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無血清培養基的基本配方:基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。 用於生物製藥和疫苗生產的細胞在體外培養時，多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長；而當其在無血清、無蛋白培養基中生長時，由於缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細胞往往以懸浮形式生長。
添加組分
1. 促貼壁物質：許多細胞必須貼壁才能生長，這種情況下無血清培養基中一定要添加促貼壁和擴展因子，一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層(ceng)粘(zhan)連(lian)蛋(dan)白(bai)等(deng)。它(ta)們(men)還(hai)是(shi)重(zhong)要(yao)的(de)分(fen)裂(lie)素(su)以(yi)及(ji)維(wei)持(chi)正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)功(gong)能(neng)的(de)分(fen)化(hua)因(yin)子(zi)，對(dui)許(xu)多(duo)細(xi)胞(bao)的(de)繁(fan)殖(zhi)和(he)分(fen)化(hua)，起(qi)著(zhe)重(zhong)要(yao)作(zuo)用(yong)。纖(xian)連(lian)蛋(dan)白(bai)主(zhu)要(yao)促(cu)進(jin)來(lai)自(zi)中(zhong)胚(pei)層(ceng)細(xi)胞(bao)的(de)貼(tie)壁(bi)與(yu)分(fen)化(hua)，這(zhe)些(xie)細(xi)胞(bao)包(bao)括(kuo)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。
2. 促生長因子及激素：針對不同細胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些激素是許多細胞必不可少的，如胰島素。
3. 酶抑製劑：peiyangtiebishengchangdexibao，xuyaoyongyimeixiaohuachuandai，zaiwuxueqingpeiyangjizhongbibukeshaoxuhanmeiyizhiji，yizhongzhimeidexiaohuazuoyong，dadaobaohuxibaodemude。zuichangyongdeshidadouyimei；抑製劑。
4. 結合蛋白和轉運蛋白：常(chang)見(jian)如(ru)轉(zhuan)鐵(tie)蛋(dan)白(bai)和(he)牛(niu)血(xue)清(qing)白(bai)蛋(dan)白(bai)。牛(niu)血(xue)清(qing)白(bai)蛋(dan)白(bai)的(de)添(tian)加(jia)比(bi)較(jiao)大(da)，可(ke)增(zeng)加(jia)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)粘(zhan)度(du)，保(bao)護(hu)細(xi)胞(bao)免(mian)受(shou)機(ji)械(xie)損(sun)傷(shang)。許(xu)多(duo)旋(xuan)轉(zhuan)式(shi)培(pei)養(yang)的(de)無(wu)血(xue)清(qing)培(pei)養(yang)基(ji)都(dou)含(han)有(you)牛(niu)血(xue)清(qing)白(bai)蛋(dan)白(bai)。
5. 微量元素：硒是最常見的。
使用方法
目mu前qian，血xue清qing仍reng是shi動dong物wu細xi胞bao培pei養yang中zhong最zui基ji本ben的de的de添tian加jia物wu，尤you其qi是shi在zai原yuan代dai培pei養yang或huo者zhe細xi胞bao生sheng長chang狀zhuang況kuang不bu良liang時shi，常chang常chang會hui先xian使shi用yong有you血xue清qing的de培pei養yang液ye進jin行xing培pei養yang，待dai細xi胞bao生sheng長chang旺wang盛sheng以yi後hou，再zai換huan成cheng無wu血xue清qing培pei養yang液ye。細xi胞bao轉zhuan入ru無wu血xue清qing培pei養yang基ji培pei養yang要yao有you一yi個ge適shi應ying過guo程cheng，一yi般ban要yao逐zhu步bu降jiang低di血xue清qing濃nong度du，從cong10%減少到5%，3%，1%，直zhi至zhi無wu血xue清qing培pei養yang。在zai降jiang低di過guo程cheng中zhong要yao注zhu意yi觀guan察cha細xi胞bao形xing態tai是shi否fou發fa生sheng變bian化hua，是shi否fou有you部bu分fen細xi胞bao死si亡wang，存cun活huo細xi胞bao是shi否fou還hai保bao持chi原yuan有you的de功gong能neng和he生sheng物wu學xue特te性xing等deng。在zai實shi驗yan後hou這zhe些xie細xi胞bao一yi般ban不bu再zai繼ji續xu保bao留liu，很hen少shao有you細xi胞bao能neng夠gou長chang期qi培pei養yang於yu無wu血xue清qing培pei養yang基ji而er不bu發fa生sheng改gai變bian的de。細xi胞bao轉zhuan入ru無wu血xue清qing培pei養yang之zhi前qian，要yao留liu有you種zhong子zi細xi胞bao，種zhong子zi細xi胞bao按an常chang規gui培pei養yang於yu含han血xue清qing的de培pei養yang基ji中zhong，以yi保bao證zheng細xi胞bao的de特te性xing不bu發fa生sheng變bian化hua。
為了使細胞適應無血清培養，關鍵的是使所培養細胞：
1. 處於對數生長中期
2. >90% 活細胞率
3. 適應時以較高的起始細胞接種
細胞適應無血清培養基的方法
1. 直接適應--細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基（SFM）中。
2. 連續適應--分好幾步把細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基（SFM）中，與直接適應相比較，連續適應趨向對於細胞更加溫和一些。
特別需要強調的是：配(pei)製(zhi)無(wu)血(xue)清(qing)培(pei)養(yang)液(ye)必(bi)須(xu)使(shi)用(yong)高(gao)質(zhi)量(liang)的(de)水(shui)，如(ru)石(shi)英(ying)玻(bo)璃(li)蒸(zheng)餾(liu)器(qi)經(jing)三(san)次(ci)蒸(zheng)餾(liu)或(huo)超(chao)純(chun)水(shui)淨(jing)化(hua)裝(zhuang)置(zhi)製(zhi)備(bei)的(de)水(shui)。因(yin)為(wei)無(wu)血(xue)清(qing)培(pei)養(yang)基(ji)缺(que)乏(fa)了(le)血(xue)清(qing)中(zhong)天(tian)然(ran)成(cheng)分(fen)中(zhong)和(he)毒(du)素(su)、保護細胞的大分子，既便水中的有毒物質含量甚微，也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養能否成功的關鍵因素之一。
無血清培養基的優點
1. 可避免血清批次間的質量變動，提高細胞培養和實驗結果的重複性。
2. 避免血清對細胞的毒性作用和血清源性汙染。
3. 避免血清組分對實驗研究的影響。
4. 有利於體外培養細胞的分化。
5. 可提高產品的表達水平並使細胞產品易於純化。
