一、目的:
建立Varian cary 100型紫外分光光度計標準操作規程,以保證Varian cary 100型紫外分光光度計的正確使用。
二、範圍:
適用於Varian cary 100型紫外分光光度計操作的全部行為。
三、責任:
中心化驗室對本SOP的實施全麵負責。
四、內容:
4.1測定前的準備工作
4.1.1接通電源並將電源開關打開至“ON”位置,依次打開顯示器、打印機及電腦主機進入Windows桌麵。
4.1.2將儀器電源開關打開至“I”位置,儀器開始自檢,自檢完畢後,預熱30分鍾左右再進行測定。
4.2吸收光譜測定
4.2.1參數設置 在Windows桌麵上用鼠標雙擊Cary winUV圖標,進入Cary winUV子菜單選擇Scan圖標並雙擊,進入Scan控製界麵。按Setup鍵,屏幕顯示參數設定條件表,根據實驗要求,對掃描起始波長和終止波長、測定量程方式、掃描控製參數、基線控製參數、是否參照掃描、是否打印參數等逐項進行設定或改變,待所需參數均設定好後應檢查1次,以確認所有參數均已正確設定,按OK鍵。
4.2.2將盛以對照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號位置,盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號位置,關緊樣品室門。在Scan控製界麵上按Zero鍵調零,調零完畢按Start鍵,出現Save AS子菜單,在file name目錄裏輸入樣品名,按Save鍵,出現Sample name屏幕,按OK鍵,儀器進行掃描。掃描完畢按Print鍵打印結果。
4.3單波長數據測定
4.3.1參數設置 在Windows桌麵上用鼠標雙擊Cary winUV圖標,進入Cary winUV子菜單選擇Simple Read圖標並雙擊,進入Simple Read控製界麵。按Setup鍵,屏幕顯示參數設定條件表,根據實驗要求,在Read at Wavelength選項裏設定所需波長;在Ave Time(sec)選項裏設定讀信號時間;在SWB選項裏設定光譜帶寬;在Y Mode選項裏設定測定量程方式;以吸收度顯示選ABS等逐項進行設定或改變,待所需參數均設定好後應檢查1次,以確認所有參數均已正確設定,按OK鍵。
4.3.2將盛以對照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號位置,盛以樣品溶液的比色皿放入“2”號位置,關緊樣品室門。按Zero鍵調零,調零完畢後在Simple Read控製界麵上按Read鍵即自動讀出測定結果,按Print鍵打印樣品結果。
4.4標準曲線測定
4.4.1設置參數 在Windows桌麵上用鼠標雙擊Cary winUV圖標,進入Cary winUV子菜單選擇Concentration圖標並雙擊,進入Concentration控製界麵。按Setup鍵,屏幕顯示參數設定條件表,根據實驗所需要求,對測定波長設定、對測定光譜帶寬、測定量程方式、曲線建立方法、標準品數量、標準品濃度、樣品數量、測量值單位、打印參數等逐項進行設定或改變,參數設定完畢,按OK鍵。
4.4.2將盛以對照溶液的比色皿放入樣品池室的“1”號位置,盛以最低濃度標準品溶液的比色皿放入“2”號位置,按Zero鍵調零,調零完畢後,在Concentration控製界麵上按Start鍵,進入Standard/Sample Selection控製界麵,按OK鍵,出現Save AS子菜單,在file name目錄裏輸入標準品名,按Save鍵,出現Present Standard控製界麵,按OK鍵。依次放入盛以由低濃度至高濃度的標準品溶液的比色皿至“2”號位置,儀器進行標準曲線測定並分析。
4.4.3標準品測完畢後,換上待測樣品溶液,按OK鍵,儀器將自動讀出測定結果。按Print鍵打印測定結果。
4.5樣品加溫功能
樣品如需加溫,則可使用此功能。將加溫控製器電源開關打開至“I”位置,接通泵的電源並把水泵放入預先裝滿2/3體積水的500ml燒杯裏。在加溫控製器的控製屏幕上按UP鍵或DOWN鍵設定所需溫度即可。
4.6關機
取出比色皿冼淨,依次關掉電腦主機、顯示器、打印機及儀器電源開關,拔掉電源插頭。
4.7注意事項
4.7.1比色皿使用完畢,立即用蒸餾水或有機溶液衝洗幹淨,並用柔軟清潔的紗布把水漬擦淨,以防表麵光潔受損,影響正常使用。
4.7.2使用的比色皿必須潔淨並保持樣品室的潔淨,否則會產生測量誤差。
4.7.3供試品溶液的吸收讀在0.3~0.7之間為宜,在此範圍誤差較小。
4.7.4設定的參數不恰當易得到不良的結果或圖譜,如狹縫太寬使吸收值降低,分辨率下降;狹縫太窄則出現過大的噪音,使讀數不準確。
4.7.5測定時注意樣品室門應關緊,否則引入過多的雜散光,使吸收度讀數下降。
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