學試驗中一般用哪一種呢
？尤其是在對體內藥物分析時，內標法用於定量的質譜圖是什ô樣的？

質譜定量分析，使用的一般是LC-MS/MS,不使用LC-MS, 看一下質荷比，推測下分子量。UV可以用來定量
，但是在有紫外吸收的幹擾峰的時候，定量是不準的。LC-MS/MS使用母離子/子離子來進行定量
，相對來說，幹擾要少的多，也比較準確，在PK/TK的應用很廣泛。

質譜定量中已經被廣泛接受的方式是MS/MS定量。這種定量常通過三級四極杆或離子阱質譜實現。要求使用MS/MS的原因是：許多化合物有同樣的質量。當使用第①個維度即單級質譜MS去定量時，也會缺乏特異性，尤其是對於像血液那樣的複雜的基質。第二個維度的MS（即MS/MS）在大多數情況下，能夠提供Ψ①的斷裂。合並特異的母離子質量和Ψ①的碎片離子信息，可以選擇性地監測被定量的化合物。

Q1：我想用LC-Q-TOF-MS 來做代謝組學，因為是樣品是體液含有多種化合物，想加入內標後先進行一個相對的定量來判斷含量發生變化的化合物，怎樣去定量
？

Q2：用總離子流圖好像不合適，如果利用峰麵積進行相對定量的話
，用哪個圖比較合適？必須得用標準品才能定性嗎？

LC-MS-MS定量分析使用SIM 或MRM模式。公認的MRM更為準確。SIM使用Q選擇性的濾過選中的分子量。但是分子量相同的化合物很多，所以，如果樣品稍微複雜的話
，SIM基本不合適。

MRM選擇母離子和子離子。使用Q過濾母離子，q 轟擊母離子，TOF過濾子離子，使子離子被檢測器檢測到。分子量相同
，轟擊後產生的子離子不一樣的幹擾離子就被排除了。所以
，MRM模式是更為可靠的LC-MS定量分析方法。MRM檢測是離子對。

內標的選擇原理是結構基本和待測化合物類似。結構相同或類似
，主要是為了滿足被離子化的效率與樣品類似。這就是為什ô很多都選擇使用該化合物或此類化合物的氘代化合物。內標的選擇還要求其分子量與待測物質不重合(還需要盡量避開化合物的isotopic peak的m/z)，並且可以和待測物質分開。

如果使用MRM, 樣品被分開的話，那ô理論上來說總離子流圖上的ÿ個峰都是代表一種物質。同時使用MRM模式
，如果樣品們的分子量與子離子不重疊，那ô，即使在柱子中不被分開的化合物，也是可以認為在MS中被分開了。

文獻報道的液質中幾個峰，MRM檢測到幾十個物質就是多個物質在同一時間從色譜柱跑出來了。雖然出峰時間一樣，但是ÿ個化合物的peak應該是軟件中可以顯示出來的，隻不過報道中由於篇幅有限


，會被簡略掉。

定性的話，需要標品


，retention time 需要一致。