顯微標本的製作技術是組織學，胚胎學，生理學及細胞學等學科研究觀察細胞、組織的生理、病(bing)理(li)形(xing)態(tai)變(bian)化(hua)的(de)一(yi)種(zhong)主(zhu)要(yao)方(fang)法(fa)。大(da)多(duo)數(shu)的(de)生(sheng)物(wu)材(cai)料(liao)
，在(zai)自(zi)然(ran)狀(zhuang)態(tai)下(xia)是(shi)不(bu)適(shi)合(he)顯(xian)微(wei)觀(guan)察(cha)的(de)，也(ye)無(wu)法(fa)看(kan)到(dao)其(qi)內(nei)部(bu)結(jie)構(gou)。因(yin)為(wei)材(cai)料(liao)較(jiao)厚(hou)，光(guang)線(xian)不(bu)易(yi)透(tou)過(guo)
，以(yi)致(zhi)不(bu)易(yi)看(kan)清(qing)其(qi)結(jie)構(gou)，另(ling)外(wai)細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)各(ge)個(ge)結(jie)構(gou)，由(you)於(yu)其(qi)折(zhe)射(she)率(lv)相(xiang)差(cha)很(hen)小(xiao)，即(ji)使(shi)光(guang)線(xian)可(ke)透(tou)過(guo)，也(ye)難(nan)以(yi)辯(bian)明(ming)。但(dan)在(zai)經(jing)過(guo)固(gu)定(ding)
，脫(tuo)水(shui)，透(tou)明(ming)，包(bao)埋(mai)等(deng)手(shou)續(xu)後(hou)就(jiu)可(ke)把(ba)材(cai)料(liao)切(qie)成(cheng)較(jiao)薄(bo)的(de)片(pian)子(zi)，再(zai)用(yong)不(bu)同(tong)的(de)染(ran)色(se)方(fang)法(fa)就(jiu)可(ke)以(yi)顯(xian)示(shi)不(bu)同(tong)細(xi)胞(bao)組(zu)織(zhi)的(de)形(xing)態(tai)及(ji)其(qi)中(zhong)某(mou)些(xie)化(hua)學(xue)成(cheng)份(fen)含(han)量(liang)的(de)變(bian)化(hua)，就(jiu)可(ke)以(yi)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)清(qing)楚(chu)的(de)看(kan)到(dao)其(qi)中(zhong)不(bu)同(tong)的(de)區(qu)域(yu)組(zu)分(fen)狀(zhuang)態(tai)
，切(qie)片(pian)也(ye)便(bian)於(yu)保(bao)存(cun)

，所(suo)以(yi)是(shi)教(jiao)學(xue)和(he)科(ke)研(yan)中(zhong)常(chang)用(yong)的(de)方(fang)法(fa)。

二、實驗方法

生物顯微製片有許多不同的方法
，一般可分為非切片法與切片法兩大類：
非切片法有塗片、鋪片、壓片、磨片、整裝片等。
切片法又包括石蠟切片法、火棉膠切片法、冰凍切片法等。
顯微製片技術雖是生物學中很基本的操作技術，但由於生物材料的個體差異

，化學試劑 的(de)多(duo)樣(yang)性(xing)，因(yin)此(ci)操(cao)作(zuo)技(ji)術(shu)相(xiang)當(dang)細(xi)致(zhi)而(er)複(fu)雜(za)
，方(fang)法(fa)也(ye)很(hen)多(duo)，每(mei)一(yi)步(bu)驟(zhou)的(de)失(shi)誤(wu)都(dou)可(ke)導(dao)致(zhi)整(zheng)體(ti)的(de)失(shi)敗(bai)，因(yin)此(ci)需(xu)要(yao)耐(nai)心(xin)細(xi)致(zhi)，不(bu)斷(duan)總(zong)結(jie)經(jing)驗(yan)
，才(cai)能(neng)得(de)到(dao)較(jiao)好(hao)的(de)結(jie)果(guo)。

即ji不bu用yong切qie片pian機ji，不bu經jing切qie片pian手shou續xu而er製zhi成cheng切qie片pian的de方fang法fa，根gen據ju材cai料liao性xing質zhi的de不bu同tong，有you不bu同tong的de處chu理li方fang法fa，該gai類lei方fang法fa操cao作zuo簡jian單dan快kuai捷jie

，其qi中zhong鋪pu片pian法fa，封feng藏zang法fa可ke使shi原yuan有you組zu織zhi結jie構gou不bu被bei破po壞huai，塗tu片pian法fa，壓ya片pian法fa彌mi補bu了le用yong包bao埋mai
，切qie片pian法fa所suo不bu可ke能neng觀guan察cha清qing楚chu的de不bu足zu，因yin此ci是shi顯xian微wei標biao本ben製zhi備bei的de中zhong常chang用yong的de手shou段duan。
1.1 塗片法
主要用於血液、精液、尿液

、痰液
、微生物等不能切片成薄片的液態顆粒性材料
，可在載玻片上塗成單層細胞，再經固定，脫水，染色等手段製成永久標本。
1.2 鋪片法
主要用於動、植物組織的表皮層觀察
，可活體取待觀察動、植物組織，用尖鑷子撕去一層表皮，迅速平鋪在載玻片上。 如: 洋蔥表皮細胞的鋪片製備。
1.3 壓片法
yixiejiaoyounen，rouruandecailiaokejiangqizhizaibopianshang，yongxiaojiepoudaojiangqifensan，jiaranliaoyidi
，zaigaishanggaibopian，yongmuzhichuizhiyonglijiya，shizuzhisanchengyibopian，zaijinxingguancha
，ruzhiwugenjianguancharanseti，huafenliguanchafayujieduandeng。
1.4 離析法
該方法是利用化學試劑 使組織的細胞間質溶解
，使細胞能分散成單個個體。經染色

，脫水，透明即可觀察其個體形態
，適用於肌肉
，葉片

，莖等部位。
1.5 磨片(Ground section)
用於很堅硬的組織
，如骨和牙。

2 、切片法
切片法是必須依靠手或切片機將組織切成薄片來進行觀察的方法
，為了能清晰地觀察到動
、zhiwudezuzhijiegoujixibaoxingtai，bixuxianjingguoyixiliebuzhoujiangzuzhineishenrumouxiezhichiwuzhi
，shizuzhibianyingyiliyuqiechengbopian
，genjusuoyongzhichijidezhongleibutong，kefenweitushouqiepianfa，shilaqiepianfa，huomianjiaoqiefa
，bingdongqiepianfadengleixing
，qiechengbopianhouhaixuyaoqula，ranse，tuoshui
，toumingdengbuzhou，jiangqizhichengyongjiubiaoben。
下邊以石蠟切片為例，介紹顯微標本的製備方法。

2.1 取材
根據不同的實驗目的，選擇相應的材料，材料要求新鮮
、準確、完整，材料要避免擠壓
、挫傷
、幹枯。
所采集材料應立即放入固定劑，並編號，注明采集時間

、地點
、名稱
、組織部位，所取組織塊要大小適當

，即要能說明問題
，又要考慮固定劑的穿透能力。
一般組織學取材稍大，細胞學取材稍小，植物組織取材稍小，動物組織取材要稍大。

2.1.1動物的麻醉和殺死
從活的動物體上采取材料不象采集植物材料那麼容易
，因為在不施加麻醉的情況下
，有的動物會收縮(如蚯蚓
、水蛭)，有的會騷動(如蛙、鼠)，使(shi)我(wo)們(men)無(wu)法(fa)下(xia)手(shou)。但(dan)製(zhi)片(pian)所(suo)需(xu)的(de)材(cai)料(liao)又(you)要(yao)求(qiu)越(yue)新(xin)鮮(xian)越(yue)好(hao)，尤(you)其(qi)是(shi)細(xi)胞(bao)學(xue)方(fang)麵(mian)的(de)研(yan)究(jiu)對(dui)材(cai)料(liao)的(de)新(xin)鮮(xian)程(cheng)度(du)要(yao)求(qiu)更(geng)嚴(yan)。因(yin)此(ci)，要(yao)割(ge)取(qu)生(sheng)活(huo)著(zhe)的(de)動(dong)物(wu)組(zu)織(zhi)，在(zai)一(yi)般(ban)情(qing)況(kuang)下(xia)，就(jiu)要(yao)對(dui)動(dong)物(wu)施(shi)行(xing)麻(ma)醉(zui)，然(ran)後(hou)再(zai)割(ge)取(qu)材(cai)料(liao)加(jia)以(yi)固(gu)定(ding)。但(dan)是(shi)，所(suo)用(yong)的(de)麻(ma)醉(zui)藥(yao)品(pin)，必(bi)須(xu)以(yi)不(bu)影(ying)響(xiang)細(xi)胞(bao)結(jie)構(gou)為(wei)原(yuan)則(ze)。

若是一般的組織學製片，要求不太嚴格的話則可將動物先殺死然後速取其組織進行固定。蛙、蟾蜍
、鼠等較小的動物
，可用斷頭法殺死，即用普通剪刀剪斷頸部。較大的動物，如大竺鼠
、免

、貓等可用木槌猛擊頭後部，使其昏倒，或用50m1的注射器從耳靜脈向心髒注入空氣
，使動物發生急性空氣栓塞痙攣而死。

上述動物若需麻醉後取材
，則可用脫脂棉球蘸氯仿或乙醚、置於動物的鼻尖部，令其吸入麻醉。大動物(狗、猴等)應用氨基甲酸乙酯作靜脈注射麻醉．劑量一般為每kg動物體重用1 g。麻醉後的動物也需放血後進行取材固定。
昆蟲等小動物可投入充滿氯仿或乙醚蒸氣的大口瓶中，令其麻醉。若要殺死
，可將其投入含氰化鉀的毒瓶中。

2.1.2動物組織塊的切割
割取動物組織塊時，需注意以下幾點：
第一，要考慮所取的材料應包括各髒器的重要結構或全部結構
，如消化管就應包括粘膜、粘膜下層

、肌層和外膜四層結構。若所取的器官太大，不易全部製片時
，則可切取能代表該器官的部分材料，如狗的腎髒，可切取包括皮質
、髓質和腎盂的一部分為材料。
第二，應注意切割方向．如在管狀器官(腸等)取材時，一般是取其橫切麵製片，但要觀察小腸的環行皺壁時，就應取其縱切麵製片。
第三，組織塊必須切得小而薄。細胞學製片的組織塊不能超過2mm，一般組織塊的大小以0.5*0.5*0.2cm為宜
，柔軟組織不易切小,可先取稍大的組織塊固定2 - 3h。等組織稍硬後再切成薄的小塊繼續固定。
2.2固定
割取組織塊後

，應立即進行固定。
固定是製片極為關鍵的一個步驟
，製片質量的優劣。除與材料的新鮮程度有關外

，還取決於最初的固定是否適當和完全。

2.2.1固定的意義
新鮮的組織被割取後,由於細胞內酶的作用和細菌的繁殖
，可引起組織的自溶和腐敗。因此，割取組織塊後，應立即采用一 種方法．將組織盡可能保持原有的形態結構，且有利於保存和適於製片的操作，這一步驟稱為固定。

固定的目的和作用在於：
①防止組織自溶和腐敗
；
②使細胞內的蛋白質、糖
、脂肪等各種成分沉澱保存下來從而保存細胞的各種組成成分使其保持與生活時相近似的形態和結構
；
③yinchendianjininggudeguanxi
，shixibaoneibutongdechengfenchanshengbutongdezheguanglv，zaochengguangxueshangdechabieshiyuanlaizaishenghuoqingkuangxiakanbuqingchudejiegoubiandeqingxiyijian，qieyoudegudingjihaiyouzhuranzuoyong(如醋酸、苦味酸)，從而使細胞各部易於染色
；
④固定劑還兼有硬化作用
，使柔軟組織硬化而不易變形，有利於操作。

2.2.2固定的方法
固定有物理方法和化學方法兩種。
物理方法固定有幹燥、高熱和低溫騾冷等。例如
，血液塗片就是幹燥固定；細菌塗片可用加熱法固定；許多組織化學反應的製片是以低溫騾冷固定作冰凍切片的。
化學方法固定就是用化學試劑配製成固定液使之固定。

2.2.3固定液的選擇
固定液的種類很多。可分為兩大類：簡單固定液和混合固定液。
簡單固定液又稱單純固定液

，就是用一種化學試劑作為固定液，如乙醇、甲醛溶液、冰醋酸等,它們隻是對細胞的某種成分固定得較好；不能將細胞所有的成分都保存下來。如升汞固定蛋白質
、冰醋酸固定核蛋白、無水乙醇可固定糖原等，單純固定液是有局限性的。
混合固定液就是用幾種化學藥品，按一定的比例混合配製而成的

，由於各種藥品的優缺點互相彌補，因此可產生較好的效果。

2.2.4常用的固定液

福爾馬林—醋酸—酒精混合固定液（FAA液）
是植物製片技術中較為良好的固定液和保存液。除單細胞和絲狀藻類外，均可用此液固定．也通用於昆蟲和甲殼類的固定。

FAA液配方：
福爾馬林 5m1
冰醋酸 5m1
50％或70％酒精 90m1

Bouin氏液
是常用的良好固定液，廣泛應用於一般動物組織

、昆蟲組織、無脊椎動物的卵和幼蟲，以及胚胎學材料的固定。也適用於裸子植物的雌配子體和被子植物的胚囊的固定。
Bouin氏液配方：
苦味酸飽和水溶液 75份
福爾馬林 25份
冰醋酸 5份
此液穿透迅速而均勻，使組織收縮少，不使組織變硬變脆，著色良好。一般動物組織固定12—24h，小塊組織數小時即可。固定後直接入70％酒精中洗去黃色，但留一點黃色對染色並無妨礙。植物材料的固定時間為12—48h。

2.2.5固定的注意事項
(1)固定的材料越新鮮越好。因此，采集或割取後須立即投入預先準備好的固定液中進行固定
，切勿耽誤。
(2)材料大小以直徑不超過5mm為宜，材料與固定液的比例為 1:20。
(3)根據材料的性質和製片的目的選擇固定液。
(4)所固定的植物材料
，若表麵有毛茸或其它不易穿透的物質，則可用含有酒精的固定液固定。
(5)含有氣泡的材料投入團定液後，材料不會下沉，故須將氣泡抽出使材料下沉。最簡易的抽氣方法是將材料和固定液一並例入10ml的注射器中
，抽動幾次。也小用抽氣裝置進行抽氣。

(6)固定時，要防止材料變形。
(7)外有被膜，而內部站構又極易鬆散的器官，應將整個器官投入固定液2—2h後，再將其修成小塊材料繼續則定。
(8)含行粘液、汙物或血液的材料需用生理鹽水洗淨後．再行固定。
(9)材料投入固定液後．須經常搖晃。
(10) 容器外需貼標簽。

2.3 脫水
脫水是用一種即能與水又能與透明液混合的液體來逐漸置換樣品中遊離的水。
現采用的脫水劑一般是丙酮或乙醇來進行梯度脫水，脫水的時間
，可根據組織的類型，大小而定。
脫水的過程：一般是30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→80%→90%→100% →100%
脫水應逐步而不應跨越太大進行，否則將引起組織強烈的收縮或變形，在經無水乙醇處理時，應保證試劑的純度。

2.4 透明
透明是用一種即能與乙醇又能與包埋介質互溶的液體來置換樣品中的乙醇
，從而為最終的包埋創造一個有利的條件。 現采用的透明劑一般是二甲苯，甲苯，氯仿等。
其過程為： 1/3二甲苯+2/3乙醇混合液→1/2二甲苯+1/2乙醇混合液→2/3二甲苯+1/3乙醇混合液→二甲苯→二甲苯
erjiabenshishiyongzuiguangfandeyizhongtoumingji，tajuyoushentouliqiang
，rongjieshilaliangda，youyihuifadeyoudian，qiquedianshiyishizuzhishousuo，bianying，biancui，yincitoumingshijianyinggenjuzuzhikuaidaxiaojizhidizhuoqingerding。

2.5 滲蠟
jiangwanchengtoumingbuzhoudezuzhikuaijinrutoumingjiyushilahunheyezhong，buduantigaoshiladebili，zhizhiyongshilawanquanzhihuanlezuzhikuaizhongdetoumingji

，bianyujinhoudebaoliyuqiepian。 石蠟有液態與固態二種
，滲蠟要在恒定溫箱（60°c）中進行，以保證石蠟處於液態中。

2.6 包埋
樣(yang)品(pin)經(jing)石(shi)蠟(la)滲(shen)透(tou)後(hou)，其(qi)內(nei)部(bu)間(jian)隙(xi)已(yi)完(wan)全(quan)被(bei)石(shi)蠟(la)占(zhan)據(ju)，此(ci)時(shi)還(hai)需(xu)要(yao)用(yong)同(tong)種(zhong)硬(ying)度(du)的(de)石(shi)蠟(la)包(bao)埋(mai)成(cheng)蠟(la)塊(kuai)以(yi)利(li)於(yu)後(hou)邊(bian)的(de)切(qie)片(pian)，包(bao)埋(mai)可(ke)用(yong)相(xiang)同(tong)的(de)器(qi)具(ju)，也(ye)可(ke)折(zhe)疊(die)一(yi)牛(niu)皮(pi)紙(zhi)盒(he)。
將液態石蠟緩緩倒入紙盒中
，再用鑷子輕輕將浸好蠟的組織塊夾入紙盒，擺好位置，待石蠟冷卻成固態即包埋完畢。
至zhi此ci
，一yi塊kuai組zu織zhi已yi完wan成cheng前qian處chu理li過guo程cheng，可ke以yi切qie片pian，前qian邊bian的de步bu驟zhou看kan來lai既ji無wu高gao深shen的de理li論lun，又you無wu複fu雜za的de技ji術shu，一yi切qie看kan似si簡jian單dan
，但dan一yi步bu做zuo不bu到dao都dou會hui造zao成cheng整zheng個ge製zhi片pian的de前qian功gong盡jin棄qi。

我們可以看到：
①水和酒精可以相溶。
②酒精和二甲苯相溶。
③二甲苯和石蠟可以相溶。
因為以上相鄰步驟所使用的液體均可以互溶，所以保證每一步驟液體能置換完全。
水shui和he二er甲jia苯ben不bu能neng相xiang溶rong，乙yi醇chun和he石shi蠟la不bu能neng相xiang溶rong
，所suo以yi如ru果guo有you一yi個ge步bu驟zhou的de處chu理li不bu徹che底di
，殘can留liu的de液ye體ti帶dai到dao下xia一yi個ge步bu驟zhou將jiang不bu能neng互hu溶rong
，最zui終zhong帶dai到dao滲shen蠟la步bu驟zhou中zhong，成cheng為wei細xi小xiao的de空kong洞dong，以yi至zhi不bu能neng成cheng為wei質zhi地di致zhi密mi的de石shi蠟la塊kuai，也ye就jiu切qie不bu成cheng良liang好hao的de切qie片pian。

2.7 切片
修塊： 切片前需修整蠟塊，即將包埋好的一大塊蠟塊切開，使每一小塊都含有一塊組織

，從切麵看組織周圍的石蠟相等。
固著：將修好的蠟塊粘在大小適宜的樣品台上，以便於固定在切片機上。
切片：一手持毛筆
，一手轉動切片機，切片的蠟片連成一長條蠟帶。切下的蠟帶放在一幹淨黑紙上。
貼片：用小刀根據需要切成數段
，分別用粘片劑貼在幹淨載玻片上。在恒溫展片台上展平
，烘幹。

2.8.1染料
、染色液染料必須具備兩個條件：
①要具有顏色
②和被染物體之間具有親和力。
ruguozhiyouyanseeryubeiranwutizhijianwuqinheli，nazhinengshiyanliaohuohesewuzhi
，erbushiranliao。ranliaodeyanseheqinhelidoushiyoufenzijiegoujuedingde，jiyouchanshengyansedefasetuanheyuzuzhichanshengqinhelidezhusetuansuojueding。
發色團：能使染料分子產生顏色的原子團稱為發色團，也就是能吸收一定波長的光線並因之而呈現顏色的化學結構。
助色團：能使染料對織物纖維或組織成分產生親和力的原子團稱為助色團，也就是使化合物具有成鹽性質的原子團。

2.8.2染色劑的分類
2.8.2.1根據來源分
(l)天然染色劑
此類染色劑是從動、植物體中提取的，為天然產物
，產量少。目前常用的有蘇木精
、洋紅、地衣紅和靛藍等。其中最常用的為蘇木精和洋紅。
(2)合成染色劑
全是由芳香環或具有芳香性的雜環化合物所構成。最早是由煤焦油蒸餾產物合成而得的，所以又稱為煤焦油染料。
除上述兩類外，在生物 染色中還使用一些無機化合物，如硝酸銀

、氯化金、鋨酸等。

2.8.2.2根據用途分
(l)細胞核染色劑
用於細胞核的染色劑有天然染色劑的蘇木精、洋紅以及合成染色劑中的番紅


、結品紫、硫堇

、甲苯胺藍、甲基綠、美藍、孔雀綠和焦油紫等。
(2)細胞質染色劑
用於細胞質的染色劑有合成染色劑中的曙紅、亮綠、橘黃G、酸性品紅、苦味酸和水溶性苯胺藍等。
（3）脂質染色劑
用於顯示脂質的染色劑有合成染色劑中的蘇丹III
、蘇丹Iv、硫酸尼羅藍及油紅等。

2.8.2.3根據染色劑的化學性質分
堿性染色劑
、酸性染色劑和中性染色劑。
堿性、酸性和中性染色劑都是由一種酸和一種堿所構成的鹽類。
堿(jian)性(xing)染(ran)色(se)劑(ji)和(he)酸(suan)性(xing)染(ran)色(se)劑(ji)的(de)主(zhu)要(yao)區(qu)別(bie)，就(jiu)在(zai)於(yu)染(ran)色(se)劑(ji)的(de)主(zhu)要(yao)有(you)色(se)部(bu)分(fen)是(shi)陽(yang)離(li)子(zi)還(hai)是(shi)陰(yin)離(li)子(zi)。若(ruo)染(ran)色(se)劑(ji)電(dian)離(li)後(hou)，其(qi)分(fen)子(zi)的(de)主(zhu)要(yao)部(bu)分(fen)成(cheng)陽(yang)離(li)子(zi)為(wei)堿(jian)性(xing)染(ran)色(se)劑(ji)．若電離後
，其分子的主要部分為陰離子即為酸性染色劑。

2.8.2染色原理
有關染色的理論至今是一個並末完全清楚的很複雜的問題。目前一般還是從物理和化學的作用來解釋各種組織或細胞的染色現象。
2.8.2.1染色的物理作用
此理論認為組織細胞的染色是以物理作用為基礎的，主要是依靠下列三種物理作用的一種或全部，使染色劑進入組織或細胞內。
(1)毛細管作用及滲透作用 但染色劑與組織細胞沒有牢固的結合
(2)吸收作用 又you稱cheng溶rong解jie學xue說shuo。這zhe種zhong學xue說shuo認ren為wei組zu織zhi細xi胞bao所suo以yi能neng被bei染ran色se，主zhu要yao是shi吸xi收shou作zuo用yong所suo致zhi。組zu織zhi吸xi收shou染ran色se劑ji
，作zuo牢lao固gu的de結jie合he。組zu織zhi的de著zhe色se與yu溶rong液ye的de顏yan色se相xiang同tong


，但dan不bu一yi定ding和he幹gan燥zao染ran色se劑ji的de顏yan色se相xiang同tong。

例li如ru，品pin紅hong溶rong液ye為wei紅hong色se，所suo染ran組zu織zhi也ye為wei紅hong色se，而er幹gan燥zao的de品pin紅hong則ze為wei綠lv色se。蘇su丹dan類lei染ran色se劑ji使shi脂zhi質zhi著zhe色se，是shi一yi種zhong溶rong解jie現xian象xiang。因yin為wei蘇su丹dan類lei染ran色se劑ji在zai脂zhi質zhi中zhong的de溶rong解jie度du大da於yu在zai酒jiu精jing等deng溶rong劑ji中zhong的de溶rong解jie度du。當dang蘇su丹dan類lei的de酒jiu精jing溶rong液ye與yu組zu織zhi細xi胞bao中zhong的de脂zhi質zhi接jie觸chu時shi染ran色se劑ji就jiu從cong酒jiu精jing中zhong溶rong解jie到dao脂zhi質zhi中zhong，從cong而er使shi其qi著zhe色se。
(3)吸附作用 吸附作用是固體物質的特性，即較大的物體能從周圍溶液(染液)中吸附一些小顆粒(化合物或離子)到自身的特性。細胞中各種蛋白質或膠體有不同的吸附麵，因此能選擇性地吸收不同的離子，即某種蛋白質對某種染色劑有吸附作用,而對別種染色劑無吸附作用
，這就可以解釋鑒別染色現象。

2.8.2.2染色的化學作用
化學作用的主要理論根據 是染色劑的性質可分為酸性
、堿性和中性染色劑，而動、植物的細胞內—般也可區分為酸性(陰離子)和堿性(陽離子)部分。當堿性染色劑溶液中的有色部分成為陽離子時
，就能與細胞的陰離子(酸件部分)較牢固地結合，當酸性染色劑溶液中的有色部分成為陰離子時，就能與細胞內的陽離子(堿性部分)較牢固地結合。
例如
，細胞核，尤其是核內的染色質
，主要由核酸組成，是酸性的組成成分．故和堿性染色劑(蘇木精)的親和力很強，易於著色。細胞質含堿性物質，故和酸性染色劑(曙紅)的親和力很大，易於著色。

所以，在蘇木精—曙紅(H．E．)ransezhong，xibaohebeijianxingransejisumujingsuoran，xibaozhibeisuanxingransejishuhongsuoran。zheyejiushixibaoheshishijianxingde，xibaozhishishisuanxingde。churansezhiwai，zhanyeheruangudejizhidengdoushishijianxingde
，xibaozhineihandemouxiekeliyeweishisuanxing。xuzhuyideshishijianxingheshisuanxingshixiangduierbushijueduide，ruoxibaozaijianxingransejirongyezhongtingliuguojiu，zexibaozhiyekeranshangjianxingransejideyanse。mouxiexibao(如血細胞）具有特殊性質，能和中性染色劑發生親和力而結合。
由此可見

，細胞各成分的染色強弱是與細胞成分及染色劑的性質有密切關係：兩者之間的親和力強
，染色就深
；親和力弱或無，染色也就淺或無。
但是，染色的實際情況是極為複雜的
，組織細胞的染色作用，還隨所用溶液的pH值而變動。

2.8.3染色劑和染色液的配製
Deiafield氏蘇木精
Deiafield氏蘇木精配方
蘇木精 4g
無水酒精 25m l
10％銨明礬(硫酸鋁銨)水溶液 400m1
配製時先將蘇木精溶於無水酒精，待先全溶解後加入10％銨明礬水溶液
，充分攪動混合後

，注入細口瓶內
，瓶口用紗布封住。然後將瓶置於溫暖有光處3—4天後過濾
，濾後再加入100 m1甘油和100ml甲醇，混合均勻後，瓶口仍用紗布封口
，再置於光線充足處1—2月使之成熟。待顏色變成紫褐色時即為成熟。成熟後過濾，塞緊瓶口置於陰涼處貯存， 可長期保存，多年不壞。此液著色力較強，染數分鍾即可。也可用染液l份加蒸餾 水3—5份稀釋後使用，染色時間需延長一至數小時。此液染細胞核及嗜堿顆粒效果良好。染植物細胞的纖維壁比用其它任何染液著色更好。

2.8.4 染色
qiepiankeyongbutongfangfa，shiqiganzao，ranhoujinxingranse。yinweimeiyizhangzaipianshangzhantiedeshiladai
，yincibixuxianyongerjiabenquchushilazaiyongjiujingquchuerjiaben
，zaijinrushuizhong，cainengranse，ransedefangfahenduo，yaogenjumeizhangbiaobenyaoqiuxianshidemudexuanzebutongderanji，zuichangyongdeshisumujing
，yihongranse（簡稱 H·E 染色）。蘇su木mu精jing使shi細xi胞bao核he顯xian深shen紫zi色se，伊yi紅hong使shi細xi胞bao質zhi顯xian粉fen紅hong色se
，以yi此ci顯xian示shi清qing晰xi的de細xi胞bao形xing態tai和he核he的de大da小xiao，位wei置zhi，染ran色se後hou再zai根gen據ju製zhi片pian的de基ji本ben原yuan理li，使shi帶dai水shui的de載zai片pian經jing曆li脫tuo水shui→透明步驟最後用樹膠封片。
 
其步驟如下：
二甲苯→二甲苯→1/2二甲苯+1/2乙醇混合液→100%乙醇→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇→50%乙醇→30%乙醇→蘇木精染液→0.01%鹽酸→0.01%氫氧化鈉→蒸餾 水→30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→85%乙醇→伊紅染液→95%乙醇→100%乙醇→100%乙醇→1/2二甲苯+1/2乙醇混合液→二甲苯→二甲苯→封片

2.9鏡檢
、貼標簽、幹燥、記錄。