液相色譜-質譜聯用（LC-MS）與液相二級質譜（LC-MS-MS）都是實驗室精密的檢測儀器，二者非常相似，但也有很大的區別，今天將這兩個進行對比，分析兩者的區別與聯係。

LC-MS可以通過采集質譜得到總離子色譜圖。由於電噴霧是一種軟電離源,通常很少或沒有碎片,譜(pu)圖(tu)中(zhong)隻(zhi)有(you)準(zhun)分(fen)子(zi)離(li)子(zi)
，因(yin)而(er)隻(zhi)能(neng)提(ti)供(gong)未(wei)知(zhi)化(hua)合(he)物(wu)的(de)分(fen)子(zi)量(liang)信(xin)息(xi)
，不(bu)能(neng)提(ti)供(gong)結(jie)構(gou)信(xin)息(xi)。很(hen)難(nan)用(yong)來(lai)做(zuo)定(ding)性(xing)分(fen)析(xi)

，可(ke)以(yi)用(yong)來(lai)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)。但(dan)單(dan)級(ji)MS如果不用軟電離源，而是EI之類的話，就有碎片峰，可以提供分子結構信息。

LC-MS/MS采用串聯質譜，既能得到分子離子峰
，又有碎片離子峰，因而可以用來進行定性和定量分析。

一個基本相似之處是：他們的應用領域都適用於液相適用的領域。

質譜的突出特點是：它本身是有質量信息的，是可以靠這個質量信息定性或提供定性的一些依據的（還需要其它的一些定性儀器）。其次
，質譜本身也有一個分離作用，就是按照質量的分離，如果液相分離了一次
，那LC－MS就分離了兩次
，而LC-MS/MS就分離了三次
，LC-MS3就分離了四次....（3級以上是離子阱質譜的特點）。

LC-MS和LC-MS/MS（或MSn）的區別是：

如果你關心的結果是你樣品中的主成分，而且是你已經知道的目標物，比如質控
、有機合成後看一下純品、部分的農藥全分析工作、藥物合成中前導化合物的指導（合成一鍋就打一針看看合成得對不對）等等

，都可以用LC-MS。因yin為wei它ta很hen便bian宜yi，操cao作zuo也ye很hen簡jian單dan。即ji時shi有you些xie東dong西xi液ye相xiang沒mei分fen開kai，但dan隻zhi要yao你ni關guan心xin的de是shi主zhu成cheng分fen，影ying響xiang都dou不bu大da。通tong過guo調tiao整zheng一yi下xia液ye相xiang條tiao件jian
，或huo做zuo完wan掃sao描miao圖tu直zhi接jie看kan提ti取qu離li子zi圖tu，或huo做zuoSIM都可以。這些領域用LC-MS/MS是大材小用，花這麼多錢是浪費。

而如果你關心的結果是：

（1）未知的東西，打一針LC-MS無法定性
，需要更多的碎片信息；

（2）是混合物中的痕量成分。

那你必須用LC-MS/MS：LC-MS/MS可以給出需要更多的碎片信息，幫助你來定性；LC-MS/MS可以降低背景噪音
，讓痕量組分的譜圖不受豐量物質的幹擾；LC-MS/MS可以降低很多背景噪音

，使你的化合物的靈敏度大幅提高，定量結果變好。

Q1：本人現在用三重四級杆LC-MS/MS定量分析目標物，但是沒有標準品。內標法該具體怎麼操作呢？

Q2：ziliaoshuoxianpeizhiyidingzhongliangbidedaicezufenheneibiaoyangpindehunhewuzuosepufenxi，celiangfengmianji
，zuozhongliangbihemianjibideguanxiquxian，ciquxianjiweibiaozhunquxian
，ruguozheyangdehua
，meiyoubiaozhunpinzenmeban


？

方法一：

（1）內標法進行定量分析，同樣需要待測物標準品。如果沒有待測物標準品就不能準確測量其含量，因為無法繪製標準曲線。

（2）meiyoudaicewubiaozhunpinbunengzhunqueceliangqihanliang
，dankeyitongguojiaruneibiaodefangfaceliangdaicewudexiangduihanliang，keyibijiaodaicewuzaigeyangpinzhongdeduoshaojixiangchabeishu。

（3）用LC-MS-MS做定量一般都采用MRM的掃描方式，你沒有待測物標準品，就無法建立和優化MRM掃描的質譜參數，這樣你隻能使用FULL SCAN或SIM的掃描方法。沒有待測物標準品，你也無法準確得到待測物在LCshangdebaoliushijian，ruguonideyangpinzhongyouyudaicewuxiangsizhiliangshudehuahewu，nidedaodesepufengjiubuhuihenchunjing，huiduinipandingnageshinidedaicehuahewuchanshengganrao。

方法二：

沒有標準品

，就隻用麵積相對定量。然後選用LC-MS/MS的SIM模式（樣品雜質比較少
，選擇同位素豐度為100%的分子量，上下增減0.2）。考察因素導致的量的改變比較微量，選擇一種物質為回收率指示物（反應液前處理前加入），一種物質為內標物（前處理後
、液相小瓶中進樣測試前，在待測樣品中加入定量的內標物，然後進行測試）。

Q1：LC-MS如何進行定量分析
？

Q2：請(qing)問(wen)液(ye)質(zhi)聯(lian)用(yong)中(zhong)質(zhi)譜(pu)跑(pao)出(chu)來(lai)用(yong)於(yu)定(ding)性(xing)的(de)圖(tu)譜(pu)是(shi)什(shen)麼(me)樣(yang)的(de)，既(ji)然(ran)是(shi)用(yong)質(zhi)譜(pu)來(lai)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)的(de)話(hua)，那(na)色(se)譜(pu)本(ben)身(shen)配(pei)置(zhi)的(de)紫(zi)外(wai)檢(jian)測(ce)器(qi)跑(pao)出(chu)來(lai)的(de)圖(tu)譜(pu)用(yong)於(yu)何(he)用(yong)？

Q3：液質聯用有SIM和全掃描的
，那麼一般在藥物代謝動力學試驗中一般用哪一種呢？尤其是在對體內藥物分析時，內標法用於定量的質譜圖是什麼樣的？

質譜定量分析
，使用的一般是LC-MS/MS,不使用LC-MS, 看一下質荷比
，推測下分子量。UV可以用來定量
，但是在有紫外吸收的幹擾峰的時候
，定量是不準的。LC-MS/MS使用母離子/子離子來進行定量，相對來說，幹擾要少的多，也比較準確，在PK/TK的應用很廣泛。這裏隻有LC-MS/MS定量的譜圖，僅供參考！

183.1/141.3 通道的是內標，其他的兩個是化合物。

質譜定量中已經被廣泛接受的方式是MS/MS定量。這種定量常通過三級四極杆或離子阱質譜實現。要求使用MS/MS的原因是：許多化合物有同樣的質量。當使用第①個維度即單級質譜MS去定量時
，也會缺乏特異性，尤其是對於像血液那樣的複雜的基質。第二個維度的MS（即MS/MS）在大多數情況下，能夠提供唯①的斷裂。合並特異的母離子質量和唯①的碎片離子信息
，可以選擇性地監測被定量的化合物。

Q1：我想用LC-Q-TOF-MS 來做代謝組學
，因為是樣品是體液含有多種化合物，想加入內標後先進行一個相對的定量來判斷含量發生變化的化合物
，怎樣去定量？

Q2：用總離子流圖好像不合適

，如果利用峰麵積進行相對定量的話，用哪個圖比較合適

？必須得用標準品才能定性嗎？

LC-MS-MS定量分析使用SIM 或MRM模式。公認的MRM更為準確。SIM使用Q選擇性的濾過選中的分子量。但是分子量相同的化合物很多，所以，如果樣品稍微複雜的話，SIM基本不合適。

MRM選擇母離子和子離子。使用Q過濾母離子
，q 轟擊母離子，TOF過濾子離子，使子離子被檢測器檢測到。分子量相同
，轟擊後產生的子離子不一樣的幹擾離子就被排除了。所以，MRM模式是更為可靠的LC-MS定量分析方法。MRM檢測是離子對。

neibiaodexuanzeyuanlishijiegoujibenhedaicehuahewuleisi。jiegouxiangtonghuoleisi，zhuyaoshiweilemanzubeilizihuadexiaolvyuyangpinleisi。zhejiushiweishenmehenduodouxuanzeshiyonggaihuahewuhuocileihuahewudedaodaihuahewu。neibiaodexuanzehaiyaoqiuqifenziliangyudaicewuzhibuzhonghe(還需要盡量避開化合物的isotopic peak的m/z)，並且可以和待測物質分開。

如果使用MRM, 樣品被分開的話
，那麼理論上來說總離子流圖上的每個峰都是代表一種物質。同時使用MRM模式，如果樣品們的分子量與子離子不重疊
，那麼，即使在柱子中不被分開的化合物
，也是可以認為在MS中被分開了。

文獻報道的液質中幾個峰，MRM檢測到幾十個物質就是多個物質在同一時間從色譜柱跑出來了。雖然出峰時間一樣
，但是每個化合物的peak應該是軟件中可以顯示出來的，隻不過報道中由於篇幅有限
，會被簡略掉。

定性的話
，需要標品，retention time 需要一致。

定量的話，需要先作標準曲線(峰麵積比與濃度)。