LC-MS可以通過采集質譜得到總離子色譜圖。由於電噴霧是一種軟電離源,通常很少或沒有碎片,譜pu圖tu中zhong隻zhi有you準zhun分fen子zi離li子zi，因yin而er隻zhi能neng提ti供gong未wei知zhi化hua合he物wu的de分fen子zi量liang信xin息xi
，不bu能neng提ti供gong結jie構gou信xin息xi。很hen難nan用yong來lai做zuo定ding性xing分fen析xi
，可ke以yi用yong來lai定ding量liang分fen析xi。但dan單dan級jiMS如果不用軟電離源，而是EI之類的話
，就有碎片峰，可以提供分子結構信息。

LC-MS/MS采用串聯質譜，既能得到分子離子峰，又有碎片離子峰
，因而可以用來進行定性和定量分析。

一個基本相似之處是：他們的應用領域都適用於液相適用的領域。

質譜的突出特點是：它本身是有質量信息的，是可以靠這個質量信息定性或提供定性的一些依據的（還需要其它的一些定性儀器）。其次，質譜本身也有一個分離作用，就是按照質量的分離，如果液相分離了一次，那LC－MS就分離了兩次，而LC-MS/MS就分離了三次
，LC-MS3就分離了四次....（3級以上是離子阱質譜的特點）。

LC-MS和LC-MS/MS（或MSn）的區別是：

如果你關心的結果是你樣品中的主成分，而且是你已經知道的目標物，比如質控、有機合成後看一下純品、部分的農藥全分析工作、藥物合成中前導化合物的指導（合成一鍋就打一針看看合成得對不對）等等，都可以用LC-MS。因(yin)為(wei)它(ta)很(hen)便(bian)宜(yi)，操(cao)作(zuo)也(ye)很(hen)簡(jian)單(dan)。即(ji)使(shi)有(you)些(xie)東(dong)西(xi)液(ye)相(xiang)沒(mei)分(fen)開(kai)，但(dan)隻(zhi)要(yao)你(ni)關(guan)心(xin)的(de)是(shi)主(zhu)成(cheng)分(fen)，影(ying)響(xiang)都(dou)不(bu)大(da)。通(tong)過(guo)調(tiao)整(zheng)一(yi)下(xia)液(ye)相(xiang)條(tiao)件(jian)，或(huo)做(zuo)完(wan)掃(sao)描(miao)圖(tu)直(zhi)接(jie)看(kan)提(ti)取(qu)離(li)子(zi)圖(tu)
，或(huo)做(zuo)SIM都可以。這些領域用LC-MS/MS是大材小用，花這麼多錢是浪費。

而如果你關心的結果是：

（1）未知的東西，打一針LC-MS無法定性，需要更多的碎片信息
；

（2）是混合物中的痕量成分。

那你必須用LC-MS/MS：LC-MS/MS可以給出需要更多的碎片信息
，幫助你來定性
；LC-MS/MS可以降低背景噪音
，讓痕量組分的譜圖不受豐量物質的幹擾
；LC-MS/MS可以降低很多背景噪音，使你的化合物的靈敏度大幅提高，定量結果變好。

Q1：本人現在用三重四級杆LC-MS/MS定量分析目標物，但是沒有標準品。內標法該具體怎麼操作呢
？

Q2：資zi料liao說shuo先xian配pei製zhi一yi定ding重zhong量liang比bi的de待dai測ce組zu分fen和he內nei標biao樣yang品pin的de混hun合he物wu做zuo色se譜pu分fen析xi

，測ce量liang峰feng麵mian積ji
，做zuo重zhong量liang比bi和he麵mian積ji比bi的de關guan係xi曲qu線xian
，此ci曲qu線xian即ji為wei標biao準zhun曲qu線xian，如ru果guo這zhe樣yang的de話hua，沒mei有you標biao準zhun品pin怎zen麼me辦ban？

方法一：

（1）內標法進行定量分析，同樣需要待測物標準品。如果沒有待測物標準品就不能準確測量其含量，因為無法繪製標準曲線。

（2）meiyoudaicewubiaozhunpinbunengzhunqueceliangqihanliang，dankeyitongguojiaruneibiaodefangfaceliangdaicewudexiangduihanliang，keyibijiaodaicewuzaigeyangpinzhongdeduoshaojixiangchabeishu。

（3）用LC-MS-MS做定量一般都采用MRM的掃描方式
，你沒有待測物標準品，就無法建立和優化MRM掃描的質譜參數，這樣你隻能使用FULL SCAN或SIM的掃描方法。沒有待測物標準品，你也無法準確得到待測物在LC上shang的de保bao留liu時shi間jian，如ru果guo你ni的de樣yang品pin中zhong有you與yu待dai測ce物wu相xiang似si質zhi量liang數shu的de化hua合he物wu
，你ni得de到dao的de色se譜pu峰feng就jiu不bu會hui很hen純chun淨jing
，會hui對dui你ni判pan定ding哪na個ge是shi你ni的de待dai測ce化hua合he物wu產chan生sheng幹gan擾rao。

方法二：

沒有標準品，就隻用麵積相對定量。然後選用LC-MS/MS的SIM模式（樣品雜質比較少，選擇同位素豐度為100%的分子量，上下增減0.2）。考察因素導致的量的改變比較微量
，選擇一種物質為回收率指示物（反應液前處理前加入），一種物質為內標物（前處理後、液相小瓶中進樣測試前，在待測樣品中加入定量的內標物
，然後進行測試）。

Q1：LC-MS如何進行定量分析？

Q2：qingwenyezhilianyongzhongzhipupaochulaiyongyudingxingdetupushishenmeyangde，jiranshiyongzhipulaijinxingdingliangdehua，nasepubenshenpeizhideziwaijianceqipaochulaidetupuyongyuheyong？

Q3：液質聯用有SIM和全掃描的
，那麼一般在藥物代謝動力學試驗中一般用哪一種呢？尤其是在對體內藥物分析時
，內標法用於定量的質譜圖是什麼樣的？

質譜定量分析，使用的一般是LC-MS/MS,不使用LC-MS, 看一下質荷比，推測下分子量。UV可以用來定量，但是在有紫外吸收的幹擾峰的時候
，定量是不準的。LC-MS/MS使用母離子/子離子來進行定量，相對來說
，幹擾要少的多
，也比較準確，在PK/TK的應用很廣泛。這裏隻有LC-MS/MS定量的譜圖，僅供參考！

183.1/141.3 通道的是內標
，其他的兩個是化合物。

質譜定量中已經被廣泛接受的方式是MS/MS定量。這種定量常通過三級四極杆或離子阱質譜實現。要求使用MS/MS的原因是：許多化合物有同樣的質量。當使用第①個維度即單級質譜MS去定量時，也會缺乏特異性，尤其是對於像血液那樣的複雜的基質。第二個維度的MS（即MS/MS）在大多數情況下，能夠提供唯①的斷裂。合並特異的母離子質量和唯①的碎片離子信息
，可以選擇性地監測被定量的化合物。

Q1：我想用LC-Q-TOF-MS 來做代謝組學，因為是樣品是體液含有多種化合物
，想加入內標後先進行一個相對的定量來判斷含量發生變化的化合物
，怎樣去定量
？

Q2：用總離子流圖好像不合適
，如果利用峰麵積進行相對定量的話，用哪個圖比較合適

？必須得用標準品才能定性嗎？

LC-MS-MS定量分析使用SIM 或MRM模式。公認的MRM更為準確。SIM使用Q選擇性的濾過選中的分子量。但是分子量相同的化合物很多

，所以，如果樣品稍微複雜的話，SIM基本不合適。

MRM選擇母離子和子離子。使用Q過濾母離子，q 轟擊母離子
，TOF過濾子離子
，使子離子被檢測器檢測到。分子量相同
，轟擊後產生的子離子不一樣的幹擾離子就被排除了。所以，MRM模式是更為可靠的LC-MS定量分析方法。MRM檢測是離子對。

內nei標biao的de選xuan擇ze原yuan理li是shi結jie構gou基ji本ben和he待dai測ce化hua合he物wu類lei似si。結jie構gou相xiang同tong或huo類lei似si
，主zhu要yao是shi為wei了le滿man足zu被bei離li子zi化hua的de效xiao率lv與yu樣yang品pin類lei似si。這zhe就jiu是shi為wei什shen麼me很hen多duo都dou選xuan擇ze使shi用yong該gai化hua合he物wu或huo此ci類lei化hua合he物wu的de氘dao代dai化hua合he物wu。內nei標biao的de選xuan擇ze還hai要yao求qiu其qi分fen子zi量liang與yu待dai測ce物wu質zhi不bu重zhong合he(還需要盡量避開化合物的isotopic peak的m/z)，並且可以和待測物質分開。

如果使用MRM, 樣品被分開的話，那麼理論上來說總離子流圖上的每個峰都是代表一種物質。同時使用MRM模式，如果樣品們的分子量與子離子不重疊，那麼，即使在柱子中不被分開的化合物，也是可以認為在MS中被分開了。

文獻報道的液質中幾個峰
，MRM檢測到幾十個物質就是多個物質在同一時間從色譜柱跑出來了。雖然出峰時間一樣，但是每個化合物的peak應該是軟件中可以顯示出來的，隻不過報道中由於篇幅有限
，會被簡略掉。

定性的話，需要標品，retention time 需要一致。