操作方法一：

1.以無菌操作取檢樣25g（或25ml)，放於225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內（瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內
，經充分振搖或研磨製成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液後，最好置滅菌均質器中以8000~10000r/min的速度處理1min，製成1：10的均勻稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內
，振搖試管混合均勻
，製成1：100的稀釋液。另取1ml滅菌吸管
，按上項操作順序，製10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次即換用1支1ml滅菌吸管。

2.無菌操作：操作中必須有“無菌操作”的概念，所用玻璃器皿必須是完全滅菌的，不得殘留有細菌或抑菌物質。所用剪刀、鑷子等器具也必須進行消毒處理。樣品如果有包裝，應用75%乙醇在包裝開口處擦拭後取樣。操作應當在超淨工作台或經過消毒處理的無菌室進行。瓊脂平板在工作台暴露15分鍾，每個平板不得超過15個菌落。

3.采樣的代表性：如係固體樣品
，取樣時不應集中一點，宜多采幾個部位。固體樣品必須經過均質或研磨
，液體樣品須經過振搖，以獲得均勻稀釋液。

4.樣品稀釋誤差：為(wei)減(jian)少(shao)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)誤(wu)差(cha)，在(zai)連(lian)續(xu)遞(di)次(ci)稀(xi)釋(shi)時(shi)
，每(mei)一(yi)稀(xi)釋(shi)液(ye)應(ying)充(chong)分(fen)振(zhen)搖(yao)


，使(shi)其(qi)均(jun)勻(yun)
，同(tong)時(shi)每(mei)一(yi)稀(xi)釋(shi)度(du)應(ying)更(geng)換(huan)一(yi)支(zhi)吸(xi)管(guan)。在(zai)進(jin)行(xing)連(lian)續(xu)稀(xi)釋(shi)時(shi)，應(ying)將(jiang)吸(xi)管(guan)內(nei)液(ye)體(ti)沿(yan)管(guan)壁(bi)流(liu)入(ru)
，勿(wu)使(shi)吸(xi)管(guan)尖(jian)端(duan)伸(shen)入(ru)稀(xi)釋(shi)液(ye)內(nei)，以(yi)免(mian)吸(xi)管(guan)外(wai)部(bu)粘(zhan)附(fu)的(de)檢(jian)液(ye)溶(rong)於(yu)其(qi)內(nei)。為(wei)減(jian)少(shao)稀(xi)釋(shi)誤(wu)差(cha)，SN標準采用取10mL稀釋液，注入90mL緩衝液中。

5.稀釋液：樣品稀釋液主要是滅菌生理鹽水，有的采用磷酸鹽緩衝液（或0.1%蛋白腖水），後者對食品中已受損傷的細菌細胞有一定的保護作用。如對含鹽量較高的食品（如醬油）進行稀釋，可以采用滅菌蒸餾水。 

 
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