建立藥品的微生物限度檢查shi，jinxingkongzhijunjianzhafangfadeyanzheng，yiquerensuocaiyongdefangfashiheyugaiyaopindedekongzhijunjianzhafangfaceding。ruoyaopindezufenhuoyuanjianyantiaojianfashenggaibiankenengyingxiangjianyanjieguoshi，jianyanfangfayingjinxingzhongxinyanzheng。yanzhengshiyanyekeyugongshipindekongzhijunjianzhatongshijinxing。大腸埃希菌（Esherichia coli）【CMCC(B) 44102】或同等有效的金黃色葡萄球菌（ Staphylococcus）【CMCC(B)26003】或同等有效的乙型付傷寒沙門菌（Salmonella paratyphi B）【CMCC(B) 50094】或同等有效的銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）【CMCC (B) 10104】或同等有效的驗證實驗所用的菌株傳代次數不得超過5代（從菌種保存中心獲得的冷凍幹燥菌種為0 代），並采用適宜的菌種保藏技術，以保證試驗菌株的生物學特性。
大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型付傷寒沙門菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養物至10mL營養肉湯培養基中，35～37℃培養18～24小時；
分別取培養液1mL加0.9%無菌氯化鈉溶液，采用10倍遞增稀釋法，稀釋至10-5~10-7，製成每1ml含菌數10～100CFU的菌懸液。
設立陰性菌對照組是為了驗證該控製菌檢查方法的專屬性。方法同試驗組，驗證大腸埃希菌、大腸菌群、沙門菌檢查法時的陰性對照菌采用金黃色葡萄球菌；驗證銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、梭菌檢查法時的陰性對照菌采用大腸埃希菌。陰性對照菌不得檢出。
【大腸埃希菌】取相當於1g或1mL供試品的供試液至100mL膽鹽乳糖培養基中，陽性菌對照加入大腸埃希菌10～100CFU，陰性菌對照加入金黃色葡萄球菌 10～100CFU，35～37℃培養18～24小時，取此培養物按《微生物限度檢查SOP》大腸埃希菌項下規定檢查。
【大腸菌群】取含適量（不少於10ml）的膽鹽乳糖發酵培養基管3支，分別加入含供試品1g或1mL 、0.1g或0.1mL、含供試品0.001g或0.001mL的供試液，陽性菌對照加入大腸埃希菌10～100CFU，陰性菌對照加入金黃色葡萄球菌 10～100CFU，35～37℃培養18～24小時，按《微生物限度檢查SOP》大腸菌群項下規定檢查。
【沙門菌】 取供試品10g或10mL，直接或處理後接種至適量（不少於200mL）的營養肉湯培養基中，用勻漿儀或其他適宜方法混勻，陽性菌對照加入沙門菌 10～100CFU，陰性菌對照加入金黃色葡萄球菌10～100CFU，35～37℃培養18～24小時。按《微生物限度檢查SOP》沙門菌項下規定檢查。
【銅綠假單胞菌】取相當於1g或1mL供試品的供試液至100mL膽鹽乳糖培養基中，陽性菌對照加入銅綠假單胞菌10～100CFU，陰性菌對照加入大腸埃希菌10～100CFU，35～37℃培養18～24小時。按《微生物限度檢查SOP》沙門菌項下規定檢查。
【金黃色葡萄球菌】取相當於1g或1mL供試品的供試液至100mL膽鹽乳糖培養基中，陽性菌對照加入金黃色葡萄球菌10～100CFU，陰性菌對照加入大腸埃希菌 10～100CFU，35～37℃培養18～24小時。按《微生物限度檢查SOP》金黃色葡萄球菌項下規定檢查。
供試品有抑菌作用，放大培養基量，由1：100放大到1：300、1：500或1：1000，由於容器體積限製，一般放大到500mL或1000mL，本法適用於抑菌作用不強的樣品。采用薄膜過濾法時，取規定量供試液，過濾，衝洗，試驗菌應加在最後一次衝洗液中，過濾後，注入培養基或取出濾膜接入增菌培養基中。
取規定量供試液，如供試液含許多藥渣，先以500轉/分鍾離心3~5分鍾，取全部上清液，再以3000轉/分離心20分鍾，取下麵1mL液體，並將適量的稀釋劑洗滌管底的洗滌液一並移入同瓶增菌液中，培養，本法適用於中度抑菌作用的樣品。
在供試品溶液中加入相應的中和劑，yijianchugongshipinzhongyijunchengfendezuoyong，zhonghejiyingduiweishengwuwuduxing，yuyijunchengfenjiehehoudechanwuyingduiweishengwuyiwuduxing，huoyouduxingdanbuyingxiangdaijianjundejianchu。
至少應進行3次(ci)獨(du)立(li)平(ping)行(xing)試(shi)驗(yan)。陰(yin)性(xing)菌(jun)對(dui)照(zhao)組(zu)不(bu)得(de)檢(jian)出(chu)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)菌(jun)。若(ruo)試(shi)驗(yan)組(zu)檢(jian)出(chu)試(shi)驗(yan)菌(jun)，照(zhao)該(gai)供(gong)試(shi)液(ye)製(zhi)備(bei)方(fang)法(fa)和(he)控(kong)製(zhi)菌(jun)檢(jian)查(zha)法(fa)進(jin)行(xing)該(gai)供(gong)試(shi)品(pin)控(kong)製(zhi)菌(jun)的(de)檢(jian)查(zha)；若試驗組未檢出試驗菌，應采用自然沉降法、培養基稀釋法、離心沉澱集菌法、薄膜過濾法、中和法等方法或聯合使用這些方法消除供試品的抑菌活性，並重新進行方法驗證。
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