lixinshijizhongzuoyongyusuoyoubutongmidulizideziranliyijiasuziranfenliguochengdeguocheng。tashitongguoshiguanzhongdemidulaifenlikelide。keyishiyongguolvhuochenjiangfangfajinxinglixin。lixinfenlidehexinshitongguochenjiangfenli。jiaomijidekelichenrurongqidibu,erjiaoqingdekelibaochixuanfu。lixinjiangzhihuanmidushenzhilveyoubutongdekeli,bingshouyixiasigeyinsudeyingxiang:樣品和溶液的密度,溫度和粘度,粒子位移的距離,旋轉速度。
01離心機種類
根據進樣方式分為連續離心機和非連續流離心機(分批離心機)
連續 ( 流 ) 離心機:進樣是連續進行的
非連續離心機(分批離心機):裝一次樣品後離心處理一次。
根據是否帶製冷功能分為常溫型離心機、冷凍型離心機和升溫型離心機。
常溫離心機:占地麵積小,離心期間樣品溫度會因摩擦生熱而上升。
冷凍離心機:houmianhuocemianzhuangyouyasuojiyijinxingzhudonglengque,zhandimianjibifeilengdongxingda,zailixinjieshuhoubuhuizidongdakailixinjigai,genjubutongdeyasuojixingneng,keyizaibutongshijianneijianglixinjilengquezhisuoxuwendu。yekezaichangshijiangaosulixinhourengbaochishedingwendu。
升溫型離心機: 部分特殊型號的離心機有加熱功能,可以主動給樣品加熱,保證樣品活性和質量。
不同的樣品分離時所需離心力不同,因此根據相對離心力大小可以將離心機分為低速離心機(≤6000r/min)、高速離心機(≤25000r/min)、超高速離心機(≥30000r/min)。
低速離心機:當物料的粒徑在1微米到50微米之間時,可以用低速離心機進行分離。通常用於細胞或者血液離心,最高離心力在幾百到幾千不等
高速離心機:能達到的離心力在 10,000 ~30,000×g 。分子生物學實驗最常用的離心力範圍是 14,000 - 20,000×g,病毒和細胞器的離心分離等應用需要 30,000 ×g的離心力。高速離心對離心管品質有較高要求。蛋白、核糖體、細菌溶解產物、病毒等物質的離心分離以及質譜用樣品的製備,建議使用可耐受高離心力的離心管。分離直徑約0.1~1微米的動植物組織中的病毒等物質時,推薦使用轉速為10000~20000轉,離心力約10000轉的高速冷凍離心機。
超速離心機:離心力達到 30,000×g 以上。通常需要配備特殊的轉子或者離心管來實現高速和高離心力。分離直徑約0.002~0.1微米的各種蛋白質、DNA、RNA等成分時,需要超速離心機,轉速在40000轉/分以上,離心力要達到100000g~400000g。
根據離心機的大小,可放在工作台上的稱為台式離心機,可放在地麵上的稱為落地式離心機。
落地式離心機:至少需要 1 平米的占地麵積,可以節約實驗台麵空間,主要用於高速或大容量離心
台式離心機: 台式離心機有多種規格尺寸。根據尺寸分為以下2 類:
多功能離心機:離心腔體大、轉子種類多。並提供多種規格和類型的適配器可供選擇。最大可耐受離心力主要取決於離心耗材的性能
小型離心機:適用於微量離心管,占地麵積小, 離心力為14,000 - 30,000×g,最多可以離心48個 1.5/2.0 mL 微量離心管。部分型號還可以離心15/50mL 離心管或者SBS標準規格的工作板。一般均提供冷凍和常溫兩種版本。
02離心原理
在離心力作用下,混合物質由於密度差異而沉積分離。離心時間由物質的密度和施加的離心力決定:
密度越大,越快沉降到達管底 ( 密度 = 質量 / 體積 )
離心力越大,離心分離時間越短
離心分離按照應用可分為離心沉降和離心過濾兩種
離心沉降
利用懸浮液(或乳濁液)密度不同的各組分在離心力場中迅速沉降分層的原理,實現液 - 固或液 - 液 ( 相 ) 分離。日常實驗應用有沉澱離心、密度梯度離心、等密度梯度離心等。
沉澱離心
是離心機最常見的應用,即通過離心使固體集聚沉澱在離心管底部從而與液體 ( 上清液 ) 分開。在相分離的過程中,溶質從分散狀態或者溶液介質中轉移到另外一種溶劑中 ( 來進行化學 / 分子生物學分析 )。
等密度梯度離心
是(shi)指(zhi)在(zai)離(li)心(xin)力(li)場(chang)下(xia),在(zai)密(mi)度(du)梯(ti)度(du)介(jie)質(zhi)中(zhong),顆(ke)粒(li)移(yi)動(dong)到(dao)與(yu)它(ta)們(men)各(ge)自(zi)的(de)密(mi)度(du)恰(qia)好(hao)相(xiang)等(deng)的(de)位(wei)置(zhi),形(xing)成(cheng)一(yi)係(xi)列(lie)密(mi)度(du)區(qu),從(cong)而(er)使(shi)不(bu)同(tong)密(mi)度(du)的(de)物(wu)質(zhi)得(de)到(dao)分(fen)離(li)。
離心過濾
shixuanfuyezailixinlichangxiachanshengdelixinyali,zuoyongzaiguolvjiezhishang,shiyetitongguoguolvjiezhichengweilvye,ergutikelibeijieliuzaiguolvjiezhibiaomian,congershixianye - 固分離。例如超濾膜離心分離純化大分子物。
03如何選擇合適的離心機
離心前請確保與參考實驗方案使用相同類型的轉子、相同的相對離心力、離心溫度以及離心時間。總的來說,要想成功離心,主要參考以下參數:
(1)樣品類型
(2)離心耗材
(3)離心機種類
(4)轉子類型
(5)適配器類型
(6)相對離心力
(7)離心所需溫度
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