一、流動相溶劑瓶的保養

溶劑瓶是流動相的起點，通常是盛放水相溶液或是有機相溶液。

1.水相溶液，對於水相溶液來說，首要的問題是防止汙染。對於溶劑瓶我們要做的非常重要的工作就是勤換流動相
，常換常新。

2.有(you)機(ji)相(xiang)溶(rong)液(ye)，對(dui)於(yu)有(you)機(ji)相(xiang)溶(rong)液(ye)，可(ke)以(yi)不(bu)用(yong)擔(dan)心(xin)細(xi)菌(jun)繁(fan)殖(zhi)的(de)問(wen)題(ti)。但(dan)是(shi)有(you)機(ji)相(xiang)容(rong)易(yi)發(fa)生(sheng)聚(ju)合(he)，特(te)別(bie)是(shi)乙(yi)腈(jing)在(zai)適(shi)宜(yi)的(de)光(guang)照(zhao)條(tiao)件(jian)下(xia)極(ji)易(yi)發(fa)生(sheng)聚(ju)合(he)

，瓶(ping)子(zi)裏(li)就(jiu)會(hui)出(chu)現(xian)一(yi)些(xie)絮(xu)狀(zhuang)的(de)聚(ju)合(he)沉(chen)澱(dian)物(wu)。為(wei)了(le)防(fang)止(zhi)聚(ju)合(he)過(guo)程(cheng)的(de)發(fa)生(sheng)，裝(zhuang)乙(yi)腈(jing)時(shi)要(yao)用(yong)棕(zong)色(se)的(de)溶(rong)劑(ji)瓶(ping)
，避(bi)免(mian)陽(yang)光(guang)直(zhi)射(she)，更(geng)換(huan)乙(yi)腈(jing)時(shi)應(ying)當(dang)棄(qi)去(qu)瓶(ping)底(di)剩(sheng)餘(yu)的(de)溶(rong)液(ye)。

3.清(qing)洗(xi)過(guo)濾(lv)，溶(rong)劑(ji)瓶(ping)裏(li)的(de)過(guo)濾(lv)頭(tou)，其(qi)作(zuo)用(yong)是(shi)為(wei)了(le)防(fang)止(zhi)溶(rong)液(ye)瓶(ping)中(zhong)的(de)顆(ke)粒(li)雜(za)質(zhi)進(jin)入(ru)到(dao)儀(yi)器(qi)的(de)流(liu)路(lu)係(xi)統(tong)中(zhong)，它(ta)的(de)材(cai)質(zhi)通(tong)常(chang)分(fen)為(wei)玻(bo)璃(li)燒(shao)結(jie)石(shi)英(ying)和(he)不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)，如(ru)果(guo)不(bu)慎(shen)堵(du)塞(sai)會(hui)造(zao)成(cheng)流(liu)動(dong)相(xiang)吸(xi)液(ye)不(bu)暢(chang)
，因(yin)此(ci)必(bi)須(xu)進(jin)行(xing)清(qing)洗(xi)，玻(bo)璃(li)材(cai)質(zhi)的(de)通(tong)常(chang)是(shi)用(yong)稀(xi)硝(xiao)酸(suan)泡(pao)，而(er)不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)材(cai)質(zhi)的(de)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)進(jin)行(xing)超(chao)聲(sheng)清(qing)洗(xi)。

二
、高壓泵的保養

泵(beng)是(shi)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的(de)核(he)心(xin)，泵(beng)將(jiang)流(liu)動(dong)相(xiang)從(cong)溶(rong)劑(ji)瓶(ping)輸(shu)送(song)到(dao)液(ye)相(xiang)流(liu)路(lu)係(xi)統(tong)中(zhong)，並(bing)要(yao)在(zai)高(gao)壓(ya)下(xia)保(bao)持(chi)流(liu)量(liang)和(he)壓(ya)力(li)的(de)穩(wen)定(ding)。狀(zhuang)態(tai)正(zheng)常(chang)的(de)高(gao)壓(ya)泵(beng)是(shi)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)準(zhun)確(que)分(fen)析(xi)的(de)基(ji)礎(chu)，所(suo)以(yi)平(ping)日(ri)一(yi)定(ding)要(yao)重(zhong)視(shi)對(dui)泵(beng)的(de)維(wei)護(hu)。

1.泵beng壓ya力li波bo動dong
，很hen多duo情qing況kuang下xia，泵beng的de問wen題ti反fan映ying在zai壓ya力li上shang，壓ya力li波bo動dong又you是shi常chang見jian的de一yi類lei問wen題ti。通tong常chang我wo們men可ke以yi通tong過guo重zhong新xin清qing洗xi流liu路lu和he再zai次ci脫tuo氣qi流liu動dong相xiang加jia以yi解jie決jue。

2.過濾白頭保養，在泵的維護裏還有一項常做的工作就是更換清洗閥上的過濾白頭
，通常判斷的標準是純水以5mL/min流速清洗的時候，如果壓力超過1MPa則考慮更換。

三、進樣器的保養

進樣器分手動和自動兩大類，雖然兩者工作模式不同，但使用的要點是基本一致的。

1.防fang止zhi交jiao叉cha汙wu染ran
，自zi動dong進jin樣yang器qi常chang見jian的de問wen題ti是shi交jiao叉cha汙wu染ran，交jiao叉cha汙wu染ran產chan生sheng的de原yuan因yin很hen直zhi接jie，樣yang品pin殘can留liu在zai進jin樣yang針zhen內nei外wai表biao麵mian
，並bing隨sui下xia一yi次ci進jin樣yang進jin入ru色se譜pu係xi統tong。要yao解jie決jue交jiao叉cha汙wu染ran，主zhu要yao靠kao清qing洗xi。

2.精細操作
，手動進樣器的操作要點大致相同，應使用液相色譜LC專用進樣針，進樣時插針應插到底
，不使用時將針頭留在進樣器內，使用前後都要及時清洗。

四、色譜柱的保養

色譜柱是化合物分離的關鍵。保養良好的色譜柱具有很高的塔板數，且儀器基線平穩。

1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料
，因此在調節流速時應該緩慢進行
，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。

2.應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中
，不應直接從有機溶劑改變為全部是水，反之亦然。

3.色譜柱反衝，納譜分析小分子分離液相色譜柱ChromCore係列和EcoPak係列色譜柱可以反衝；納譜分析手性色譜柱UniChiral係列色譜柱可以反衝，反衝可以除去留在柱頭的雜質。但是納譜分析生物大分子液相色譜柱BioCore係列色譜柱不要反衝
，否則反衝會迅速降低柱效。

4.選擇使用適宜的流動相（尤其是pH）
，yibimiangudingxiangbeipohuai。youshikeyizaijinyangqiqianmianlianjieyiyuzhu
，fenxizhushijianheguijiaoshi，yuzhuweiguijiao，keshiliudongxiangzaijinrufenxizhuzhiqianyuxianbeiguijiao“飽和”
，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。

5.避(bi)免(mian)將(jiang)基(ji)質(zhi)複(fu)雜(za)的(de)樣(yang)品(pin)尤(you)其(qi)是(shi)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)直(zhi)接(jie)注(zhu)入(ru)柱(zhu)內(nei)，需(xu)要(yao)對(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)行(xing)預(yu)處(chu)理(li)或(huo)者(zhe)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)和(he)色(se)譜(pu)柱(zhu)之(zhi)間(jian)連(lian)接(jie)一(yi)保(bao)護(hu)柱(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)一(yi)般(ban)是(shi)填(tian)有(you)相(xiang)似(si)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)短(duan)柱(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)可(ke)以(yi)而(er)且(qie)應(ying)該(gai)經(jing)常(chang)更(geng)換(huan)。

6.經jing常chang用yong強qiang溶rong劑ji衝chong洗xi色se譜pu柱zhu，清qing除chu保bao留liu在zai柱zhu內nei的de雜za質zhi。在zai進jin行xing清qing洗xi時shi，對dui流liu路lu係xi統tong中zhong流liu動dong相xiang的de置zhi換huan應ying以yi相xiang混hun溶rong的de溶rong劑ji逐zhu漸jian過guo渡du

，每mei種zhong流liu動dong相xiang的de體ti積ji應ying是shi柱zhu體ti積ji的de20倍左右
，即常規分析需要50-75ml。

下麵列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序，作為參考：

矽膠柱以正已烷（或庚烷）、二(er)氯(lv)甲(jia)烷(wan)和(he)甲(jia)醇(chun)依(yi)次(ci)衝(chong)洗(xi)
，然(ran)後(hou)再(zai)以(yi)相(xiang)反(fan)順(shun)序(xu)依(yi)次(ci)衝(chong)洗(xi)，所(suo)有(you)溶(rong)劑(ji)都(dou)必(bi)須(xu)嚴(yan)格(ge)脫(tuo)水(shui)。甲(jia)醇(chun)能(neng)洗(xi)去(qu)殘(can)留(liu)的(de)強(qiang)極(ji)性(xing)雜(za)質(zhi)
，已(yi)烷(wan)使(shi)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)重(zhong)新(xin)活(huo)化(hua)。

反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次衝洗，再以相反順序依次衝洗。

如果下一步分析用的流動相不含緩衝液，那麼可以省略最後用水衝洗這一步。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質，在甲醇（乙腈）衝洗時重複注射100-200µl四氫呋喃數次有助於除去強疏水性雜質。四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時也注射二甲亞碸數次。此外，用乙腈
、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脫能除去蛋白質汙染。

陽離子交換柱可用稀酸緩衝液衝洗
，陰離子交換柱可用稀堿緩衝液衝洗，除去交換性能強的鹽，然後用水
、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表麵的有機物）

、甲醇、水依次衝洗。

7.保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇


，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發幹燥。禁止將緩衝溶液留在柱內靜置過晚上或更長時間。

8.色譜柱使用過程中

，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗
；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被汙染；如果柱效降低或色譜峰變形
，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。

在後兩種情況發生時，小心擰開柱接頭
，用潔淨小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被汙染填料取淨）再把柱內填料整平。然後用適當溶劑濕潤的固定相（與柱內相同）填滿色譜柱
，壓平，再擰緊柱接頭。這樣處理後柱效能得到改善

，但是很難恢複到新柱的水平。

柱子失效通常是柱端部分
，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱（5-30mm），可以起到保護
、延長柱壽命的作用。采用保護柱會損失一定的柱效，這是值得的。

通常以矽膠為基質的色譜柱
，隻能在pH2-9範fan圍wei內nei使shi用yong。柱zhu子zi使shi用yong一yi段duan時shi間jian後hou，可ke能neng有you一yi些xie吸xi附fu作zuo用yong強qiang的de物wu質zhi保bao留liu於yu柱zhu頂ding
，特te別bie是shi一yi些xie有you色se物wu質zhi更geng易yi看kan清qing被bei吸xi著zhe在zai柱zhu頂ding的de填tian料liao上shang。新xin的de色se譜pu柱zhu在zai使shi用yong一yi段duan時shi間jian後hou柱zhu頂ding填tian料liao可ke能neng塌ta陷xian，使shi柱zhu效xiao下xia降jiang
，這zhe時shi也ye可ke補bu加jia填tian料liao使shi柱zhu效xiao恢hui複fu。

每次工作完後，用洗脫能力強的洗脫液衝洗，例如ODS柱宜用甲醇衝洗至基線平衡。當采用鹽緩衝溶液作流動相時，使用完後應用無鹽流動相衝洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用，應每隔4-5天開機衝洗15分鍾。

五、檢測器的保養

1.光源部分

檢(jian)測(ce)器(qi)中(zhong)非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao)的(de)部(bu)件(jian)是(shi)光(guang)源(yuan)
，光(guang)源(yuan)對(dui)發(fa)射(she)能(neng)量(liang)有(you)要(yao)求(qiu)
，一(yi)旦(dan)能(neng)量(liang)衰(shuai)減(jian)到(dao)一(yi)定(ding)程(cheng)度(du)
，就(jiu)會(hui)出(chu)現(xian)基(ji)線(xian)噪(zao)聲(sheng)變(bian)大(da)，靈(ling)敏(min)度(du)降(jiang)低(di)等(deng)一(yi)係(xi)列(lie)影(ying)響(xiang)使(shi)用(yong)的(de)問(wen)題(ti)
，因(yin)此(ci)光(guang)源(yuan)是(shi)一(yi)個(ge)消(xiao)耗(hao)品(pin)。通(tong)常(chang)紫(zi)外(wai)燈(deng)的(de)壽(shou)命(ming)是(shi)2000h，當到達這個時限的時候，我們就要特別關注燈的能量狀況
，可以通過儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”功能來判斷，測試的結果會分別評估低、中、高三個波長段的能量，一旦某個波長段的測試結果顯示失敗，就表示需要更換燈。

2.檢測池

jianceqizhonglingyigezhongyaobujianshijiancechi，yejiaoliutongchi。tongchangdajiaguanxindeyigewentishijiancechibeidudiao，yinweijiancechitongchangbushihennaiya，suoyiyidanbeidujiuhenkenengzaochengsunhuai。shishishangjiancechitongchangbutairongyibeidu，yuanyinshijihusuoyoudekelizazhidouhuibeisepuzhulanxiale，suoyidusaijianceqidedongxijibendoubushilaiziyangpinde，henkenengshihoulai“產生”的
，比如含鹽流動相殘留在檢測池中導致鹽析出。

六、廢液的處置 

液相色譜儀LCdefeiyedabufenhanyouyoujirongji，huiduirentichanshengyidingdeweihai，duihuanjingyehuichanshengwuran，yanjinsuiyiqingdao，yingjishichuli。muqian，guoneidabufenshiyanshishijiangfeiyesongdaozhuanmendefeiyechulizhanjizhongjinxingwuhaihuachuli。