高壓蒸汽滅菌器滅菌效果驗證一般有化學指示劑法
、留點溫度計法、自製測溫管法和生物指示劑法，每(mei)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)原(yuan)理(li)都(dou)是(shi)相(xiang)似(si)的(de)，主(zhu)要(yao)是(shi)通(tong)過(guo)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)時(shi)滅(mie)菌(jun)器(qi)裏(li)的(de)溫(wen)度(du)能(neng)否(fou)達(da)到(dao)要(yao)求(qiu)。我(wo)們(men)可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)選(xuan)擇(ze)其(qi)中(zhong)一(yi)種(zhong)或(huo)多(duo)種(zhong)方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)驗(yan)證(zheng)。

一、化學指示劑法

原理：化學指示劑在一定溫度與作用時間下，會受熱變色或變形，根據這一特點來判斷是否達到需要的滅菌參數。

一般實驗室常用的是3M壓(ya)力(li)滅(mie)菌(jun)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)
，這(zhe)種(zhong)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)是(shi)利(li)用(yong)滅(mie)菌(jun)前(qian)後(hou)膠(jiao)帶(dai)顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)來(lai)判(pan)斷(duan)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)。它(ta)是(shi)由(you)熱(re)敏(min)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)與(yu)顯(xian)色(se)劑(ji)及(ji)漆(qi)輔(fu)料(liao)製(zhi)成(cheng)油(you)墨(mo)
，並(bing)將(jiang)油(you)墨(mo)以(yi)條(tiao)紋(wen)狀(zhuang)印(yin)製(zhi)在(zai)特(te)製(zhi)的(de)一(yi)麵(mian)膠(jiao)紙(zhi)帶(dai)製(zhi)成(cheng)。指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)粘(zhan)貼(tie)於(yu)包(bao)裹(guo)外(wai)，長(chang)度(du)不(bu)低(di)於(yu)5cm
，並輕壓膠帶以增加粘性和封包效果
；在121℃持續20min或130℃持續4min後，膠帶上印有的斜行的白色指示線條會完全變黑


，成為黑色線條；如變色不均勻或不徹底，可認為該包裹不符合滅菌條件。

二、留點溫度計法

原理：留點溫度計法是利用水銀溫度計不回流的特性
，其原理跟傳統體溫計相似，可以指示滅菌器在滅菌過程中達到的最高溫度。

驗(yan)證(zheng)時(shi)把(ba)水(shui)銀(yin)溫(wen)度(du)計(ji)放(fang)在(zai)盛(sheng)水(shui)的(de)大(da)三(san)角(jiao)瓶(ping)裏(li)，滅(mie)菌(jun)時(shi)把(ba)三(san)角(jiao)瓶(ping)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)上(shang)部(bu)和(he)下(xia)部(bu)，滅(mie)菌(jun)結(jie)束(shu)後(hou)看(kan)水(shui)銀(yin)溫(wen)度(du)計(ji)的(de)溫(wen)度(du)和(he)要(yao)求(qiu)溫(wen)度(du)是(shi)否(fou)一(yi)致(zhi)。此法隻能驗證溫度
，不能指示滅菌時間是否達到要求，因此是滅菌器驗證的最低標準。

三
、自製測溫管法

原理：利(li)用(yong)一(yi)些(xie)化(hua)學(xue)藥(yao)品(pin)受(shou)熱(re)熔(rong)化(hua)後(hou)再(zai)冷(leng)卻(que)
，晶(jing)體(ti)的(de)外(wai)形(xing)不(bu)同(tong)的(de)特(te)性(xing)，把(ba)化(hua)學(xue)藥(yao)品(pin)密(mi)封(feng)在(zai)小(xiao)玻(bo)璃(li)管(guan)內(nei)，滅(mie)菌(jun)時(shi)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)器(qi)裏(li)
，滅(mie)菌(jun)完(wan)後(hou)觀(guan)察(cha)晶(jing)體(ti)的(de)形(xing)狀(zhuang)
，就(jiu)可(ke)以(yi)判(pan)斷(duan)溫(wen)度(du)是(shi)否(fou)達(da)標(biao)。

常用的試劑是苯甲酸
，苯甲酸的熔點為121-123℃，跟我們要求的滅菌器的滅菌溫度基(ji)本(ben)吻(wen)合(he)
，因(yin)此(ci)滅(mie)菌(jun)時(shi)把(ba)固(gu)體(ti)苯(ben)甲(jia)酸(suan)密(mi)封(feng)在(zai)小(xiao)玻(bo)璃(li)管(guan)內(nei)放(fang)進(jin)滅(mie)菌(jun)器(qi)，滅(mie)菌(jun)結(jie)束(shu)就(jiu)可(ke)以(yi)觀(guan)察(cha)苯(ben)甲(jia)酸(suan)的(de)狀(zhuang)態(tai)來(lai)驗(yan)證(zheng)滅(mie)菌(jun)器(qi)是(shi)否(fou)達(da)到(dao)了(le)要(yao)求(qiu)溫(wen)度(du)。這(zhe)種(zhong)方(fang)法(fa)的(de)局(ju)限(xian)跟(gen)留(liu)點(dian)溫(wen)度(du)計(ji)法(fa)相(xiang)同(tong)

，也(ye)隻能指示滅菌時的溫度
，對滅菌時間是否達到要求無法判斷。

四、生物指示劑法

原理：利用非致病性的嗜熱脂肪杆菌的芽孢作為指示菌，來測定熱力滅菌的de效xiao果guo。嗜shi熱re脂zhi肪fang杆gan菌jun的de芽ya孢bao對dui熱re的de抗kang性xing較jiao強qiang，其qi耐nai熱re能neng力li與yu病bing原yuan微wei生sheng物wu肉rou毒du梭suo菌jun芽ya孢bao相xiang似si，以yi此ci為wei指zhi示shi菌jun
，驗yan證zheng滅mie菌jun器qi能neng否fou達da到dao滅mie菌jun要yao求qiu。

生物指示劑分為三種：芽孢懸液、芽胞菌片
、菌片和培養基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點：下層的前
、中
、後和上層、中層的中央點。滅菌後取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白腖水中，55-60℃培養2-7天，若培養基澄清
、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好；如果培養基黃色渾濁，說明芽孢未被殺滅，滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。

目前實驗室還常用商品化的生物指示管

，其原理與芽孢懸液和芽胞菌片相同，指示管中有嗜熱脂肪芽孢杆菌芽(ya)孢(bao)和(he)培(pei)養(yang)液(ye)玻(bo)璃(li)小(xiao)管(guan)，將(jiang)指(zhi)示(shi)管(guan)放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)容(rong)器(qi)內(nei)的(de)各(ge)個(ge)點(dian)上(shang)，高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)後(hou)
，將(jiang)管(guan)中(zhong)盛(sheng)培(pei)養(yang)液(ye)的(de)玻(bo)璃(li)管(guan)擠(ji)碎(sui)，培(pei)養(yang)液(ye)從(cong)內(nei)部(bu)的(de)小(xiao)管(guan)中(zhong)被(bei)放(fang)出(chu)，放(fang)入(ru)56℃培養箱中培養，同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格，指示管內的芽孢複活後生長會改變肉湯的顏色是肉湯變為黃色；若是滅菌器滅菌效果良好則管內芽孢被滅活不再生長，肉湯仍舊是原來的紫色。

對(dui)於(yu)滅(mie)菌(jun)器(qi)的(de)效(xiao)果(guo)驗(yan)證(zheng)，目(mu)前(qian)並(bing)沒(mei)有(you)相(xiang)關(guan)標(biao)準(zhun)嚴(yan)格(ge)的(de)要(yao)求(qiu)驗(yan)證(zheng)的(de)頻(pin)次(ci)
，但(dan)是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)應(ying)當(dang)自(zi)行(xing)製(zhi)定(ding)驗(yan)證(zheng)頻(pin)次(ci)規(gui)定(ding)
，並(bing)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。從(cong)操(cao)作(zuo)性(xing)和(he)驗(yan)證(zheng)結(jie)論(lun)兩(liang)個(ge)方(fang)麵(mian)出(chu)發(fa)
，小(xiao)編(bian)推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)指(zhi)示(shi)膠(jiao)帶(dai)和(he)生(sheng)物(wu)指(zhi)示(shi)管(guan)
，因(yin)為(wei)這(zhe)兩(liang)種(zhong)方(fang)法(fa)操(cao)作(zuo)簡(jian)單(dan)，可(ke)以(yi)對(dui)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)進(jin)行(xing)全(quan)麵(mian)的(de)驗(yan)證(zheng)。