除(chu)了(le)某(mou)些(xie)細(xi)胞(bao)外(wai)的(de)多(duo)肽(tai)激(ji)素(su)和(he)某(mou)些(xie)蛋(dan)白(bai)質(zhi)與(yu)酶(mei)以(yi)外(wai)，對(dui)於(yu)細(xi)胞(bao)內(nei)或(huo)多(duo)細(xi)胞(bao)生(sheng)物(wu)組(zu)織(zhi)中(zhong)的(de)各(ge)種(zhong)生(sheng)物(wu)大(da)分(fen)子(zi)的(de)分(fen)離(li)純(chun)化(hua)
，都(dou)需(xu)要(yao)事(shi)先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)和(he)組(zu)織(zhi)破(po)碎(sui)，使(shi)生(sheng)物(wu)大(da)分(fen)子(zi)充(chong)分(fen)釋(shi)放(fang)到(dao)溶(rong)液(ye)中(zhong)，並(bing)不(bu)丟(diu)失(shi)生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)。不(bu)同(tong)的(de)生(sheng)物(wu)體(ti)或(huo)同(tong)一(yi)生(sheng)物(wu)體(ti)的(de)不(bu)同(tong)部(bu)位(wei)的(de)組(zu)織(zhi)，其(qi)細(xi)胞(bao)破(po)碎(sui)的(de)難(nan)易(yi)不(bu)一(yi)，使(shi)用(yong)的(de)方(fang)法(fa)也(ye)不(bu)相(xiang)同(tong)，如(ru)動(dong)物(wu)髒(zang)器(qi)的(de)細(xi)胞(bao)膜(mo)較(jiao)脆(cui)弱(ruo)
，容(rong)易(yi)破(po)碎(sui)，植(zhi)物(wu)和(he)微(wei)生(sheng)物(wu)由(you)於(yu)具(ju)有(you)較(jiao)堅(jian)固(gu)的(de)纖(xian)維(wei)素(su)、半纖維素組成的細胞壁，要采取專門的細胞破碎方法。

1.機械破碎

（1）研磨

yanmoshijiangjiansuidedongwuzuzhizhiyuyanbohuoyunjiangqizhong，jiarushaoliangshiyingshayanmohuoyunjiang，jikejiangdongwuxibaoposui
，zhezhongfangfabijiaowenhe，shiyishiyanshishiyong。gongyeshengchanzhongkeyongdianmoyanmo。xijunhezhiwuzuzhixibaodeposuiyekeyongcifa。

（2）勻漿

勻漿這是一種較劇烈的破碎細胞的方法，通常可先用家用食品加工機將組織打碎，然後再用10000r/min-20000r/min 的內刀式組織搗碎機（即高速分散器）將組織的細胞打碎，為了防止發熱和升溫過高，通常是轉10秒-20秒
，停10秒-20秒
，可反複多次。

（3）膠體磨

膠jiao體ti磨mo的de基ji本ben原yuan理li是shi流liu體ti或huo半ban流liu體ti物wu料liao在zai離li心xin力li的de作zuo用yong下xia，強qiang製zhi通tong過guo高gao速su相xiang對dui運yun動dong的de定ding齒chi與yu動dong齒chi之zhi間jian，使shi物wu料liao受shou到dao強qiang大da的de剪jian切qie力li，磨mo擦ca力li、高頻振動和高速旋渦等複雜力等作用，有效地被粉碎、乳化、均質

、hunhe
，congerdadaojingxichaoweidexiaoguo。dingzhuanzijiandegaosuxiangduiyundongshishijiaotimogongzuohuodewuliweixidudezhuyaotiaojian，zhiyoutigaomopandejingmiduyuxiansudu
，cainengdadaolianghaodejiagongxiaoguo。

2. 物理破碎

（1）壓榨

壓榨是一種溫和的
、徹底破碎細胞的方法。在1000×105Pa-2000×105Pa 的de高gao壓ya下xia使shi幾ji十shi毫hao升sheng的de細xi胞bao懸xuan液ye通tong過guo一yi個ge小xiao孔kong突tu然ran釋shi放fang至zhi常chang壓ya，細xi胞bao將jiang徹che底di破po碎sui。這zhe是shi一yi種zhong較jiao理li想xiang的de破po碎sui細xi胞bao的de方fang法fa
，但dan儀yi器qi費fei用yong較jiao高gao。

（2）冷熱交替

冷熱交替是在90℃左zuo右you維wei持chi數shu分fen鍾zhong
，立li即ji放fang入ru冰bing浴yu中zhong使shi之zhi冷leng卻que，如ru此ci反fan複fu多duo次ci
，絕jue大da部bu分fen細xi胞bao可ke以yi被bei破po碎sui，細xi菌jun或huo病bing毒du中zhong提ti取qu蛋dan白bai質zhi和he核he酸suan時shi可ke用yong此ci技ji術shu。

（3）反複凍融

反複凍融是將待破碎的細胞冷至15℃-20℃，然後放於室溫（或40℃）迅速融化，如此反複凍融多次

，由於細胞內形成冰粒使剩餘胞液的鹽濃度增高而引起細胞破碎。

（4）超聲波

chaoshengboshijiezhuchaoshengbodezhendongliposuixibaobihexibaoqi。posuiweishengwuxijunhejiaomujunshi，shijianyaochangyixie
，chulidexiaoguoyuyangpinnongduheshiyongpinlvyouguan。shiyongshizhuyijiangwen
，fangzhiguore。

3.化學與生物化學破碎

（1）有機溶劑

有機溶劑是利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶劑或SDS（十二烷基硫酸鈉）等表麵活性劑處理細胞
，

可將細胞膜溶解
，從而使細胞破裂，此技術也可以與研磨法聯合使用。

（2）自溶

自溶是將新鮮的生物材料存放於一定的pH 和適當的溫度下
，細胞結構在自身所具有的各種水解酶（如蛋白酶和酯酶等）dezuoyongxiafashengrongjie
，shixibaoneihanwushifangchulai，cifachengweizirongfa。gaifashiyongshiyaotebiexiaoxincaozuo，yinweishuijiemeibujinkeyishixibaobihemopohuai
，tongshiyeyoukenenghuibamouxieyaotiqudeyouxiaochengfenfenjie。

（3）溶脹

溶脹是在低滲溶液和低濃度的稀鹽溶液中
，由於存在滲透壓差，溶劑分子大量進入細胞，將細胞膜脹破釋放出細胞內含物。

（4）酶解

酶解是利用各種水解酶，如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶和酯酶等，於37℃
，pH8，處理15分鍾，可以專一性地將細胞壁分解，釋放出細胞內含物
，酶解破碎適用於多種微生物。例如從某些細菌細胞提取質粒DNA 時，可采用溶菌酶（來自蛋清）破細胞壁


，而在破酵母細胞時，常采用蝸牛酶（來自蝸牛）
，將酵母細胞懸於0.1mmol/L 檸檬酸一磷酸氫二鈉緩衝液（pH=5.4）中，加1%蝸牛酶
，在30℃處理30分鍾
，即可使大部分細胞壁破裂，如同時加入0.2%疏基乙醇效果會更好。此法可以與研磨聯合使用