【文章來源】藥物微生物檢驗公眾號

藥品中的成分複雜，包括有效成分、輔料（澱粉、糊精
、色素等）
，這(zhe)些(xie)成(cheng)分(fen)當(dang)中(zhong)的(de)有(you)機(ji)物(wu)很(hen)容(rong)易(yi)遭(zao)受(shou)微(wei)生(sheng)物(wu)汙(wu)染(ran)。在(zai)藥(yao)品(pin)生(sheng)產(chan)過(guo)程(cheng)中(zhong)，微(wei)生(sheng)物(wu)檢(jian)測(ce)是(shi)評(ping)價(jia)產(chan)品(pin)質(zhi)量(liang)和(he)安(an)全(quan)性(xing)的(de)重(zhong)要(yao)指(zhi)標(biao)之(zhi)一(yi)。在(zai)微(wei)生(sheng)物(wu)檢(jian)測(ce)的(de)過(guo)程(cheng)中(zhong)，菌(jun)種(zhong)保(bao)藏(zang)是(shi)一(yi)項(xiang)重(zhong)要(yao)的(de)基(ji)礎(chu)性(xing)工(gong)作(zuo)。使(shi)用(yong)正(zheng)確(que)的(de)方(fang)法(fa)對(dui)菌(jun)種(zhong)進(jin)行(xing)保(bao)藏(zang)可(ke)以(yi)有(you)效(xiao)地(di)避(bi)免(mian)菌(jun)種(zhong)的(de)死(si)亡(wang)、退化和汙染，便於生產及科學研究。國家也頒布了相應的法規和標準。

一、菌種的複蘇

1.製備菌懸液母液：根據微生物的種類，向凍幹菌種管中加入適量適合微生物生長的培養液（如表1.1^[1] 注意是液體培養基），混合均勻。

表1.1 不同菌種適用的液體培養基

2.將菌懸液按照合適的比例加入到含有培養液的試管中
，根據微生物的種類確定培養溫度和培養時間（表1.2）^[1]
，進行菌種複蘇。培養後的微生物為第1代培養物。

表1.2 不同菌種的培養溫度和培養時間

二

、菌種傳代

1.根據菌株種類選擇合適的固體平皿培養板（如表2.1^[1]注意是固體培養基），取第1代培養物進行劃線接種，並在適宜溫度和培養時間下培養。平皿上長出的菌落為第2代培養物。

表2.1 不同菌種適用的固體培養基

2.在含有第2代培養物的平皿上挑取典型菌落
，接種到相應的培養基平皿或斜麵上
，在適宜溫度和培養時間下培養（表2.2）^[1]
，記為第3代培養物。

表2.2 不同菌種的培養溫度和培養時間

3.按照上述方法將菌種培養至所需代數即可。

三
、流程示意圖

四、操作要點

1.選擇合適的培養基很重要。

2.全程無菌操作
，避免汙染。

3.培養時間不要過長。

4.信息標注很重要（菌種名稱
、菌種號、代數、傳代日期等）。

五、參考文獻

[1]WST683-2020 消毒試驗用微生物要求

具體的操作細節依據標準即可，小編就不贅述了。需要WS/T 683電子版的小夥伴記得關注公眾號後
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