眾zhong所suo周zhou知zhi，在zai反fan相xiang液ye相xiang色se譜pu中zhong，固gu定ding相xiang是shi非fei極ji性xing的de
，而er流liu動dong相xiang是shi極ji性xing的de。我wo們men如ru何he使shi流liu動dong相xiang呈cheng極ji性xing呢ne
？通tong過guo添tian加jia水shui這zhe樣yang的de水shui性xing組zu分fen。然ran而er，添tian加jia水shui的de比bi例li有you限xian製zhi，不bu能neng使shi用yong含han水shui量liang過guo高gao的de流liu動dong相xiang進jin行xing反fan相xiang液ye相xiang色se譜pu分fen析xi
，如ru90%、95%甚至100%。那麼，這是什麼原因呢？

首(shou)先(xian)，我(wo)們(men)需(xu)要(yao)了(le)解(jie)為(wei)什(shen)麼(me)要(yao)使(shi)用(yong)高(gao)含(han)水(shui)量(liang)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)。原(yuan)因(yin)可(ke)能(neng)是(shi)為(wei)了(le)保(bao)留(liu)高(gao)極(ji)性(xing)分(fen)子(zi)，如(ru)有(you)機(ji)酸(suan)。例(li)如(ru)抗(kang)壞(huai)血(xue)酸(suan)，這(zhe)些(xie)分(fen)子(zi)在(zai)性(xing)質(zhi)上(shang)是(shi)高(gao)極(ji)性(xing)的(de)
，它(ta)們(men)在(zai)反(fan)相(xiang)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)中(zhong)不(bu)會(hui)被(bei)充(chong)分(fen)保(bao)留(liu)，因(yin)為(wei)我(wo)們(men)的(de)固(gu)定(ding)相(xiang)是(shi)非(fei)極(ji)性(xing)的(de)

，而(er)非(fei)極(ji)性(xing)固(gu)定(ding)相(xiang)不(bu)會(hui)保(bao)留(liu)這(zhe)些(xie)極(ji)性(xing)化(hua)合(he)物(wu)。因(yin)此(ci)，需(xu)要(yao)在(zai)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)添(tian)加(jia)高(gao)比(bi)例(li)的(de)水(shui)相(xiang)。這(zhe)是(shi)因(yin)為(wei)水(shui)是(shi)一(yi)種(zhong)極(ji)性(xing)溶(rong)劑(ji)
，它(ta)能(neng)夠(gou)與(yu)極(ji)性(xing)較(jiao)強(qiang)的(de)分(fen)析(xi)物(wu)形(xing)成(cheng)氫(qing)鍵(jian)或(huo)離(li)子(zi)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)
，從(cong)而(er)降(jiang)低(di)分(fen)析(xi)物(wu)在(zai)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)的(de)溶(rong)解(jie)度(du)
，有(you)利(li)於(yu)分(fen)析(xi)物(wu)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)上(shang)的(de)保(bao)留(liu)和(he)分(fen)離(li)。

接下來，我們需要了解C8或C18固定相的性質。C8/C18是一種常用的反相液相色譜柱
，其表麵鍵合有C8或C18烷基鏈，具有類似油脂的非極性特性。在反相色譜法中，分析物在流動相和固定相之間進行分配
，以實現分離。由於C8/C18柱的固定相非極性，它們通常適用於分析非極性或弱極性分析物。然而，油水不能混合
，類似油脂的非極性特性使得C8或C18固定相在高比例水相中不能被潤濕。當流動相中有一定比例的有機溶劑，如乙腈或甲醇（其性質為非極性）時，對C8或C18具有良好的潤濕性。而鍵合的固定相是位於矽膠孔內的，這意味流動相能夠潤濕C8或C18固定相的孔。這一點是非常重要的，否則它們將無法實現對目標分析物的保留。然而，如果使用100%的水相作為流動相，這會使C8或C18jianhegudingxiangganhe。yinweishuijuyoujiaogaodebiaomianzhangli，liujinggudingxiangdeshuifenzibuhuijinrukongnei
，erzhihuitongguokongzhijiandekongjian。zheyangyilai，kongjiubuhuidakai，ruguokongmeiyoubeirunshi，namegudingxiangwufachuyuhuoyuezhuangtai
，bunengyufenxiwufashengxianghuzuoyong。zhejiushizaifanxiangyexiangsepuzhongshiyongC8/C18柱時要避免高水相流動相的原因。

當C8/C18固定相暴露在高水相流動相中時，由於表麵張力較高
，C8/C18表麵會脫水，這種現象稱為固定相塌陷、鏈折疊或固定相打結，化合物無法正常地與固定相發生相互作用進行保留。

那麼，固定相塌陷會帶來哪些問題呢？固定相塌陷可能會導致保留減少
、保bao留liu時shi間jian的de不bu重zhong複fu的de現xian象xiang。並bing且qie如ru果guo想xiang再zai次ci從cong幹gan涸he狀zhuang態tai恢hui複fu到dao潤run濕shi狀zhuang態tai
，這zhe個ge反fan向xiang過guo程cheng將jiang需xu要yao很hen長chang的de時shi間jian。保bao留liu的de減jian少shao是shi因yin為wei鍵jian合he固gu定ding相xiang的de活huo性xing表biao麵mian存cun在zai於yu矽gui膠jiao孔kong中zhong，而er孔kong內nei沒mei有you被bei潤run濕shi，化hua合he物wu也ye無wu法fa進jin入ru孔kong內nei與yu其qi發fa生sheng相xiang互hu作zuo用yong。因yin此ci，保bao留liu時shi間jian會hui減jian少shao。例li如ru
，如ru果guo使shi用yong90%的水和10%的甲醇作為流動相
，保留時間為10分鍾。此時
，如果隻使用100%的水

，10分鍾的保留時間會急劇減少到3~4分(fen)鍾(zhong)。第(di)二(er)個(ge)重(zhong)要(yao)的(de)點(dian)是(shi)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)的(de)重(zhong)複(fu)性(xing)會(hui)降(jiang)低(di)
，可(ke)能(neng)會(hui)隨(sui)著(zhe)時(shi)間(jian)的(de)推(tui)移(yi)而(er)發(fa)生(sheng)變(bian)化(hua)。所(suo)以(yi)

，如(ru)果(guo)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)變(bian)化(hua)很(hen)大(da)，可(ke)能(neng)是(shi)因(yin)為(wei)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)水(shui)含(han)量(liang)較(jiao)高(gao)。

如果別無選擇，隻能使用水性或高比例水相的流動相
，那麼在方法開發階段
，需要注意選擇合適的色譜柱。

1.未封端色譜柱。未封端柱表麵存在較多的具有一定極性的遊離矽醇，遊離矽醇使固定相表麵能被潤濕，有利於極性分析物的保留。

2.短鏈烷基色譜柱：鍵合鏈之間存在遊離體積，矽醇的屏蔽作用很小，有利於極性分析物的分離。

3.極性嵌入烷基相色譜柱：在烷基鏈中嵌入極性基團
，增強與極性分析物之間的相互作用，提高保留性能。

4.寬孔徑相色譜柱：以便水可以滲透到孔內使相濕潤，有利於極性分析物在高水相流動相下的保留。

綜上所述
，在使用C8/C18sepuzhushi
，yingbimiangaoshuixiangliudongxiang，yimianzaochenggudingxiangtaxiandengwenti。zhenduigaoshuixiangliudongxiangxiabaoliujixingfenxiwudexuqiu，keyixuanzeqitaleixingdesepuzhujinxingfenxi。