一、物理方法
1、溫度
利用溫度進行滅菌、消xiao毒du或huo防fang腐fu,是shi最zui常chang用yong而er又you方fang便bian有you效xiao的de方fang法fa。高gao溫wen可ke使shi微wei生sheng物wu細xi胞bao內nei的de蛋dan白bai質zhi和he酶mei類lei發fa生sheng變bian性xing而er失shi活huo,從cong而er起qi滅mie菌jun作zuo用yong,低di溫wen通tong常chang起qi抑yi菌jun作zuo用yong。
1)幹熱滅菌法:
a.灼燒滅菌法:利用火焰直接把微生物燒死。此法徹底可靠,滅菌迅速,但易焚毀物品,所以使用範圍有限,隻適合於接種針、環、試管口及不能用的汙染物品或實驗動物的屍體等的滅菌。
b.幹熱空氣滅菌法:這是實驗室中常用的一種方法,即把待滅菌的物品均勻地放入烘箱中,升溫至160°C,恒溫1小時即可。此法適用於玻璃皿、金屬用具等的滅菌。
2)濕熱滅菌法:
在zai同tong樣yang的de溫wen度du下xia,濕shi熱re滅mie菌jun的de效xiao果guo比bi幹gan熱re滅mie菌jun好hao,這zhe是shi因yin為wei一yi方fang麵mian細xi胞bao內nei蛋dan白bai質zhi含han水shui量liang高gao,容rong易yi變bian性xing。另ling一yi方fang麵mian高gao溫wen水shui蒸zheng汽qi對dui蛋dan白bai質zhi有you高gao度du的de穿chuan透tou力li,從cong而er加jia速su蛋dan白bai質zhi變bian性xing而er迅xun速su死si亡wang。
a.巴氏消毒法:有些食物會因高溫破壞營養成分或影響質量,如牛奶、醬油、啤(pi)酒(jiu)等(deng),所(suo)以(yi)隻(zhi)能(neng)用(yong)較(jiao)低(di)的(de)溫(wen)度(du)來(lai)殺(sha)死(si)其(qi)中(zhong)的(de)病(bing)原(yuan)微(wei)生(sheng)物(wu),這(zhe)樣(yang)既(ji)保(bao)持(chi)食(shi)物(wu)的(de)營(ying)養(yang)和(he)風(feng)味(wei),又(you)進(jin)行(xing)了(le)消(xiao)毒(du),保(bao)證(zheng)了(le)食(shi)品(pin)衛(wei)生(sheng)。該(gai)法(fa)一(yi)般(ban)在(zai)62°C,30分鍾既可達到消毒目的。此法為法國微生物學家巴斯德首創,故名為巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法:直接將要消毒的物品放入清水中,煮沸15分鍾,即可殺死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸,則效果更好。此法適用於注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.間歇滅菌法:shangshuliangzhongfangfazaichangyaxia,zhinengqidaoxiaoduzuoyong,erhennanzuodaowanquanwujun。ruocaiyongjianxiemiejundefangfa,jiunengshamiewupinzhongsuoyoudeweishengwu。jutizuofashi:將待滅菌的物品加熱至100°C,15~30分鍾,殺死其中的營養體。然後冷卻,放入37°C恒溫箱中過夜,讓殘留的芽孢萌發成營養體。第2天再重複上述步驟,三次左右,就可達到滅菌的目的。此法不需加壓滅菌鍋,適於推廣,但操作麻煩,所需時間長。
d. 加壓蒸汽滅菌法:這是發酵工業、醫療保健、食品檢測和微生物學實驗室中最常用的一種滅菌方法。它適用於各種耐熱、體積大的培養基的滅菌,也適用於玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。
jiayazhengqimiejunshibadaimiejundewupinfangzaiyigekemibidejiayazhengqimiejunguozhongjinxingde,yidaliangzhengqishiqizhongyalishenggao。youyuzhengqiyadeshangsheng,shuidefeidianyesuizhitigao。zaizhengqiyadadao1.055公斤/厘米2時,加壓蒸汽滅菌鍋內的溫度可達到121°C.在這種情況下,微生物(包括芽孢)在15~20分鍾便會被殺死,而達到滅菌目的。如滅菌的對象是砂土、石蠟油等麵積大、含菌多、傳熱差的物品,則應適當延長滅菌時間。
在zai加jia壓ya蒸zheng汽qi滅mie菌jun中zhong,要yao引yin起qi注zhu意yi的de一yi個ge問wen題ti是shi,在zai恒heng壓ya之zhi前qian,一yi定ding要yao排pai盡jin滅mie菌jun鍋guo中zhong的de冷leng空kong氣qi,否fou則ze表biao上shang的de蒸zheng汽qi壓ya與yu蒸zheng汽qi溫wen度du之zhi間jian不bu具ju對dui應ying關guan係xi,這zhe樣yang會hui大da大da降jiang低di滅mie菌jun效xiao果guo。
3)影響滅菌的因素
a.不同的微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數微生物的營養體和病毒在50~65°C,10分鍾就會被殺死;但各種孢子、特別是芽孢最能抗熱,其中抗熱性最強的是嗜熱脂肪芽孢杆菌,要在121°C,12分鍾才被殺死。對同種微生物來講,幼齡菌比老齡菌對熱更敏感。
b.微生物的數量多少顯然會影響滅菌的效果,數量越多,熱死時間越長。
c.培養基的成分與組成也會影響滅菌效果。一般地講,蛋白質、糖或脂肪存在,則提高抗熱性,pH在7附近,抗熱性最強,偏向兩極,則抗熱能力下降,而不同的鹽類可能對滅菌產生不同的影響;固體培養基要比液體培養基滅菌時間長。
4)滅菌對培養基成分的影響
a.pH值普遍下降。
b.產生混濁或沉澱,這主要是由於一些離子發生化學反應而產生混濁或沉澱。例如Ca+2與PO4-3化合,就會產生磷酸鈣沉澱。
c.不少培養基顏色加深。
d.體積和濃度有所變化。
e.營養成分有時受到破壞。
2、輻射
利用輻射進行滅菌消毒,可以避免高溫滅菌或化學藥劑消毒的缺點,所以應用越來越廣,目前主要應用在以下幾個方麵:
1)接種室、手術室、食品、藥物包裝室常應用紫外線殺菌。
2)應用β射線作食品表麵殺菌,γ射線用於食品內部殺菌。經輻射後的食品,因大量微生物被殺滅,再用冷凍保藏,可使保存期延長。
3、過濾
采(cai)用(yong)機(ji)械(xie)方(fang)法(fa),設(she)計(ji)一(yi)種(zhong)濾(lv)孔(kong)比(bi)細(xi)菌(jun)還(hai)小(xiao)的(de)篩(shai)子(zi),做(zuo)成(cheng)各(ge)種(zhong)過(guo)濾(lv)器(qi)。通(tong)過(guo)過(guo)濾(lv),隻(zhi)讓(rang)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)從(cong)篩(shai)子(zi)中(zhong)流(liu)下(xia),而(er)把(ba)各(ge)種(zhong)微(wei)生(sheng)物(wu)菌(jun)體(ti)留(liu)在(zai)篩(shai)子(zi)上(shang)麵(mian),從(cong)而(er)達(da)到(dao)除(chu)菌(jun)的(de)目(mu)的(de)。這(zhe)種(zhong)滅(mie)菌(jun)方(fang)法(fa)適(shi)用(yong)於(yu)一(yi)些(xie)對(dui)熱(re)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)體(ti)積(ji)小(xiao)的(de)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)滅(mie)菌(jun)以(yi)及(ji)氣(qi)體(ti)的(de)滅(mie)菌(jun)。它(ta)的(de)最(zui)大(da)優(you)點(dian)是(shi)不(bu)破(po)壞(huai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)各(ge)種(zhong)物(wu)質(zhi)的(de)化(hua)學(xue)成(cheng)分(fen)。但(dan)是(shi)比(bi)細(xi)菌(jun)還(hai)小(xiao)的(de)病(bing)毒(du)仍(reng)然(ran)能(neng)留(liu)在(zai)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)內(nei),有(you)時(shi)會(hui)給(gei)實(shi)驗(yan)帶(dai)來(lai)一(yi)定(ding)的(de)麻(ma)煩(fan)。
二、化學方法
一般化學藥劑無法殺死所有的微生物,而隻能殺死其中的病原微生物,所以是起消毒劑的作用,而不是滅菌劑。
nengxunsushamiebingyuanweishengwudeyaowu,chengweixiaoduji。nengyizhihuozuzhiweishengwushengchangfanzhideyaowu,chengweifangfuji。danshiyizhonghuaxueyaowushishajunhaishiyijun,changbuyiyangequfen。xiaodujizaidinongdushiyenengshajun(如1:1000硫柳汞)。youyuxiaodufangfujimeiyouxuanzexing,yinciduiyiqiehuoxibaodouyouduxing,bujinnengshasihuoyizhibingyuanweishengwu,erqieduirentizuzhixibaoyeyousunshangzuoyong,suoyizhinengyongyutibiao、器械、排泄物和周圍環境的消毒。常用的化學消毒劑有:石碳酸、來蘇水(甲醛溶液)、氯化汞、碘酒、酒精等。
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