一般地說,根據樣品的性質決定采用何種液相色譜方法,然後再選擇不同類型的柱。即不同類型的柱則代表了不同的色譜方法。
不同種類色譜柱的差異在於柱結構、柱填料和柱尺寸的不同。
色譜柱有不同的尺寸(長度和內徑),分製備型、常規分析型和微型。不同類型柱的硬件也不同,(包括接頭、柱管等方麵),還有徑向加壓柱和夾套加熱柱等。
不同液相色譜法的尺寸根據需要可以選取,普通分析3~30cm長,內徑4~8mm。常用20cm長、4.6mm內徑的柱。製備型柱內徑一般為8mm、25cm長。微型柱內徑l~3mm,長10~20cm。不(bu)同(tong)的(de)填(tian)料(liao)分(fen)析(xi)的(de)效(xiao)果(guo)可(ke)能(neng)不(bu)同(tong),這(zhe)是(shi)因(yin)為(wei)生(sheng)產(chan)過(guo)程(cheng)不(bu)同(tong)所(suo)致(zhi)。同(tong)一(yi)廠(chang)商(shang)生(sheng)產(chan)的(de)同(tong)種(zhong)填(tian)料(liao)因(yin)批(pi)號(hao)不(bu)同(tong)也(ye)會(hui)有(you)差(cha)異(yi),這(zhe)種(zhong)差(cha)異(yi)可(ke)能(neng)從(cong)基(ji)質(zhi)就(jiu)開(kai)始(shi)(表麵積、雜質、特殊處理),還有鍵合的化學物質(一氯或三氯矽烷反應劑),不同廠家生產的填料還會因專利技術(預處理、鍵合過程、填裝技術)等不同而呈現較大差異。由於種種差異、僅能假設同一批號的柱有基本相同的性質。
多數柱填料基質采用多孔矽膠微粒,通常有球形和無定形兩種,具有不同的粒度、孔徑和表麵積。多孔聚合物微粒也適用於反相色譜。聚合物柱的流動相範圍廣,流動相pH值可在1至13之間。而矽膠基質pH僅能在2.5和7zhijian。xianran,juhewuzhuyaohaoyixie,danmuqianrengshiyiguijiaojizhidezhuweizhu。yuanzeshang,juhewuzhukeyikefuguijiaojizhizhudemouxiebuzu,danxuyaodaliangdeshiyanlaizhengshi,yaojinyibukaozhajuhewujizhitianliaodequanmianyouyuexing。
在實際工作中,選擇性能良好的色譜柱可得到好的結果,首先要注意柱徑、長度、填料種類和填料粒度。
評價色譜柱的好壞不僅隻是N數,還應考慮組分在柱上的保留、鍵合相表麵的物性、柱壓降以及峰不對稱因子As等。每一根新色譜柱都應標出詳細參數,主要內容包括公司名稱、柱名稱(商標)、柱填料、尺寸。附一張標準參考色譜圖,並標出色譜條件、樣品名稱、流動相組成、流速、柱溫、進樣體積、檢測器、峰的保留時間及峰名稱等。評價一根色譜柱的主要指標是:①塔板數N值;②峰不對稱因子As;③柱壓降;④鍵合相濃度。
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